五龙颗粒对脾气虚变应性鼻炎大鼠鼻粘膜肥大细胞信号转导的影响

论文摘要

目的：变应性鼻炎又称过敏性鼻炎，为耳鼻喉科常见、多发病。导师熊大经教授在其三十多年的临床实践基础上，提炼出治疗变应性鼻炎的基本处方——五龙颗粒，经临床验证，疗效确切。本课题选用大鼠变应性鼻炎模型进行动物实验，探讨该方对变应性鼻炎大鼠鼻粘膜肥大细胞信号转导的调节作用，并初步探讨了中医证型脾气虚对变应性鼻炎鼻粘膜肥大细胞信号转导的影响，及本方对脾气虚型变应性鼻炎大鼠的作用。 方法：将84只健康SD大鼠随机分为①空白组 ②脾气虚AR组 ③脾气虚AR五龙颗粒组④脾气虚AR息斯敏组 ⑤AR组 ⑥AR五龙颗粒组 ⑦AR息斯敏组。脾气虚模型依据李德新采用饮食不节加游泳疲劳过度综合因素伤脾的方法造模，AR模型按照安云芳报道的方法造模。各治疗组在腹腔注射全身致敏造模结束后开始给药，局部激发（同时予以药物治疗）期间除空白组外，脾气虚AR组、AR组每日以含5％卵白蛋白的生理盐水溶液半量激发，其余各治疗组每日给药1小时后再予以含5％卵白蛋白的生理盐水溶液局部激发。从局部激发第一天开始，观察动物一般情况变化，并在滴入卵白蛋白溶液30分钟内，着重观察鼻部症状、鼻分泌量。用药第七天时，实验动物分别在卵白蛋白激发后，观察30分钟，了解动物AR发作情况。之后立即处死动物。每组随机选取6只大鼠，剥离上颌骨后立即用标准比色板测鼻中隔粘膜pH值；并摘取鼻中隔组织，观察光镜和电镜下的病理形态变化，同时选用免疫组化法检测鼻中隔粘膜P物质（Substance P，SP）、雌激素受体阳性（Estradiol Receptor Positive Cell，ER+）细胞的表达。剩余6只大鼠在超净工作台上取出鼻粘膜，提取mRNA，并逆转录为cDNA，用RT-PCR法测定白细胞介素（Interleukin，IL）-2，3，10，12mRNA的表达。分别在全身免疫结束后及处死动物前，取血用酶联免疫吸附法检测血清组织胺的含量。 结果：五龙颗粒能明显缓解变应性鼻炎大鼠鼻痒、喷嚏、清涕等症状；升高大鼠由于变应性鼻炎降低的鼻分泌物pH值；下调大鼠由于变应性鼻炎升高的血清组织胺含量；减轻变应性鼻炎大鼠鼻中隔粘膜的炎性浸润程度和嗜酸性粒细胞含量；调整鼻粘膜肥大细胞数目及功能至正常状态；并通过下列途径调节鼻粘膜肥大细胞信号转导通路；降低鼻粘膜SP表达，减少鼻粘膜ER+细胞数目，增强鼻

