3-氨基苯甲酰胺对早期糖尿病大鼠晶状体的作用

论文摘要

目的：本实验通过应用聚ADP核糖聚合酶（poly ADP-ribose polymerase, PARP）抑制剂3-氨基苯甲酰胺（3-aminobenzene,3-AB）对早期糖尿病（diabetes mellitus, DM）大鼠模型进行干预,观察3-AB对早期DM大鼠模型一般情况、晶状体透明性以及晶状体上皮细胞（lens epithelial cells, LECs）中核因子Kappa B（nuclear factor-kappa B, NF-κB）表达的影响,初步探讨PARP抑制剂3-AB对早期DM大鼠模型晶状体的保护作用,试图为预防和早期治疗糖尿病性白内障（diabetic cataract, DC）提供新的思路。方法：选择40只健康成年的雄性Wistar大鼠（体重180-220g）,进行裂隙灯检查排除晶状体病变。随机抽取9只作为正常对照组（N组）,其余的31只大鼠采用一次性腹腔注射1%链脲佐菌素（Stretozocin, STZ）的方法建立DM大鼠模型,N组大鼠一次性给予等体积的柠檬酸三钠-柠檬酸缓冲液（PH=4.5）腹腔注射。72小时后尾静脉测空腹血糖,以空腹血糖超过16.7mmol/L,尿量及饮水量明显增多者视为造模成功并列入实验。剔除死亡及未成模大鼠后,将其中18只用于本实验。按照实验时间点,将27只大鼠进一步分为正常对照组（N组）2w组（3只）、4w组（3只）和8w组（3只）；糖尿病组（DM组）2w组（3只）、4w组（3只）和DM 8w组（3只）；干预组（DM+P组）2w组（3只）、4w组（3只）和8w组（3只）。自建立模型后第三天起,DM+P组每日给予3-AB 30mg/kg灌胃,N组和DM组每天给予等体积0.9%N.S灌胃。每日观察大鼠一般情况（精神状态、毛发、垫料的湿润程度、饮水量等）,每周测血糖、体重一次,每周用裂隙灯显微镜观察大鼠晶状体变化一次。分别于给药后2w、4w、8w处死各组大鼠：比较各组大鼠血糖、体重、一般情况以及晶状体的变化；每组各取6只眼球石蜡包埋用于免疫组化SP法检测晶状体上皮细胞中NF-κB p65的表达情况；酶联免疫吸附（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）法测定各组大鼠血清中NF-κB p65浓度变化。对实验结果进行统计学分析。结果：（1）约87.1%的大鼠对STZ（50mg/kg）腹腔注射起反应（血糖>16.7mmol/L）。DM组和DM+P组大鼠血糖明显高于N组大鼠（P<0.01）,差异有统计学意义；DM组与DM+P大鼠体重明显低于N组大鼠（P<0.01）,差异有统计学意义。（2）N组大鼠晶状体在整个实验过程中保持透明,而DM组和DM+P组大鼠在STZ注射后第3w裂隙灯显微镜观察均发现有晶状体混浊；（3）免疫组化检测结果显示：DM 2w组、4w组及DM 8w组大鼠晶状体上皮细胞NF-κB p65表达较相应时间点的N组高（P<0.01,P<0.01,P<0.05）；DM+P2w组、4w组及8w组大鼠晶状体上皮细胞NF-κB p65表达较相应时间点的N组高（P<0.05,P<0.01,P<0.05）；DM+P 2w组、4w组及8w组与相应时间点DM组比较,晶状体上皮细胞NF-κB p65表达降低（P<0.01,P<0.01,P<0.05）,以上差异均有统计学意义。（5）ELISA法检测结果显示：DM 2w、4w、8w组大鼠和DM+P 2w、4w、8w组大鼠血清NF-κB浓度较相应时间点N组高（P<0.01）；DM+P 2w、4w、8w组大鼠血清NF-κB浓度与相应时间点的DM组大鼠比较,明显降低（P<0.01）,以上差异均有统计学意义。结论：（1）采用一次性腹腔注射50mg/kg STZ建立的DM大鼠模型,成活率较高,遵循DC的发生发展规律,可用于早期DC的相关研究。（2）NF-κB可能参与了早期DC的形成,在其发生发展中发挥着重要作用。（3）PARP抑制剂3-AB对早期DM大鼠晶状体具有一定保护作用,可以延缓DC的发生发展。其机制可能是通过降低晶状体上皮细胞中NF-κB的表达,减轻晶状体上皮细胞结构和功能的损害而实现的。

论文目录

• 1 3-氨基苯甲酰胺对早期糖尿病大鼠晶状体的作用
• 1.1 中文摘要
• 1.2 英文摘要
• 1.3 前言
• 1.4 材料与方法
• 1.5 结果
• 1.6 讨论
• 1.7 结论
• 1.8 参考文献
• 1.9 英汉缩略词对照表
• 2 致谢
• 3 综述
• 参考文献