苦参碱对体外培养的人角膜成纤维细胞的影响

论文摘要

目的初步探讨苦参碱（Matrine,简称Mat）对体外培养的人角膜成纤维细胞（human corneal fibroblasts,HCFs）增殖的影响及其可能的影响机制,力图寻找一种新的用于防治准分子激光角膜屈光术后haze形成的药物。方法将分离培养的HCFs纯化鉴定后,台盼蓝与MTT法观察HCFs体外生长特性。采用不同浓度的Mat干预,同时设立阳性对照组、空白对照组及溶媒对照组。在用药后的不同时间（24h、48h、72h）,用MTT比色法测定药物对细胞增殖的影响,并算出抑制率和IC50;将所选择药物浓度分别作用于HCFs后,用RT-PCR分别从时效及量效两方面检测苦参碱对HCFsⅠ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达的影响。结果1.MTT比色法结果显示:用不同浓度的Mat处理HCFs24h、48h和72h后,HCFs的增殖与空白对照组相比均表现为不同程度的明显抑制（P<0.05）,并且这种抑制呈明显的剂量-时间依赖性。同时发现,160mg/L Mat对HCFs增殖的抑制作用强于同浓度的地塞米松（DXM）。Mat作用与HCFs后24h、48h和72h,其IC50分别为125.20 mg/L、80.90 mg/L和60.92mg/L。2.RT-PCR结果显示:各浓度Mat抑制HCFs表达Col 1,其作用呈时间剂量依赖性,但仅160mg/L Mat、48h时80mg/L Mat组与阴性对照组相比差异有统计学意义;160mg/L Mat与同浓度的DXM相比差异无显著意义。3.RT-PCR结果显示:各浓度Mat抑制HCFs表达Col 3,其作用呈时间剂量依赖性,40mg/L及以上浓度的Mat、各时间点Mat组与阴性对照组相比差异均有显著统计学意义;且160mg/L Mat抑制作用强于同浓度的DXM。结论1.Mat具有明显抑制HCFs增殖的作用,其抑制作用呈时间-剂量依赖性,且160mg/L Mat对HCFs增殖的抑制作用强于同浓度的DXM。2.高浓度Mat长时间作用能抑制HCFsⅠ型胶原mRNA表达,其抑制作用呈时间-剂量依赖性,且160mg/L DXM介于120mg/L、160mg/L的Mat。3.Mat抑制HCFsⅢ型胶原mRNA表达,其抑制作用呈时间-剂量依赖性,且160mg/L DXM介于80mg/L、120mg/L的Mat。4.Mat有可能成为减少或预防准分子激光角膜屈光手术术后haze的一种新型选择用药。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 实验材料
• 实验方法
• 实验结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附录
• 综述
• 成果附录
• 致谢