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 缩略词表
• 引言
• 正文
• 1.材料
• 1.1.1 实验动物
• 1.1.2 试剂及药品
• 1.1.3 重要器械及其他材料
• 2.方法
• 2.1 造模及分组方法
• 2.2 给药方法
• 2.3 测试项目及方法
• 2.3.1 一般情况观察
• 2.3.2 鼻分泌物的pH值
• 2.3.3 血清组织胺含量
• 2.3.4 鼻中隔粘膜HE染色
• 2.3.5 鼻中隔粘膜甲苯胺兰染色
• 2.3.6 鼻中隔粘膜透射电镜
• 2.3.7 鼻中隔粘膜P物质表达
• 2.3.8 鼻中隔粘膜雌激素阳性细胞计数
• 2.3.9 鼻粘膜IL-2 mRNA表达
• 2.3.10 鼻粘膜IL—3 mRNA表达
• 2.3.11 鼻粘膜IL—10 mRNA表达
• 2.3.12 鼻粘膜IL—12 mRNA表达
• 2.4 数据处理
• 3.结果及分析
• 3.1 一般情况观察
• 3.2 给药后各组大鼠鼻分泌物pH值的测定
• 3.3 给药后各组大鼠血清组织胺含量
• 3.4 给药后各组大鼠鼻中隔粘膜HE染色情况
• 3.5 给药后各组大鼠鼻中隔粘膜肥大细胞及脱颗粒的情况
• 3.6 给药后各组大鼠鼻中隔粘膜透射电镜观察
• 3.7 给药后各组大鼠鼻中隔粘膜P物质表达情况
• 3.8 给药后各组大鼠鼻中隔粘膜雌激素受体阳性细胞计数情况
• 3.9 给药后各组大鼠鼻粘膜IL-2 mRNA表达情况
• 3.10 给药后各组大鼠鼻粘膜IL-3 mRNA表达情况
• 3.11 给药后各组大鼠鼻粘膜IL-10 mRNA表达情况
• 3.12 给药后各组大鼠鼻粘膜IL-12 mRNA表达情况
• 4.讨论
• 4.1 关于造模方法的选择
• 4.1.1 关于实验动物的选择
• 4.1.2 关于脾气虚模型的选择
• 4.1.3 关于实验性鼻超敏反应模型的选择
• 4.2 五龙颗粒的立法处方依据
• 4.2.1 祖国医学对变应性鼻炎的认识
• 4.2.2 五龙颗粒的立法处方依据
• 4.3 西医对变应性鼻炎的认识及对照药物的选择
• 4.3.1 变应性鼻炎的发病机制
• 4.3.2 MC在AR发病中的作用
• 4.3.2.1 MC的起源和分化
• 4.3.2.2 MC在AR发病中的作用
• 4.3.3 对照药物的选择
• 4.4 五龙颗粒对大鼠实验性变应性鼻炎鼻粘膜肥大细胞信号转导的影响
• 4.4.1 五龙颗粒对大鼠实验性变应性鼻炎的治疗作用
• 4.4.2 五龙颗粒对大鼠实验性变应性鼻炎鼻粘膜肥大细胞功能的影响
• 4.4.3 五龙颗粒对大鼠实验性变应性鼻炎鼻粘膜肥大细胞信号转导的影响
• 4.4.3.1 五龙颗粒对大鼠实验性变应性鼻炎鼻粘膜SP表达的影响
• +细胞数目的影响'>4.4.3.2 五龙颗粒对大鼠实验性变应性鼻炎鼻粘膜ER⁺细胞数目的影响
• 4.4.3.3 五龙颗粒对大鼠实验性变应性鼻炎鼻粘膜IL-2 mRNA表达的影响
• 4.4.3.4 五龙颗粒对大鼠实验性变应性鼻炎鼻粘膜IL-3 mRNA表达的影响
• 4.4.3.5 五龙颗粒对大鼠实验性变应性鼻炎鼻粘膜IL-10 mRNA表达的影响
• 4.4.3.6 五龙颗粒对大鼠实验性变应性鼻炎鼻粘膜IL-12 mRNA表达的影响
• 4.5 大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎模型鼻粘膜肥大细胞信号转导的改变
• 4.5.1 大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎的病理变化
• 4.5.2 大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎鼻粘膜肥大细胞功能的影响
• 4.5.3 大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎鼻粘膜肥大细胞信号转导的变化
• 4.5.3.1 大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎鼻粘膜SP的表达
• 4.5.3.2 大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎鼻粘膜ER+细胞数目的变化
• 4.5.3.3 大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎鼻粘膜IL-2 mRNA的表达
• 4.5.3.4 大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎鼻粘膜IL-3 mRNA的表达
• 4.5.3.5 大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎鼻粘膜IL-10 mRNA的表达
• 4.5.3.6 大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎鼻粘膜IL-12 mRNA的表达
• 4.6 五龙颗粒对大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎粘膜肥大细胞信号转导的影响
• 4.6.1 中医药的免疫调节方式
• 4.6.2 五龙颗粒对大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎的治疗作用
• 4.6.3 五龙颗粒对大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎鼻粘膜肥大细胞功能的影响
• 4.6.4 五龙颗粒对大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎鼻粘膜肥大细胞信号转导的影响
• 4.6.4.1 五龙颗粒对大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎鼻粘膜SP表达的影响
• +细胞数目的影响'>4.6.4.2 五龙颗粒对大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎鼻粘膜ER⁺细胞数目的影响
• 4.6.4.3 五龙颗粒对大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎鼻粘膜IL-2 mRNA表达的影响
• 4.6.4.4 五龙颗粒对大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎鼻粘膜IL-3 mRNA表达的影响
• 4.6.4.5 五龙颗粒对大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎鼻粘膜IL-10 mRNA表达的影响
• 4.6.4.6 五龙颗粒对大鼠实验性脾气虚变应性鼻炎鼻粘膜IL-12 mRNA表达的影响
• 5 结论
• 6 问题与展望
• 6.1 关于在造模中发现的问题
• 6.2 关于变应性鼻炎指标的选择
• 6.3 关于脾气虚指标的选择
• 致谢
• 参考文献
• 综述：中医药治疗变应性鼻炎的机理研究进展
• 附 图片
• 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果
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