论文摘要
幽门螺杆菌(H. pylori)是一类定植于人胃粘膜的革兰阴性﹑微需氧螺杆菌,其持续定植于胃粘膜可导致慢性萎缩性胃炎,也是消化性溃疡,胃腺癌,胃粘膜淋巴组织相关性淋巴瘤的主要致病因素。H. pylori的致病性与其分泌的多种毒力因子有关,其中空泡毒素(VacA)倍受关注。VacA是H. pylori分泌的一种蛋白毒素,可作为单一毒力因子引起细胞空泡化,细胞凋亡,细胞骨架重排降解甚至细胞死亡,是H. pylori重要的毒力因子。我国拥有丰富的中医药资源,中药具有毒副作用小,耐药性低,治疗费用少的优势。因此,中药治疗已成为未来研制治疗H. pylori药物的手段之一,但其具体作用机制以及对H. pylori致病性影响方面的研究几乎还处于空白。基于上述理由,课题组提出如下工作假说,黄莲、黄芩等中药提取液除了抑制细菌的生物合成,抑制细菌的繁殖作用之外,可能会对H. pylori毒力因子VacA具有干预作用(抑制VacA基因分泌VacA),H. pylori毒力因子VacA被干预后,菌体仍然存活,从而使致病性的H. pylori转变为非致病性。这为研究抗幽门螺杆菌感染的中药的独特的药理作用开辟了一条新途径。目的:观察中药在体外能否有效地抑制H. pylori空泡毒素的分泌,从而探索其作用机制。方法: 1.用光镜及四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定中药提取液对实验用HeLa细胞的无毒浓度.2.用平皿稀释法测定中药最低抑菌浓度,取略低于最低抑菌浓度为最后的实验浓度。3.中药乙醇提取液对于H.pylori空泡毒素分泌影响的研究:用中性红摄入法和光镜直接计数法观察产生空泡细胞产生率.4.统计方法:使用SPSS11.5专业统计软件进行数据分析。实验数据以平均数±标准差(±s)表示,各试验组与对照组间差异性采用t检验,P<0.05认为有显著差异。结果: 1.体外筛选出的有效药物:黄连、黄芩、厚朴、槟榔、山楂、白芍、元胡作用后的H.pylori液体培养上清中的空泡毒素量都明显的下降,致HeLa细胞的空泡化程度明显降低。结论: 1.黄连、黄芩、厚朴、槟榔、山楂、白芍、元胡在体外能有效抑制H.pylori空泡毒素的分泌。
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