重组牛O型口蹄疫病毒疫苗的构建及其活性

论文摘要

牛O型口蹄疫病毒（Foot and mouth disease virus,FMDV）是一种主要流行于欧洲和亚洲的高度传染性的口蹄疫病毒,感染野生和家养的牛,羊,猪等偶蹄类动物引起口蹄疫疾病（Foot-and-mouth disease,FMD）。目前应用的牛O型FMDV疫苗主要是灭活疫苗和弱毒疫苗,由于这两种疫苗易引起动物的持续性感染及其在安全上的隐患,使其应用受到了限制。因此,我们应用生物信息学的方法确定了FMDV O/XJ/CHINA/2005（GenBank Accession 830046） VP1结构蛋白的B细胞表位及T细胞表位,应用基因工程的手段构建了3种重组牛O型口蹄疫病毒疫苗的编码基因,并在大肠杆菌中表达。检测了佳木斯株同型重组牛O型FMDV疫苗OJ3的生物学活性。Elisa实验结果表明:OJ3免疫的豚鼠和牛可以产生能够识别同型口蹄疫病毒的抗体;乳鼠保护实验表明:OJ3免疫豚鼠和牛可以产生高滴度的针对同型FMDV的中和抗体;攻毒实验的结果显示:接种OJ3的牛可获得抵抗野生型牛O型口蹄疫病毒攻击的能力。说明重组牛O型FMDV疫苗OJ3有可能成为抗牛O型口蹄疫病毒的有效疫苗。

论文目录

• 提要
• 引言
• 材料和方法
• 1 实验材料
• 2 引物的设计
• 3 主要实验方法
• 实验流程
• 实验结果
• 1 牛O 型口蹄疫病毒B 细胞表位的确定
• 2 重组牛O 型FMDV 疫苗结构的设计
• 3 用PCR 搭建的方法构建H 片段的编码基因
• 4 用克隆-亚克隆的方法构建重组牛O 型FMDV 疫苗的编码基因
• 5 牛O 型FMDV 疫苗的表达、鉴定和纯化
• 6 OJ3（牛O 型FMDV 疫苗）的活性研究
• 图片和表格
• 讨论
• 1 重组牛 O 型 FMDV 疫苗设计过程中应用软件预测 B 细胞表位
• 2 重组牛 O 型 FMDV 疫苗细微结构的设计
• 3 OJ3 活性研究的思考
• 结论
• 参考文献
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 致谢
• 攻读硕士期间发表的其它成果