论文摘要
20世纪80年代,砀山酥梨在国内及东南亚地区的销售市场广受消费者的青睐。这些年来由于在选育新品种、改进栽培技术、果实的采后处理和贮藏加工等方面还缺乏研究和经验,致使生产上出现了品种特性退化、果实品质下降等诸多不良现象。砀山酥梨的产业优化,成为亟待解决的问题之一,而解决的方法已经不是单单依靠整顿栽培技术所能解决的问题。除了砀山酥梨品种本身存在的一些品质缺陷以外,酥梨鲜果生产品种的单一性,缺乏早、中熟品系,上市时间过于集中等等,也是不可忽视的问题之一。所以选育出优良的新品种,并加以培育、推广,这其中的经济效益将十分巨大,对梨农收入的提高也将非常显著。本试验试图通过辐射诱变这一重要途径,对砀山酥梨的休眠枝条进行60Coγ辐照处理,以研究辐射对砀山酥梨的生长、生理辐射效应,并对砀山酥梨辐射诱变育种进行初步探索。1、试验利用60Coγ射线对砀山酥梨休眠枝条进行辐照处理并嫁接于砀山县园艺场梨园内基砧为杜梨的砀山酥梨上,在同一环境条件下统一管理,定期对其进行观察。结果表明,30 Gy、40 Gy、50 Gy处理的萌芽率分别为0.7257、0.5427、0.1940,新梢生长量分别为48.21、35.47、25.67。即随着辐射剂量的增加,萌芽率、新梢生长量随之降低。2、根据试验中对Taq酶浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、随机引物浓度优化的结果,建立了砀山酥梨基因组RAPD分析的最佳反应体系。25μL反应液中含:MgCl2 2.5 mmol/L,dNTP 0.3 mmol/L,引物10 mmol/L,10×PCR Buffer 2.5μL,Taq酶1.25 U,扩增反应程序:94℃预变性2 min ;94℃变性1 min,36℃退火l min,72℃延伸1 min,40次循环;72℃延伸10 min。3、经过多次试验,从42条引物中筛选出了10条适合砀山酥梨RAPD分析且表现稳定的引物,即:S51、S1461、S1465、S1467、S1469、S1474、S1490、S1508、S1513、S1518。4、利用8个引物的特异带构建了砀山酥梨的DNA指纹图谱。5、对辐照处理的样品进行基因组DNA变异检测,共扩增出71条带,特异性条带为22条。不同剂量的辐射均有不同程度的变异发生,10条引物中S1513扩增出的特异性条带最多为5条,S51和S1490扩增出的特异性条带最少均为一条。对32个基因组DNA样品进行扩增,15个样品有特异性条带产生,变异率为47%,其中样品40-6扩增出的特异性条带最多为11条,样品50-2扩增出的特异性条带最少为3条。30 Gy处理的5个材料中变异率最高的达到24%,平均值为20%,40 Gy处理的5个材料中变异率最高的达到27%,平均值为23%,50 Gy处理的5个材料中变异率最高的达到24%,平均值为19%。