论文摘要
各种实验中所使用的卵母细胞多数来自屠宰场宰杀后的动物。死后动物机体会发生一系列生理生化变化,这些变化对卵母细胞质量的影响有待研究。本实验研究了处死小鼠后短时间滞留对卵巢卵母细胞、排卵后卵母细胞和着床前胚胎的影响,为更好地利用卵母细胞和胚胎,以及为合理地进行组织保存提供科学依据。实验结果如下:1.随滞留时间延长排卵后卵母细胞死亡率和自发激活率升高,同样滞留时间,随卵龄增加排卵后卵母细胞死亡率和自发激活率升高。2.输卵管在M2中放置、腹腔全开口体内滞留以及腹腔半开口体内滞留三组相比,只有半开口体内滞留长达15min时死亡率（27.8%）较高,其余处理死亡率较低且差异均不显著;自发激活率三组依次升高,其中输卵管在M2中放置不引起卵母细胞死亡和自发激活。3.不同品系小鼠卵母细胞对输卵管在体内滞留产生的反应不同,滞留10min C57BL/6系小鼠卵母细胞死亡率为56.5%,显著高于昆明鼠（47.6%）;自发激活率分别为13.3%和46.0%,C57BL/6系小鼠显著低于昆明鼠。4.hCG后24h体内滞留5min卵母细胞在CZB中培养自发激活率为81.1%,显著低于SrCl2孤雌激活率（96.4%）;自发激活的卵母细胞有较高的卵裂率（93.2%）和4-cell比率（87.3%）,但囊胚率（18.7%）较低,同卵龄的卵母细胞经SrCl2孤雌激活囊胚发育率为22.9%,差异不显著。HCG后18h卵母细胞经SrCl2孤雌激活卵母细胞囊胚发育率为64.6%,显著高于24h卵龄卵母细胞自发激活和诱导孤雌激活囊胚发育率。5.滞留20min不引起原核胚、2-cell胚胎和桑椹胚以及囊胚的死亡。滞留10min获取的原核胚体外培养囊胚率为81.2%显著低于对照组（93.2%）,随滞留时间延长,滞留20min囊胚率为67.5%,显著下降。6.滞留30min从卵巢获取的卵丘卵母细胞复合体体外成熟率为97.2%,与对照组（98.5%）差异不显著,孤雌激活后囊胚发育率分别为15.7%和16.7%,差异也不显著。结论:1.短时间滞留不会导致卵巢卵母细胞功能退化,但却能严重影响排卵后卵母细胞,导致其死亡和自发激活,且随着排卵后卵母细胞在体内的老化这种影响更明显。2.短时间滞留不会引起着床前胚胎死亡,但却使原核胚发育到囊胚能力显著下降。3.输卵管在死后小鼠体内滞留,对不同品系小鼠卵母细胞影响存在差异。4.腹腔开口会降低滞留对排卵后卵母细胞的影响。5.hCG后24h的卵母细胞虽然经短时间滞留自发激活后能发育到囊胚,但卵母细胞老化导致其囊胚率较低。