传统朝药材关苍术抑菌活性成分的筛选及毒理学初步评价

论文摘要

目的：寻找并确定传统朝药材关苍术抗菌有效成分及有效成分组,并对关苍术药材进行毒理学初步评价,为合理利用传统朝药材关苍术资源,促进基于关苍术的安全、可靠和低毒抗菌制剂及其相关产品研发。方法：1通过能抑制变形链球菌（Streptococcus mutans,KCTC3065）的抗菌筛选体系,对不同萃取部位进行最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）的测定,确定关苍术抗菌有效部位群；采用GC-MS对关苍术抗菌有效部位各类成分进行考察；采用正相硅胶、羟丙基葡聚糖凝胶（Sephadex-LH20）.反相硅胶（octadecyl silica gel chromatography,ODS）高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）等各种现代层析分离技术,对其抑菌活性成分进行追踪分离,寻找并确定关苍术抗菌有效成分或有效成分组；2采用改良寇氏法测定关苍术粗粉及超微粉的半数致死量（Median lethal dose,LD50）;采用最大给药量法测定关苍术水煎剂的最大给药量（maximum tolerated dosage,MTD）,进行关苍术的毒理学初步评价。结果：1在本筛选体系下,关苍术超临界萃取部位呈现最好的抑菌活性,其MIC为25μg-mL-1;针对关苍术抑菌活性部位的活性追踪分离,得到最优抑菌有效成分化合物,并进一步通过波谱分析（1H-NMR、13C-NMR）,鉴定了该化合物的结构为邻苯二甲酸双十三酯,该化合物为该属植物中首次分离得到。2关苍术粗粉的小鼠急性经口LD5o为24.91 g/kg,95%可信限为22.47-27.61 g/kg;关苍术超微粉的小鼠急性经口LDso为28.53 g/kg,95%可信限为25.72-31.64 g/kg;小鼠对关苍术水煎剂的最大给药量为生药495g/kg（生药量）,相当于关苍术成人（体重以60kg计）日口服剂量以10-30 g计算,小鼠的最大耐受量是人用药剂量的约990-2970倍。结论：传统朝药材关苍术具有较好的抑菌活性,可作为天然植物抑菌剂研发材料；关苍术水煎剂为无毒药物。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 第二章 传统朝药材关苍术抑菌活性成分的筛选研究
• 2.1 实验材料
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 样品的制备
• 2.2.2 体外抑菌活性实验方法的建立
• 2.2.3 关苍术抑菌活性有效部位的筛选
• 2.2.4 关苍术有效部位成分组的化学成分分析研究
• 2.2.5 抑菌活性导向下的追踪分离
• 2.3 实验结果
• 2.4 讨论
• 第三章 传统朝药材关苍术毒理学初步评价
• 3.1 实验材料
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 样品的制备
• 3.2.2 关苍术超微粉粉体粒径检测
• 3.2.3 关苍术粗粉的经口急性毒性实验
• 3.2.4 关苍术超微粉的经口急性毒性实验
• 3.2.5 关苍术水煎剂的经口急性毒性实验
• 3.2.6 统计学处理
• 3.3 实验结果
• 3.4 讨论
• 第四章 结论
• 参考文献
• 附图
• 致谢
• 综述
• 参考文献