论文摘要
目的:研究加减补阳还五汤改善大鼠脊髓缺血再灌注损伤疗效,并探讨其作用机制。方法:SD大鼠54只,雌雄参半,随机分成3组:甲组(空白组)18只,乙组(中药治疗组)18只、丙组(对照组)18只。甲组于实验前3天起予丁安卡那生理盐水溶液灌服,2次/天,直至取髓;乙组于实验前3天起子中药制剂补阳还五汤灌服,2次/天,直至取髓。丙组于缺血再灌注起的30分钟内注射甲基强地松龙。甲、乙、丙组分别采用腹主动脉阻断法造成脊髓缺血,用溶度为3%的戊巴比妥钠,按35mg/kg的剂量腹腔注射麻醉后,分离出左肾动脉,在左肾动脉入口下方约0.5cm处以动脉夹完全钳夹腹主动脉,确认钳夹点以下动脉完全消失后,钳夹30分钟。30分钟后松开夹子恢复血流灌注,检查血管无明显损伤后关腹,术毕,注射庆大霉素1万IU以预防感染,以温度计测肛温,保持动物体温在38.5±0.5℃。然后分别于再灌注后以下时间点(1、2、4、8、12、24H)按设计进行:1.处死大鼠取脊髓,运用高效液相色谱法(HPLC法)做兴奋性氨基酸的含量检测;2.免疫组化法检测大鼠脊髓中凋亡基因(BaX)的表达情况;3.观察大鼠后肢神经功能变化,并记录神经功能评分(NUROLOGIC DEFICITSCORE,NDS)。结果:兴奋性氨基酸检测结果显示,乙组(中药治疗组)、丙组(对照组)兴奋性氨基酸生成量明显低于甲组(空白组)(p＜0.01),丙组低于乙组。免疫组化图片显示阳性细胞数乙组(中药治疗组)、丙组(对照组)明显低于甲组(空白组),即凋亡基因(Bax)的表达情况为乙、丙组的表达量明显低于甲组(p＜0.05)。神经功能评分(NDS)结果显示,乙组(中药治疗组)、丙组(对照组)神经功能评分明显高于甲组(空白组)(p＜0.05),三组中丙组评分最高。同时,结果显示大鼠脊髓损伤,于耳灌注后4、8H达到峰值,中药治疗组疗效理想。结论:加减补阳还五汤在防治脊髓缺血再灌注损伤方面有较可靠的疗效,方中诸药能有效降低再灌注损伤后兴奋性氨基酸的生成,降低兴奋性神经毒性,减少神经元受损;减少凋亡基因的表达,降低细胞凋亡率,从而使神经功能受到保护。
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