论文摘要
促红细胞生成素（erythropoietin,EPO）,是一种刺激红细胞生成的糖蛋白激素,分子量为30.4KD,临床上主要用于肾性贫血以及其他贫血的治疗。目前临床上主要使用通过基因工程生产的重组人红细胞生成素。EPO在治疗某些肾性贫血和恶性肿瘤贫血时往往剂量较大,疗程较长,需要长期频繁的注射,给患者带来不便。我们选择生物降解的胶原蛋白作为包裹材料,通过特殊工艺将EPO包裹在胶原蛋白中制成了一种新型的制剂——双层微条（double layer minipellet,DLMP）;由于胶原蛋白具有独特的性质,使得双层微条具有安全、缓释、载药量大的优点,可以达到提高EPO在制剂中的稳定性,减少给药次数等目的。 为控制EPO双层微条的质量,建立了测定EPO-DLMP中EPO含量的高效液相色谱法（HPLC）,该方法能准确测定EPO-DLMP中EPO的含量。对EPO-DLMP的制备工艺进行优化,以累积释放百分率为指标,单因素考察了胶原蛋白与EPO的含量比、硫酸软骨素钠的含量、喷嘴外管内径和微条的长度对体外释放的影响,并对这几个主要因素采用正交试验筛选出了最佳取值:胶原蛋白—EPO比例为1000:1,硫酸软骨素钠含量为1%,喷嘴外管内径为1.4mm,微条的长度为15mm,按此处方制备的EPO的双层微条体外释放偏离度为7.59。 采用ELISA法检测EPO-DLMP中的EPO含量来研究EPO双层微条的稳定性。将EPO双层微条在4℃和25%相对湿度的条件下避光放置,在第7d、30d时分别测定EPO的效价,并与最初的效价值相比较,评价双层微条制剂的稳定性。结果:EPO双层微条于该条件下其EPO效价没有显著性变化,表明制剂较稳定。 家兔皮下注射EPO-DLMP后药代动力学研究,采用ELISA法测定EPO血药浓度,计算药代动力学参数,并在皮下注射市售促红细胞生成素注射液（EPO-Ⅰ）后两者作比较,双层微条组具有较长的消除半衰期,更大的血药浓度—时间曲线下面积,较低的总体清除率和较长的达峰时间（P<0.05）。采用网织红细胞计数法比较家兔皮下注射EPO-DLMP和EPO-Ⅰ的药效,结果:双层微条具有更持久增加网织红细胞数的作用,这意味着EPO包裹于双层微条中更有利于提高其治疗贫血的作用。
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