亚慢性染铝致大鼠肾损伤的研究

论文摘要

为探讨铝暴露对大鼠肾脏结构和功能的影响,本试验以60只5周龄Wistar大鼠为实验对象,雌雄各半,预饲1周后,随机分成4组,通过饮水方式对大鼠进行三氯化铝（AlCl3）染毒,分别于蒸馏水中加入0,64.18,128.36,256.72 mg/kg B.W浓度AlCl3溶液,按加入铝制剂的剂量由低到高依次定为对照组（C组）、低剂量组（L组）、中剂量组（M组）和高剂量组（H组）,实验期为120 d。采用苏木素伊红（HE）、马松（Masson）染色和透射电镜技术观察肾脏病理组织学和超微结构变化;采用采用石墨炉原子吸收法、比色法、酶联免疫、乳胶颗粒增强免疫比浊法、离子分析和脲酶法等方法检测了血清中尿素氮（BUN）、尿酸（UA）、肌酐（Cr）、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CysC）、钠离子的含量,尿液中N-已酰-β-D-氨基酸葡萄糖酐酶（NAG）、Cr、β2微量蛋白（β2-MG）、总蛋白（TP）、钠离子的含量,血清、肾脏、尿液中铝的含量,并计算排钠分数（FENA+）和24h-内生肌酐清除率;采用免疫组织化学法半定量分析肾脏粘附分子-1（ICAM-1）表达情况。实验结果表明:1 HE、Masson染色观察可见,染铝组大鼠肾小管腔变窄,管腔结构消失,上皮细胞融合,核消失;肾小囊消失,肾小球萎缩;肾间质中有大量胶原沉积,高剂量组纤维化明显;超微结构观察可见,染铝组线粒体脊部分融合、质膜内褶轻微肿胀、微绒毛肿胀、融合,结构不清,表明铝暴露可致大鼠肾脏结构受损。2染铝120 d时,大鼠血清中早期肾脏功能损伤指标CysC含量、尿中TP和β2-MG含量、NAG活力升高,24 h-肌酐清除率降低,与对照组比较差异极显著（P<0.01）,而对中、晚期指标BUN、UA影响不显著,说明染铝可致大鼠早期性肾功能损伤。3染铝组大鼠肾小管ICAM-1表达含量高于C组,差异极显著（P<0.01）,说明铝暴露可导致肾小管损伤。4亚慢性铝组大鼠血清、尿液和肾脏中Al含量高于C组,Na+排泄分数高于C组,组间差异极显著（P<0.01）,说明染铝可致铝在大鼠肾脏中蓄积,并促进尿液中铝和Na+的排泄。

论文目录

• 摘要
• 英文摘要
• 1. 引言
• 1.1 铝的吸收与代谢
• 1.1.1 铝的吸收
• 1.1.2 铝在肾脏中的代谢
• 1.2 铝对肾脏结构影响
• 1.3 铝对肾脏功能的影响
• 1.3.1 铝对尿素氮（BUN）的影响
• 1.3.2 铝对尿酸（UA）的影响
• 1.3.3 铝对24h-内生肌酐清除率
• 1.3.4 铝对半胱氨酸蛋白酶抑制剂C 的影响
• 1.3.5 铝对尿总蛋白（TP）的影响
• 1.3.6 铝对肾小管损伤的影响
• Na+^%的影响'>1.3.7 铝对排钠分数FE_Na+^%的影响
• 1.4 细胞间粘附分子-1（ICAM-1）与肾脏疾病的关系
• 1.5 研究目的和意义
• 2. 材料与方法
• 2.1 主要仪器和试剂
• 2.1.1 主要仪器
• 2.1.2 主要试剂
• 2.2 大鼠分组与处理
• 2.3 样品的采集与处理
• 2.4 检测项目与方法
• 2.4.1 大鼠临床症状观察
• 2.4.2 大鼠的肾脏脏器系数检测
• 2.4.3 肾显微结构和显微结构检查
• +含量'>2.4.4 血清中Cr、BUN、UA、CysC 和Na⁺含量
• +、TP 含量和NAG 活力的测定'>2.4.5 尿液中Cr、β2-MG、Na⁺、TP 含量和NAG 活力的测定
• 2.4.6 24 h 内生肌酐清除率的测定
• Na⁺（%）的测定'>2.4.7 FE_Na⁺（%）的测定
• 2.4.8 铝含量检测
• 2.4.9 ICAM-1 表达的检测
• 2.5 试验数据的分析及统计
• 3. 实验结果
• 3.1 大鼠临床症状及体重检测结果
• 3.2 大鼠肾脏系数结果
• 3.3 肾脏病理组织学结果
• 3.3.1 肾组织病理剖检观察
• 3.3.2 肾脏HE 染色结果
• 3.3.3 Masson 染色结果
• 3.3.4 肾脏超微结构观察
• 3.4 大鼠血清中BUN、UA、CysC 含量
• 3.5 大鼠尿液中TP、β2-MG、NAG 含量
• Na⁺（%）的结果'>3.6 大鼠24 h-内生肌酐清除率和FE_Na⁺（%）的结果
• 3.7 大鼠血清、尿液和肾脏中铝含量
• 3.8 肾脏ICAM-1 表达水平
• 4. 讨论
• 4.1 亚慢性染铝对大鼠体重的影响与大鼠模型的建立
• 4.2 亚慢性染铝对大鼠肾脏结构的影响
• 4.2.1 亚慢性染铝对大鼠肾脏脏器系数的影响
• 4.2.2 亚慢性染铝大鼠肾脏H.E 染色结构观察与超微结构观察结果
• 4.2.3 亚慢性染铝对大鼠肾脏纤维化的影响
• 4.3 亚慢性染铝对大鼠肾脏功能的影响
• 4.3.1 亚慢性染铝对BUN、UA、Cr 的影响
• 4.3.2 亚慢性染铝对CycC、TP、β2-MG 含量与NAG 活力的影响
• 4.4 亚慢性染铝对大鼠血清、尿液、肾脏中铝含量的影响
• 4.5 亚慢性染铝对大鼠肾脏ICAM-1 表达的影响
• 5. 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附录：实验结果附图
• 攻读博士学位期间发表的论文