论文摘要
胰腺癌是一种恶性程度较高的肿瘤，其患病率在世界范围呈上升趋势，预后极差。目前，随着分子生物学的迅速发展，与胰腺癌有关的新的癌基因、抑癌基因和抗凋亡基因不断被发现和克隆，为胰腺癌发病机制的探讨、诊断和治疗提供了许多新的靶点。其中，Survivin基因，作为凋亡抑制蛋白基因家族的成员之一，倍受关注。RNAi又叫转录后基因沉默。作为一门新的基因阻断技术，近几年来，RNAi在肿瘤基因治疗方面的研究取得了重大进展。RNAi能用于胰腺癌的治疗吗?为此，有必要作进一步的基础研究。 [目的]1、探讨胰腺癌细胞株PANC-1是否有survivin表达。2、从胰腺癌细胞株PANC-1克隆survivin基因，并对其进行序列测定分析。3、针对survivin基因构建相应的干扰载体-shRNA表达载体。4、观察并检测干扰载体对胰腺癌细胞株PANC-1 survivin表达的抑制情况，筛选出高效的干扰载体。5、检测高效干扰载体是否可以诱导胰腺癌细胞株PANC-1凋亡，为以后运用RNAi技术治疗胰腺癌奠定一定的理论和实验基础。 [方法]1、本研究购买并传代培养胰腺癌细胞PANC-1，分别采用RT-PCR技术、免疫细胞化学方法、免疫荧光技术和western-blot检测胰腺癌细胞株PANC-1是否有survivin表达。2、用RT-PCR方法从胰腺癌细胞株
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