论文摘要
姜黄素(curcumin)是一种酚类色素,它是中药姜黄的主要有效成分,具有多方面的药理作用,如抗炎、抗氧化和清除自由基、降血脂,特别是它的抗诱变和抗癌作用,正日益引起人们的重视,成为研究的热点。在发达国家前列腺癌是男性肿瘤病发率最高的恶性肿瘤之一,其死亡率在诸肿瘤中高居第二位。前列腺癌的发生,发展和转移与NKX3.1有密切联系。NKX3.1是新近被发现的一种具有高度前列腺特异性的同源盒基因,在前列腺癌起始过程NKX3.1基因的杂合性缺失显得尤为重要。人的NKX3.1定位于8p2 1,包括2个外显子,1个内含子。在成年人NKX3.1主要表达于前列腺上皮,受雄激素调节。雄激素的作用由AR介导。AR是核受体家族成员,是一种雄激素依赖性的转录因子。结合雄激素活化后,同靶基因调控区中特定的DNA序列即雄激素应答元件(androgen responsive element,ARE)结合,调控靶基因的表达。 为了观察姜黄素对雄激素受体AR和NKX3.1的影响,首先,在实验中用不同浓度(10,20,30,40μmol/L)的姜黄素处理前列腺癌细胞株LNCaP细胞24小时,用RT-PCR,Western-blotting检测姜黄素对AR和NKX3.1的mRNA水平和蛋白水平的影响,并通过凝胶电泳迁移分析(EMSA)检测不同浓度的姜黄素对AR表达的影响,同时观察姜黄素对雄激素受体AR和雄激素反应元件ARE特异性结合的影响。接着,将含有NKX3.1基因5’侧启动子区1040bp DNA序列的荧光素酶表达载体pGL3-NKX3.1转染前列腺癌细胞株LNCaP,不同浓度姜黄素作用24小时后应用荧光素酶测定系统检测荧光素酶表达活性,以鉴定姜黄素对NKX3.1启动子的影响;最后分别以30μmol/L姜黄素及10-6mol/L雄激素处理
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