菱角壳水提物的提取及其抗衰老药理活性的研究

论文摘要

工作目的:通过实验优化菱角壳水提物的提取工艺,提高提取效率,并对其清除体内自由基,抗衰老药理活性进行探索研究,为菱角的进一步推广药用做好基础研究工作。研究方法及结果:以出膏率为指标,加入生物酶辅助提取,通过单因素实验分别确定果胶酶和纤维素酶单独酶解的最佳工艺条件,并进行双酶单因素实验,由此确定双酶酶解的最佳工艺条件,在此基础上分别讨论温度,时间,酶加量,酶配比对提取率的影响程度,根据L9（34）正交表最后确定最佳提取工艺为:酶解温度50?;酶解时间60min;加酶量（酶重/菱角壳干重）1.8%;酶配比（纤维素酶对果胶酶的重量比）2:1;在此条件下可获得菱角壳水提物的最佳提取率为0.175%,比传统方法提高了3倍。使用天然澄清剂法对菱角壳水提物进行脱蛋白,能使蛋白含量由12.43%降低到6.33%。使用D-半乳糖法建立昆明小鼠亚急性衰老模型,35天为建模周期,每日定时给药,结果显示:每日颈背部皮下注射D-半乳糖100mg/kg的中剂量组有最佳建模效率;在此模型基础上比较了传统提取方法和生物酶辅助提取方法,发现两种提取方法所得提取物活性相当,当对生物酶提取产品进行脱蛋白处理时,发现脱蛋白组的抗氧化药理活性显著降低（P<0.01）。在小鼠衰老模型基础上,检验小鼠血清以及肝脏中总超氧化物歧化酶（T-SOD）,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）,丙二醛（MDA）,以及肝脏中单胺氧化酶（MAO-B）,脂褐质水平。并以国际公认的清除自由基抗衰老效果良好的维生素E为阳性对照药物,设计菱角水提物低、中、高不同剂量组,考察其抗衰老药效。数据应用SPSS10.0统计软件处理。结果发现三个剂量组均具有清除体内自由基的效果;低中剂量组效果相当,均不如高剂量组。高剂量组血清和肝脏T-SOD和GSH-Px高于（P>0.05）,而其MDA则低于（P<0.05）阳性对照组,肝脏MAO-B与脂褐质高剂量组效果均优于阳性对照组,低中高组间效果无显著差异。实验结果提示菱角壳水提物可提高机体抗氧化能力,抑制脂质过氧化物的形成,具有一定的抗衰老药理活性。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 菱角的研究概况
• 1.1.1 菱角的药用发展史
• 1.1.2 菱角的药理活性以及药用处方举例
• 1.1.3 目前国内外对菱角的相关研究
• 1.2 正交实验法
• 1.2.1 中药提取常用的方法
• 1.2.2 正交实验法的介绍
• 1.2.3 正交实验法的应用
• 1.3 多糖的研究概况
• 1.3.1 药用多糖的研究进展
• 1.3.2 多糖在医药领域中的应用
• 1.4 衰老机制研究进展
• 1.4.1 衰老简介
• 1.4.2 衰老机理研究
• 1.4.3 抗衰老药物研究进展
• 1.5 立题依据
• 第二章 菱角壳水提物的提取
• 2.1 实验材料与仪器试剂
• 2.1.1 仪器
• 2.1.2 试剂
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 菱角原料的处理
• 2.2.2 菱角壳水提物的传统提取方法
• 2.2.3 菱角壳水提物的生物酶辅助提取工艺
• 2.2.4 菱角壳水提物浸膏的脱蛋白
• 2.3 测定方法
• 2.3.1 总糖的测定
• 2.3.2 还原糖的测定
• 2.3.3 多糖的含量计算
• 2.3.4 考马斯亮兰法测定蛋白质含量
• 2.3.5 酶活力的测定
• 2.4 实验结果与讨论
• 2.4.1 单酶酶解工艺参数的确定
• 2.4.2 双酶酶解工艺参数的确定
• 2.4.3 酶解工艺的综合分析
• 2.4.4 菱角壳水提物成分分析
• 第三章 菱角壳水提物抗衰老药理活性研究
• 3.1 实验材料与方法
• 3.1.1 实验动物
• 3.1.2 实验药物
• 3.1.3 主要实验仪器及试剂
• 3.1.4 动物给药、饲养、管理
• 3.1.5 样本采集与制备
• 3.1.6 主要检测方法及指标
• 3.1.7 数据的统计处理
• 3.2 实验结果
• 3.2.1 小鼠衰老模型的建立
• 3.2.2 不同提取方法所得菱角壳水提物抗衰老活性的比较
• 3.2.3 酶辅助提取水提物脱蛋白前后活性比较
• 3.2.4 不同剂量酶提菱角壳水提物对抗衰老活性的影响
• 3.2.5 总结
• 3.3 本研究的价值和意义
• 第四章 研究内容与总结展望
• 参考文献
• 发表论文和科研情况说明
• 致谢