苦豆籽粕—双歧杆菌合生元对AA+肉仔鸡肠道微生态系统影响的研究

苦豆籽粕—双歧杆菌合生元对AA+肉仔鸡肠道微生态系统影响的研究

论文摘要

为研发安全、绿色饲用微生态添加剂,本研究以内蒙古道地中药材苦豆子,在提取其主要药物成分苦参碱后所剩余的渣粕-苦豆籽粕,与两歧双歧杆菌作为本实验的主要材料。试验将苦豆籽粕与微胶囊化两歧双歧杆菌混合后添加于肉仔鸡饲料中,研究其对AA+肉仔鸡肠道内双歧杆菌、乳酸菌、大肠杆菌数量的影响。从而为进一步开发新型微生态制剂提供理论依据。试验将1日龄420只AA+肉仔鸡按体重随机分为6组,第1组为空白对照组,饲喂基础日粮;2-6组为试验组,第2组在基础日粮上添加0.02%双歧杆菌冻干菌粉,第3组基础日粮添加2%浓度的苦豆籽粕,第4、5、6组分别在基础日粮上添加0.5%、1.0%、2.0%浓度的合生元(苦豆籽粕+两歧双歧杆菌微胶囊)。整个试验期完全不含抗生素,每组从1日龄开始饲喂相应日粮,自由采食,自由饮水,试验期为42天。分别于7、14、21、28、35、42日龄每组随机抽取十只称重后,颈静脉放血致死后剖杀,取左侧盲肠,迅速冷冻于-80℃,分别用选择性培养基进行筛菌,并挑取菌落进行菌种鉴定;取盲肠内容物提取其总DNA并利用荧光定量PCR技术进行双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌量的测定。结果如下:7日龄时,合生元各组对AA+肉仔鸡肠道内的的双歧杆菌数有显著提高(P<0.05);各剂量组对乳酸杆菌数的影响不明显(P>0.05);苦豆子粕组能够明显的抑制肠道内大肠杆菌的生长(P<0.05),0.5%合生元组和1%合生元组的肉仔鸡肠道内的大肠杆菌数量显著较对照组增加(P<0.05)。14日龄时,2%合生元组对AA+肉仔鸡肠道内的的双歧杆菌数有显著提高(P<0.05);各剂量组对乳酸杆菌数的影响不明显(P>0.05);各剂量组对大肠杆菌数量的影响不明显(P>0.05)。21日龄时,双歧杆菌组、1%合生元组和2%合生元组对AA+肉仔鸡肠道内的的双歧杆菌数有显著提高(P<0.05);1%合生元组对乳酸杆菌有明显的提高作用(P<0.05);2%合生元组对大肠杆菌数量有明显的抑制作用(P<0.05)。28日龄时,各剂量组对乳酸杆菌数的影响不明显(P>0.05);苦豆子粕组大肠杆菌的数量较对照组显著降低(P<0.05)。35日龄时,双歧杆菌组、1%合生元组和2%合生元组对AA+肉仔鸡肠道内的的双歧杆菌数有显著提高(P<0.05);双歧杆菌组、0.5%合生元组和1%合生元组对乳酸杆菌有明显的提高作用(P<0.05);合生元各组的大肠杆菌数量均有增加(P<0.05)。42日龄时,1%合生元组可以对AA+肉仔鸡肠道内的的双歧杆菌数量提高,但并不显著(P>0.05);双歧杆菌组、1%合生元组和2%合生元组对乳酸杆菌有明显的提高作用(P<0.05);1%合生元组和2%合生元组的大肠杆菌数量均有增加(P<0.05)。结论:1苦豆籽粕-双歧杆菌合生元能够提高鸡肠道内双歧杆菌和乳酸杆菌的数量,同时能够降低大肠杆菌的数量。其中不同的剂量对这三种菌数量的改变也不同,1%的苦豆籽粕-双歧杆菌合生元效果最好,对肉鸡肠道内的微生态平衡有着积极的作用。2通过对肉仔鸡肠道内的双歧杆菌、乳酸杆菌进行分离鉴定,表明肉仔鸡肠道内的双歧杆菌主要有短双歧杆菌、长双歧杆菌和两歧双歧杆菌;乳酸杆菌主要有路乳杆菌、阴道乳杆菌、约氏乳杆菌和鸡乳杆菌。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 1 引言
  • 1.1 合生元的组成
  • 1.1.1 益生菌
  • 1.1.2 益生素
  • 1.2 肠道微生态系统
  • 1.3 荧光定量 PCR
  • 1.3.1 实时荧光定量 PCR 原理
  • 1.3.2 SYBR Green I 荧光定量 PCR
  • 1.3.3 实时荧光定量 PCR 应用
  • 1.4 本论文的研究依据及意义
  • 2 鸡盲肠内双歧杆菌、乳酸杆菌和大肠杆菌的荧光定量 PCR 测定
  • 2.1 材料与方法
  • 2.1.1 材料
  • 2.1.2 方法
  • 2.2 结果与分析
  • 2.2.1 细菌 DNA 提取方法检测结果
  • 2.2.2 荧光定量 PCR 检测三种细菌方法建立的结果
  • +肉仔鸡盲肠内双歧杆菌数的定量结果'>2.2.3 苦豆籽粕-双歧杆菌合生元对 AA+肉仔鸡盲肠内双歧杆菌数的定量结果
  • +肉仔鸡盲肠内乳酸杆菌数的定量结果'>2.2.4 苦豆籽粕-双歧杆菌合生元对 AA+肉仔鸡盲肠内乳酸杆菌数的定量结果
  • +肉仔鸡盲肠内大肠杆菌数的定量结果'>2.2.5 苦豆籽粕-双歧杆菌合生元对 AA+肉仔鸡盲肠内大肠杆菌数的定量结果
  • 2.3 讨论
  • +肉仔鸡肠道内双歧杆菌数量的影响'>2.3.1 苦豆籽粕-双歧杆菌合生元对 AA+肉仔鸡肠道内双歧杆菌数量的影响
  • +肉仔鸡肠道内乳酸杆菌数量的影响'>2.3.2 苦豆籽粕-双歧杆菌合生元对 AA+肉仔鸡肠道内乳酸杆菌数量的影响
  • +肉仔鸡肠道内大肠杆菌数量的影响'>2.3.3 苦豆籽粕-双歧杆菌合生元对 AA+肉仔鸡肠道内大肠杆菌数量的影响
  • 3 肠道内双歧杆菌和乳酸杆菌分离菌株的鉴定
  • 3.1 材料与方法
  • 3.1.1 材料
  • 3.1.2 方法
  • 3.2 结果与分析
  • 3.2.1 菌落形态观察结果
  • 3.2.2 细菌镜检结果
  • 3.2.3 生化鉴定结果
  • 3.2.4 RAPD 结果
  • 3.2.5 16SrDNA 鉴定结果
  • 3.2.6 同源性比较
  • 3.3 讨论
  • 4 结论
  • 致谢
  • 参考文献
  • 作者简介
  • 相关论文文献

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