小麦—簇毛麦染色体代换系、易位系SSR、AFLP和双向电泳的比较

论文摘要

本研究以栽培小麦京411、普通小麦近缘种、小麦—簇毛麦染色体代换系、易位系、簇毛麦、硬粒小麦为材料,采用SSR、AFLP和蛋白质双向电泳技术对这些材料进行分析。主要研究结果如下: 1、微卫星分析（SSR） 对小麦—簇毛麦染色体代换系、易位系、簇毛麦、硬粒小麦、栽培小麦以及普通小麦近缘种进行SSR分析。从扩增的图谱来看,小麦—簇毛麦染色体代换系、易位系、栽培小麦的谱型基本相同,例如,在引物Xgwn52、Xgwn119、Xgwn 114、Xgwn 232、Xgwn264、Xgwn642中,带型基本相似,只有很小的差异。在其它引物中,带型有比较大的差异,但它们之间的相同的带型在70-80%之间。簇毛麦谱型与普通小麦京411、小麦—簇毛麦染色体代换系、易位系差异较大。这结果可能与小麦基因组的不同有关。 2、建立AFLP最佳反应体系。 对模板、MgCl2、引物等主要影响因素进行浓度梯度,确立AFLP预扩、选扩的最佳反应体系。 3、蛋白质双向电泳分析（2—D） 利用蛋白质双向电泳技术,在簇毛麦,小麦—簇毛麦染色体代换系、易位系中发现一特异蛋白质,其分子量为16.3KD,等电点为5.9,而在栽培小麦京411中没有发现此特异蛋白。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 1.1 簇毛麦的优良特征
• 1.2 小麦遗传育种研究中常用的分子标记技术和双向电泳技术
• 1.3 本工作的研究意义
• 第二章 材料和方法
• 2.1 试验材料
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 小麦总体DNA的击提取
• 2.2.2 微卫星引物分析
• 2.2.3 扩增片段长度多态性引物分析
• 2.2.4 双向电泳分析
• 第三章 结果与分析
• 3.1 试验结果
• 3.1.1 小麦总体DNA的提取
• 3.1.1.1 小麦总体DNA纯度及完整性
• 3.1.1.2 DNA OD值的测定
• 3.1.2 微卫星分析
• 3.1.3 扩增片段长度多态性引物分析
• 3.1.4 双向电泳分析
• 3.2 讨论
• 3.2.1 酚仿抽提提取DNA的实用性及其注意事项
• 3.2.2 在AFLP试验中应该注意的问题
• 3.2.3 提高PCR产物的几种有效方法
• 3.2.4 DNA银染常出现的问题及解决方法
• 第四章 结论
• 第五章 参考文献