运动对大鼠骨骼肌FOS和HSP70表达的影响研究

论文摘要

目的:通过实验观察一次急性运动和长期耐力运动前、中、后不同时期大鼠骨骼肌FOS蛋白和HSP70表达情况,找出急性和慢性运动两种运动情况下FOS蛋白和HSP70表达规律从而推断二者之间是否具有相关性。方法:选取健康雄性SD大鼠100只,随机分成两大组:一次急性运动组和长期耐力组。参考Bedford渐增负荷跑台运动模型和常芸的长期耐力跑台模型进行造模,造模结束后按照实验设计对应时间点进行骨骼肌取材,常规脱水、石蜡包埋、HE染色。FOS蛋白和HSP70采用免疫组织化学法进行染色。用LEICA Qwin图像分析系统测定FOS蛋白和HSP70阳性表达面积百分比。结果:（1）一次急性运动后大鼠血清CK活性在运动后5h显著升高（P＜0.05）,运动后12h达到高峰,并且一直持续到运动后24h（P＜0.05）。在长期耐力组中,安静对照组、运动后即刻组、运动后24h三者之间均无显著性差异。（2）FOS一次急性运动组中,安静对照组几乎没有阳性表达,运动后即刻阳性表达显著增多（P＜0.01）,1h达到高峰（P＜0.01）,一直持续到运动后3h。运动后5h渐下降,运动后24h显著高于安静对照组（P＜0.05）。在长期耐力组中,运动后即刻组与安静对照组有显著性（P＜0.05）,运动后24h恢复至安静水平。（3）HSP70一次急性运动组中,安静对照组有少量阳性表达,运动后即刻阳性表达显著增多（P＜0.05）,运动后1h阳性面积进一步增大（P＜0.01）,运动后3h达到高峰,一直持续到运动后5h（P＜0.01）运动后24h始下降,但仍显著高于安静对照组（P＜0.05）。在长期耐力组中,运动后即刻阳性表达显著增多（P＜0.01）,运动后24h低于运动后即刻但与安静对照组相比有显著性（P＜0.01）。结论:本研究得出以下结论（1）一次急性运动造成了大鼠腓肠肌肌纤维排列紊乱,肌细胞轻度充血水肿;而长期耐力训练后大鼠腓肠肌纤维明显增粗,细胞间质减少,结构致密。（2）一次急性运动可以引起大鼠血清CK在24h内发生显著变化。但长期耐力运动后血清CK在24h内没有明显变化。（3）运动可以显著诱导c-fos及HSP70表达,FOS蛋白及HSP70表达量的增加与运动损伤有关。（4）c-fos基因在应激后能迅速表达,1h达到高峰。HSP70表达迟于FOS蛋白,峰值在运动后3h到来,FOS蛋白表达可能诱导了HSP70的表达。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 英文缩略词表
• 1 前言
• 1.1 选题依据
• 1.2 文献综述
• 1.2.1 肌酸激酶CK
• 1.2.2 FOS蛋白
• 1.2.3 热休克蛋白
• 2 材料和方法
• 2.1 动物及分组
• 2.2 动物模型的制备
• 2.2.1 急性运动组运动方案
• 2.2.2 长期耐力组运动方案
• 2.2.3 力竭标准的判断
• 2.3 实验仪器及主要试剂
• 2.3.1 实验仪器
• 2.2.2 主要试剂
• 2.4 实验动物的标本取材
• 2.5 观测指标及方法
• 2.5.1 一般观测指标
• 2.5.2 HE（苏木精—伊红）染色
• 2.5.3 肌酸激酶检测
• 2.5.4 FOS免疫组化染色
• 2.5.5 HSP70免疫组化染色
• 2.5.6 图像采集及数据处理
• 3 实验结果
• 3.1 一般观测指标
• 3.1.1 一般情况观察
• 3.1.2 动物体重变化情况
• 3.1.3 实验动物运动情况
• 3.2 腓肠肌形态学观察
• 3.2.1 一次急性运动组
• 3.2.2 长期耐力组
• 3.3 血清CK检测结果
• 3.3.1 一次急性运动组
• 3.3.2 长期耐力组
• 3.4 骨骼肌细胞FOS蛋白表达结果
• 3.4.1 一次急性运动组
• 3.4.2 长期耐力组
• 3.5 骨骼肌细胞HSP70表达变化结果
• 3.5.1 一次急性运动组
• 3.5.2 长期耐力组
• 4 分析与讨论
• 4.1 腓肠肌形态学分析
• 4.2 CK结果分析
• 4.3 骨骼肌FOS蛋白表达分析
• 4.4 骨骼肌HSP70蛋白表达分析
• 4.5 CK、FOS、HSP70关系探讨
• 5 结论与建议
• 5.1 结论
• 5.2 存在的问题与建议
• 参考文献
• 致谢
• 附件