盘鲍雌核发育多倍体诱导的研究

盘鲍雌核发育多倍体诱导的研究

论文摘要

鲍养殖业在渔业生产中具有重要的地位。但在鲍养殖过程中,由于长期的近亲繁殖,及其他不正确的繁育技术路线和不良环境的负选择,导致了鲍的种质严重退化。因此,要使鲍养殖业得到稳步发展,有必要进行鲍种质的纯合。研究如何改良和优化鲍种质,提高其经济价值,在科学和生产上都具有重要的意义。本文根据人工雌核发育原理及多倍体诱导原理开展盘鲍雌核发育多倍体诱导试验,并结合多倍体鲍在胚胎发育期间显微学观察以及养成期间生长率和存活率的统计与分析,探讨鲍雌核发育多倍体诱导方法的优点与不足。采用不同浓度的乙烯脲失活杂色鲍精子的遗传物质,确定其最佳处理浓度和处理时间。采用细胞松弛素B(以下简称CB)对用遗传物质失活的杂色鲍精子和盘鲍卵子授精的受精卵排放第一极体或第二极体时,进行不同持续时间处理诱导其多倍体。试验结果表明,在水温24.8℃下,作为失活杂色鲍精子遗传物质的乙烯脲浓度为0.5‰和处理时间为10min是比较适宜的;用遗传物质失活的杂色鲍精子与盘鲍卵子授精,在授精后10min,用浓度为1.0mg·dm-3的CB持续处理受精卵24min,其表观三倍体率达65%以上,表观四倍体率达5%左右;在稚鲍的倍性检查中,雌核发育多倍体占总多倍体数的80%,杂交多倍体占总数的20%。盘鲍异源雌核发育的三倍体率达到93%,四倍体率为3%左右。研究通过盘鲍多倍体与二倍体月平均壳长和体重对比试验发现,多倍体鲍具有明显的生长优势,结果表明:苗种经12个月人工养成后,试验组三倍体群体的平均壳长和体重分别达到5.59cm和16.49g,对照组仅平均壳长和体重仅为3.89cm和9.05g。试验对比相同温度和水交换量条件下多倍体鲍和二倍体鲍死亡率:相同控温条件下,盘鲍三倍体与盘鲍二倍体死亡率几乎没有差别;而在水交换量试验中盘鲍三倍体与二倍体相比两者死亡率相差15%左右,说明三倍体具有更高的抗逆性。纵观全年稚鲍的平均成活率,盘鲍三倍体试验组为72.38%,对照组为60.97%。使用1L的锥形瓶和24m3水泥池培育幼虫,用显微镜持续观察其胚胎发育情况,并记录雌核发育多倍体鲍受精卵分裂时期畸形个体的状态;对担轮幼虫时期畸形个体进行显微拍照。结果表明:雌核发育多倍体鲍受精卵在分裂过程中部分个体出现不均等分裂现象;而胚胎发育至担轮幼虫阶段,出现畸形形态幼虫。通常这些畸形的个体不能继续发育,有极少数个体即使可以发育到下一阶段,但也不会长时间存活。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 主符号表
  • 第1章 引言
  • 1.1 海洋经济贝类育种研究进展
  • 1.2 贝类多倍体育种研究概况
  • 1.3 贝类多倍体的制备方法及机理
  • 1.3.1 三倍体制备
  • 1.3.2 四倍体制备
  • 1.4 贝类多倍体诱导的影响因素
  • 1.4.1 适宜参数的确定
  • 1.4.2 精卵同步性
  • 1.5 贝类多倍体的倍性鉴定
  • 1.5.1 染色体分析法
  • 1.5.2 流式细胞术
  • 1.5.3 极体计数法
  • 1.6 细胞遗传学研究基础——染色体研究
  • 1.6.1 染色体核型分析
  • 1.6.2 染色体带型分析
  • 1.7 多倍体贝类的生长与存活
  • 1.7.1 多倍体贝类的生长
  • 1.7.2 多倍体贝类的存活能力
  • 1.8 本研究目的和意义
  • 第2章 人工诱导盘鲍异源雌核发育多倍体
  • 2.1 材料和方法
  • 2.1.1 材料
  • 2.1.2 方法
  • 2.2 结果
  • 2.2.1 乙烯脲处理的杂色鲍精子与正常盘鲍卵子授精的受精率及胚胎发育率
  • 2.2.2 染色体组加倍
  • 2.2.3 流式细胞仪检测稚鲍倍性
  • 2.3 讨论
  • 2.3.1 精子遗传物质失活的鉴别
  • 2.3.2 乙烯脲处理的杂色鲍精子的活力
  • 2.3.3 CB 诱导产生染色体组加倍的有效性
  • 2.3.4 异源雌核发育多倍体的鉴别
  • 第3章 多倍体盘鲍鲍养成期间生长与存活的研究
  • 3.1 材料和方法
  • 3.1.1 材料
  • 3.1.2 方法
  • 3.2 结果
  • 3.2.1 盘鲍三倍体与盘鲍二倍体养成期间生长情况
  • 3.2.2 盘鲍多倍体与盘鲍二倍体养成期间存活情况
  • 3.3 讨论
  • 3.3.1 三倍体生长优势
  • 3.3.2 三倍体存活优势
  • 第4章 雌核发育多倍体鲍胚胎发育过程观察
  • 4.1 材料和方法
  • 4.1.1 材料
  • 4.1.2 方法
  • 4.2 结果
  • 4.3 讨论
  • 第5章 小结与展望
  • 5.1 人工诱导盘鲍异源雌核发育多倍体
  • 5.2 多倍体盘鲍养成期间生长与存活的研究
  • 5.3 雌核发育多倍体鲍胚胎发育过程观察
  • 5.4 展望
  • 致谢
  • 参考文献
  • 在学期间发表的学术论文
  • 相关论文文献

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