生物小分子化学发光新体系及化学发光植物组织传感器的研究

论文摘要

化学发光分析因其灵敏度高,线性范围宽,分析速度快,重现性好,仪器设备简单,容易实现自动化等优点,越来越受到广大分析工作者的关注。已被成功地应用于药物分析、临床检验、环境监测等各个分析领域。本论文在简要介绍了化学发光的原理及化学发光生物传感器的发展基础上,提出并研究了三种新型的化学发光分析法,设计出一种高灵敏度、高选择性且具有稳定响应的流通式化学发光植物组织传感器,其主要内容如下: 1.　二胺类化合物化学发光植物组织传感器的研究　以豌豆苗组织作为生物敏感材料,将植物组织催化二胺的生物氧化反应与化学发光反应相偶合,制成了流通式化学发光植物组织传感器。并利用两种化学发光体系(Luminol-Co2+-H2O2、Luminol-K3Fe（CN）6-H2O2)评价了传感器的性能。该传感器具有灵敏度高、制作简单、选择性好、价格低廉等特点,在5×10-7-8×10-5mol/L范围内对二胺类物质有较好的响应,对5×10-7mol/L的尸胺标准溶液进行连续11次平行测定,相对标准偏差为2.01%,计算出检出限为3×10-8mol/L。将其应用于鱼肉中二胺的测定,取得了较满意的结果。　2.　流动注射化学发光抑制法测定精胺　精胺对Lumonol-Co2+-H2O2发光具有明显的抑制作用,据此建立了精胺的流动注射化学发光测定法。在最佳实验条件下,抑制率与精胺浓度在2×10-9-8×10-5mol/L 浓度范围内分段呈线性关系,对2×10-9mol/L的精胺标准溶液进行连续11 次平行测定,相对标准偏差为　0.61%,计算出检出限为8×10-10mol/L。将该方法应用于肺癌病人术后尿液中精胺含量的测定,回收率在96.65-110.0%,基本令人满意。

论文目录

• 摘要
• 第一章 绪论
• 1.1 化学发光历史回顾
• 1.2 化学发光原理及分类
• 1.2.1 化学发光反应过程
• 1.2.2 化学发光反应条件
• 1.2.3 化学发光反应类型
• 1.3 常用的化学发光体系
• 1.3.1 鲁米诺化学发光体系
• 1.3.2 光泽精化学发光体系
• 1.3.3 过氧化草酸酯化学发光体系
• 1.3.4 洛粉碱化学发光体系
• 1.3.5 其他化学发光体系
• 1.4 流动注射化学技术
• 1.5 化学发光生物传感器
• 1.5.1 化学发光酶传感器
• 1.5.2 化学发光免疫传感器
• 1.5.3 化学发光组织传感器
• 1.5.4 化学发光核酸传感器
• 第二章 二胺类化合物化学发光组织传感器的研究
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 实验原理
• 2.2.2 仪器与试剂
• 2.2.3 豌豆苗组织传感器的制作
• 2.2.4 实验方法
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 化学发光条件实验
• 2.3.1.1 Lminol浓度对发光强度的影响
• 2.3.1.2 催化剂浓度对发光强度的影响
• 2.3.1.3 Luminol溶液的介质及其酸度对发光强度的影响
• 2.3.1.4 流速影响
• 2.3.2 植物组织中酶催化条件的选择
• 2.3.2.1 PBS缓冲溶液浓度及酸度影响
• 2.3.2.2 酶促反应流速选择
• 2.3.2.3 温度的影响
• 2.3.2.4 离子强度对酶促反应的影响
• 2.3.3 植物传感器的稳定性
• 2.3.4 豌豆苗组织中酶的选择性
• 2.3.5 工作曲线、精密度和检出限
• 2O₂体系'>2.3.5.1 Luminol-Co（Ⅱ）-H₂O₂体系
• 3Fe（CN）₆-H₂O₂体系'>2.3.5.2 Luminol-K₃Fe（CN）₆-H₂O₂体系
• 2.3.5.3 两种化学发光体系的比较
• 2.3.6 干扰实验
• 2.3.7 样品测定
• 2.4 小结
• 第三章 流动注射化学发光抑制法测定精胺
• 3.1 引言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 仪器与试剂
• 3.2.2 实验方法
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 化学发光反应动力学曲线
• 3.3.2 条件实验
• 3.3.2.1 NaOH浓度对抑制率的影响
• 3.3.2.2 Luminol浓度对抑制率的影响
• 3.3.2.3 Co浓度对抑制率的影响
• 2O₂浓度对抑制率的影响'>3.3.2.4 H₂O₂浓度对抑制率的影响
• 3.3.2.5 流速对化学发光强度的影响
• 3.3.3 精胺抑制率曲线
• 3.3.4 工作曲线、精密度和检出限
• 3.3.5 干扰实验
• 3.3.6 样品加标回收率实验
• 3.4 小结
• 第四章 几种生物碱与羟基自由基的化学发光特性研究及应用
• 4.1 引言
• 4.2 实验部分
• 4.2.1 仪器与试剂
• 4.2.2 实验方法
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 鸟嘌呤的测定
• 2O₂-Co²⁺体系发光动力学曲线'>4.3.1.1 Guanine-H₂O₂-Co²⁺体系发光动力学曲线
• 4.3.1.2 条件实验
• 4.3.1.3 工作曲线、精密度和检出限
• 4.3.1.4 干扰实验
• 4.3.1.5 回收率实验
• 4.3.1.6 发光机理探讨
• 4.3.2 腺嘌呤和胸腺嘧啶的测定
• 4.3.2.1 条件实验
• 4.3.2.2 工作曲线、精密度和检出限
• 4.3.3 茶碱的测定
• 4.3.3.1 条件实验
• 4.3.3.2 工作曲线、精密度和检出限
• 4.3.3.4 样品分析及回收实验
• 4.4 小结
• 第五章 基于鸟嘌呤-过氧化氢-钴（Ⅱ）体系的研究抗坏血酸和谷胱甘肽的抗氧化性
• 5.1 引言
• 5.2 实验部分
• 5.2.1 仪器与试剂
• 5.2.2 实验方法
• 5.3 结果与讨论
• 5.3.1 条件实验
• 5.3.1.1 酸度影响
• 2O₂浓度的影响'>5.3.1.2 H₂O₂浓度的影响
• 2+浓度的影响'>5.3.1.3 Co²⁺浓度的影响
• 5.3.1.4 鸟嘌呤浓度的影响
• 5.3.2 抗氧化性能的测定
• 5.3.2.1 抗坏血酸抗氧化性能的测定
• 5.3.2.2 谷胱甘肽抗氧化性能的测定
• 5.3.2.3 GSH和VC清除·OH的比较
• 5.4 小结
• 第六章 结论
• Abstract
• 参考文献
• 致谢
• 学位论文独创性声明