论文摘要
目的:研究小发夹RNA沉默COX-2对HSC-T6细胞增殖及相关基因表达的影响。方法:1、实验分为空白细胞组、HK质粒对照组、COX-2shRNA1组。2、将已构建的pYr-1.1-hU6-EGFP-COX-2shRNA1转染大鼠肝星状细胞HSC-T6细胞株,荧光显微镜观察其转染效率。3、MTT比色检测HSC-T6增殖。4、北京博奥生物有限公司的27K Rat Genome Array芯片扫描观察HK质粒对照组、COX-2shRNA1组基因差异表达。结果:1、COX-2shRNA1转染大鼠HSC后24h、48h、72h,荧光显微镜下细胞中的细胞质可见绿色的荧光,转染效率均可达70%以上。2、MTT实验测出的OD490光吸收值及绘制的生长曲线显示COX-2shRN1转染组3个时间段A值相互之间均有统计学意义(p<0.05),72h转染组与HK质粒对照组及空白组均有统计学意义(p<0.05)。3、在pYr-1.1-hU6-EGFP-COX-2shRNA1转染HSC-T6后的48h和72h所检测到的与增殖有关差异表达的基因有8个,分别是Trp53,Il6,Cxcl10, Atf3, Cdc27, Csf2, Dusp1,Serpinb2。结论:1、COX-2shRNA1可抑制HSC-T6细胞的增殖。2、COX-2shRNA1对HSC-T6细胞增殖抑制作用可能与增殖相关基因Trp53,Il6,Cxcl10, Atf3, Cdc27, Csf2, Dusp1,Serpinb2的调节有关。
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