论文摘要
【目的】:研究经神经生长因子（nerve growth factor,NGF）基因修饰的骨髓基质干细胞（Bone marrow stromal stem cells,BMSC）移植入大鼠阿尔兹海默病（Alzheimer’s disease,AD）模型后,从移植细胞存活、迁移和分化,移植区的组织病理变化和行为学等方面综合评价移植效果,为临床AD的基因治疗提供科学的理论和实践依据。[方法]:采用立体定位技术将Aβ淀粉蛋白（β-amyloid protein）注射入大鼠海马的方法制作AD模型。模型制作成功后8-10天,AD大鼠随机分为5组,每组7只动物:正常组（normal group）,正常大鼠,不移植注射任何物质;盐水注射组（NS group）,AD模型大鼠移植注射生理盐水;模型组（experimentgroup）,AD模型大鼠不经移植注射;BMSC移植组（AD+BMSC group）,将培养好的GFP转基因小鼠骨髓基质干细胞BMSC向AD模型大鼠双侧海马内注射;NGF-BMSC移植组（NGF-BMSC group）,将NGF修饰的骨髓基质干细胞向AD模型大鼠双侧海马内注射。移植2周后使用Morris水迷宫检测大鼠行为学变化,并通过免疫组化结合荧光显微镜的方法检测骨髓基质干细胞在大鼠海马内的存活、迁移和分化情况,用病理组织染色的方法检测移植后海马区组织病理变化情况,以综合评价移植效果。[结果]:移植的骨髓基质干细胞存活,迁移,表达NGF并分化为乙酰胆碱转移酶（choline acetyltransferase,ChAT）阳性的神经元。移植进入大鼠海马的NGF-MSC能迁移到其它地方,但是以沿着皮质和海马交界的锥体细胞层迁移最为明显。骨髓基质干细胞移植AD组大鼠学习、记忆的行为学与模型组相比明显改善（P＜0.05）;NGF修饰的骨髓基质干细胞移植后对大鼠学习、记忆的行为学改善更为明显（P＜0.01）。经BMSC和NGF-BMSC移植后,宿主海马CA1区域海马神经元细胞数与模型组比较出现明显回升,并接近正常组水平。[结论]:骨髓基质干细胞移植进入大鼠AD模型的海马后,不仅能在海马内存活,迁移和分化,而且能改善大鼠的学习和记忆能力和增加海马神经元的数目,而NGF修饰的骨髓基质干细胞移植效果更为明显。因而,BMSC可作为种子细胞有效地传送NGF以治疗大鼠AD。使用NGF基因修饰的骨髓基质干细胞移植治疗AD是一种有潜能和有效的治疗AD的方法。