委陵菜黄酮降血糖作用及其机制研究

论文摘要

目的：通过糖尿病动物模型，筛选委陵菜抗糖尿病的有效部位及主要有效成分，并进一步探讨降血糖有效成分委陵菜黄酮降血糖作用的量效关系和时效关系。观察委陵菜黄酮对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠以及链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型的降血糖作用，并从糖代谢、脂代谢、抗氧化等方面对其抗糖尿病机制进行初步分析。方法：1．采用65mg/kg四氧嘧啶尾静脉注射建立四氧嘧啶糖尿病小鼠模型，挑选建模合格的小鼠，按血糖值和体重均匀分成10组。分别给予委陵菜不同极性部位溶液。各组动物每日灌胃1次，连续灌胃15天。眼静脉丛取血，以GOD法测血糖值，筛选降血糖有效部位。2．委陵菜降血糖有效部位F部位，经色谱方法和制备型高效液相色谱分离得到黄酮类成分即委陵菜黄酮，以四氧嘧啶糖尿病小鼠模型，观察其降血糖效果，筛选降血糖有效成分。3．按70mg／kg剂量四氧嘧啶尾静脉注射复制糖尿病小鼠模型，以正常小鼠及四氧嘧啶糖尿病小鼠为模型，将糖尿病小鼠按血糖值均匀分成7组，委陵菜黄酮按照不同剂量连续灌胃15天，采血测量空腹血糖，甘油三酯和总胆固醇水平。取胰腺做病理切片，供光镜观察各组小鼠胰腺病理学的改变。4．采用高糖高脂饲料喂养8周，联合小剂量链脲佐菌素（STZ 30mg／kg）静脉注射的方法诱发实验性2型糖尿病大鼠模型，应用委陵菜黄酮连续灌胃10周，观察药物对实验性糖尿病大鼠糖代谢、脂代谢、糖耐量、胰腺病理形态学改变、SOD、MDA水平等的影响。5．采用链脲佐菌素（STZ 60mg／kg）静脉注射的方法诱发实验性1型糖尿病大鼠模型，应用委陵菜黄酮连续灌胃4周，观察药物对实验性糖尿病大鼠糖代谢、脂代谢、抗氧化能力及胰腺病理形态学改变等的影响。结果：1．实验结果表明，委陵菜F部位降低四氧嘧啶小鼠模型血糖的作用最强，与阳性对照组在给药后无显著性差异（P＞0．05），血糖降低率分别为32．97%和33．30%，说明委陵菜F部位具有较强的抗糖尿病作用。为委陵菜抗糖尿病的有效部位。2．委陵菜F部位经色谱分离后所得成分—委陵菜黄酮，药理实验表明高剂量组（0．4mg/kg）血糖降低率为52．19%，盐酸苯乙双胍阳性对照组血糖降低率为29．26%，说明该黄酮类化合物具有明显的降低四氧嘧啶小鼠模型血糖的作用，药效强于阳性对照药组，说明委陵菜黄酮为委陵菜降血糖的有效成分。3．委陵菜黄酮对糖尿病小鼠具有显著的降血糖以及降低甘油三酯和总胆固醇水平的作用。说明委陵菜黄酮可降低血糖，同时也可改善血糖升高引起的脂质代谢异常，但对正常小鼠的血糖、血脂没有影响，顺反异构并不影响药效的因素。此外，病理学检查结果显示，委陵菜黄酮可明显对抗病因性糖尿病模型小鼠胰岛细胞萎缩，减轻胰岛细胞病理损伤，提示委陵菜黄酮对糖尿病模型的胰岛损伤有保护作用。4．委陵菜黄酮对高糖高脂饲料结合小剂量链脲佐菌素所致糖尿病大鼠的血糖升高有明显降低作用，具有明显的降低糖尿病小鼠TC、TG水平，升高HDL-C水平的作用。委陵菜黄酮组能抑制OGTT后0min、30min、60min、120min和180min血糖的升高（P＜0．05），改善葡萄糖致糖尿病大鼠的糖耐量减退。说明委陵菜黄酮可降低血糖，同时也可显著改善血糖升高引起的脂质代谢异常。在抗氧化指标的检测中，与糖尿病模型组相比较，委陵菜黄酮各剂量组，SOD水平明显升高，MDA水平明显降低（P＜0．05，P＜0．01）。说明委陵菜黄酮低剂量组能有效提高糖尿病大鼠的抗氧化能力。此外，病理学检查结果显示，委陵菜黄酮对糖尿病模型的胰岛损伤有保护作用。5．委陵菜黄酮可以显著降低STZ诱导的1型糖尿病大鼠空腹血糖，促进肝糖原的合成，从而改善糖代谢。通过纠正糖尿病大鼠血清TC、LDL-C、FFA水平异常，升高HDL-C含量，纠正机体脂代谢紊乱。通过提高糖尿病大鼠血清SOD活力，降低NO含量，从而增强糖尿病大鼠的抗氧化能力。结论：委陵菜降血糖具有显著的降血糖作用，改善糖尿病并发的脂代谢紊乱和抗氧化，保护胰岛β细胞的作用，从而治疗糖尿病及并发症。以上结果提示委陵菜黄酮将有望成为治疗糖尿病及其并发症的一种有前途的天然药物。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 符号说明
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 技术路线图
• 一、委陵菜抗糖尿病有效部位和有效成分的药效学筛选
• 1.1 实验材料
• 1.2 委陵菜降血糖有效部位的筛选
• 1.3 委陵菜降血糖有效成分的初步筛选
• 1.4 委陵菜黄酮化合物的毒性考察
• 1.5 委陵菜降血糖有效成分量效关系考察
• 1.6 讨论
• 1.7 小结
• 二、委陵菜黄酮对高糖高脂饲料结合STZ诱导糖尿病大鼠的降血糖作用及其机制的研究
• 2.1 实验材料
• 2.2 实验方法
• 2.3 实验结果
• 2.4 讨论
• 2.5 小结
• 三、委陵菜黄酮对STZ诱导1型糖尿病大鼠的降血糖作用及其机制的研究
• 3.1 实验材料
• 3.2 实验方法
• 3.3 实验结果
• 3.4 讨论
• 3.5 小结
• 3.6下一步的工作
• 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 附录
• 综述
• 黄酮类化合物治疗糖尿病及其并发症的研究进展
• 综述参考文献
• 致谢