修饰链霉亲和素的核壳型磁性纳米粒子在RNA分离中的研究

论文摘要

氧化铁磁性纳米粒子可以通过多种方法制备得到,通过表面化学修饰可以得到无机SiO2包覆的核壳结构的复合磁性纳米粒子。其壳结构既具有生物适应性,又具有可键合生物分子（如细胞、蛋白质、酶和抗体等）的活性基团,其核具有超强顺磁性。本文通过对氧化铁磁性纳米粒子的制备,修饰和分离的研究,使磁性纳米粒子分离器有了更好的应用。（1）首先采用工沉淀的方法,在碱性条件下共沉淀Fe2+和Fe3+离子混合物,通过调节pH值和介质粒子强度防止粒子沉聚,并将粒子尺寸控制在一个标准内。（2）采用反相微乳液的方法,利用正硅酸乙酯在碱性条件下水解,在γ-Fe2O3的表面包裹一层SiO2。实验结果表明在磁核γ-Fe2O3的表面成功地包裹了SiO2层,形成了核壳型磁性纳米粒子;而且在合适的条件下,合成的核壳型磁性纳米粒子具有均匀的粒径和良好的单分散性。（3）再在包覆SiO2的颗粒上修饰[N-（2-氨基乙基）-3-氨基丙基三甲氧基硅烷] （AEAPS）,再通过链霉亲和素将生物素标记的Oligo（dT）修饰在纳米颗粒的表面,构建了一种具超顺磁性的RNA纳米分离器,此探针可特异性地结合目标RNA,从而可实现其对互补的RNA片段的高效快速分离和富集。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一章 文献综述
• 1.1 研究意义
• 1.2 研究进展
• 1.2.1 磁性纳米粒子的合成
• 1.2.2 核壳型磁性纳米粒子的合成及分类
• 1.2.3 核壳型磁性纳米粒子在分离中的应用
• 1.2.4 核壳型磁性纳米粒子在分析检测中的应用
• 1.2.5 核壳型磁性纳米粒子在生物医学中的应用
• 1.3 实验方法和表征手段
• 1.3.1 反相微乳液法
• 1.3.2 穆斯堡尔谱
• 1.3.3 表面增强拉曼光谱（SERS）
• 1.3.4 凝胶电泳法
• 1.3.5 聚合酶链式反应（PCR）
• 1.3.6 原子力显微镜（AFM）
• 1.3.7 电子显微镜
• 1.4 其他
• 1.5 本论文的研究目的及内容
• 第二章 磁性纳米粒子的合成及其性能
• 2.1 实验部分
• 2.1.1 原料与设备
• 2.1.2 实验原理
• 2O₃粒子的制备'>2.1.3 γ-Fe₂O₃粒子的制备
• 2.2 试验结果与讨论
• 2.2.1 X-射线衍射结果
• 2.2.2 透射电镜结果
• 2O₃纳米粒子的磁性能分析'>2.2.3 γ-Fe₂O₃纳米粒子的磁性能分析
• 2.3 结论
• 20₃/Si0₂复合纳米粒子的制备和性能'>第三章 磁性γ-Fe₂0₃/Si0₂复合纳米粒子的制备和性能
• 3.1 实验部分
• 3.1.1 仪器
• 3.1.2 药品
• 3.1.3 实验原理
• 3.2 结果与讨论
• 20₃/Si0₂复合粒子性能的影响'>3.2.1 反应条件对磁性纳米γ-Fe₂0₃/Si0₂复合粒子性能的影响
• 20₃/Si0₂复合粒子的性能表征'>3.2.2 磁性纳米γ-Fe₂0₃/Si0₂复合粒子的性能表征
• 3.3 结论
• 第四章 修饰链霉亲和素的核壳型磁性纳米粒子在RNA 分离中的研究
• 4.1 试验部分
• 4.1.1 试剂与仪器
• 2的超顺磁性纳米粒子的制备'>4.1.2 包裹SiO₂的超顺磁性纳米粒子的制备
• 4.1.3 用[N-（2-氨基乙基）-3-氨基丙基三甲氧基硅烷] （AEAPS）磁性纳米粒子表面
• 2的磁性纳米粒子上连接链酶亲和素'>4.1.4 在表面包覆SiO₂的磁性纳米粒子上连接链酶亲和素
• 4.1.5 超顺磁 RNA 纳米粒子对目标RNA 的分离
• 4.1.6 分离产物RT-PCR 扩增及电泳表征
• 4.2 结果和讨论
• 4.2.1 核壳结构的磁纳米颗粒的表征
• 4.2.2 修饰链霉亲和素的复合体的表征
• 4.2.3 超顺磁性RNA纳米分离器对目标RNA的分离富集
• 4.3 总结
• 参考文献
• 致谢