论文摘要
目的 建立人巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)小鼠急性间质性肺炎模型,为HCMV感染性疾病的研究及抗HCMV药物的筛选提供实验基础。研究双黄连(Shuanghuangliang,SHL)粉针剂对人巨细胞病毒感染的小鼠肺组织病理和病毒DNA载量的影响。方法 本研究分为两个部分。第一部分是建立HCMV小鼠肺炎模型。将3~4周龄Balb/c小鼠随机分为3组,每组10只,雌雄各半。A组为HCMV AD169株感染组,腹腔注射106半数组织培养感染量(50%tissue culture infectie dose,TCID50) HCMV AD169株悬液0.5ml/只;B组为HF对照组,C组为DMEM对照组,分别腹腔注射人胚成纤维细胞(Human fetal fibroblast,HF)细胞悬液、改良Eagle培养液(Dulbecco modified Eagle medium,DMEM)各0.5ml/只。观测小鼠呼吸、体重变化,实验第20日,麻醉后颈椎脱臼处死小鼠,取外周血检测HCMV特异性抗体,取肺组织进行病毒分离培养、光镜和电镜病理学检查以及聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)检测。第二部分为双黄连药物治疗的研究。3~4周龄Balb/c小鼠随机分为正常对照组、感染模型组、更昔洛韦治疗组,大、中、小剂量双黄连粉针剂治疗组,每组10只。正常对照组腹腔注射DMEM0.5ml/只,其余组均腹腔注射6.0logTCID50·ml-1病毒0.5ml/只;双黄连大、中、小剂量为120 mg.kg-1d-1、60 mg.kg-1d-1、30 mg.kg-1d-1,更昔洛韦剂量为60 mg.kg-1d-1。接种5天后,感染模型组和正常对照组腹腔注射生理盐水,治疗组按上述剂量腹腔注射相应药物。用药10天后,处死动物取肺脏,用荧光定量聚合酶链式反应的方法检测小鼠肺组织HCMV DNA载量;HE染色法对肺脏组织作病理检查。结果 HCMV感染组小鼠较对照组呼吸频率增加,体重减轻(P<0.01)。实验检查指标符合间质性肺炎形态学及病毒学改变。双黄连大、中剂量治疗组肺组织中HCMV DNA载量平均值分别为1628.80 copies/100mg、
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