雌二醇对同型半胱氨酸诱导血管内皮细胞组织因子表达的影响和机制

论文摘要

目的:①研究同型半胱氨酸（Hcy）对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）组织因子（TF）表达的影响以及雌二醇对其干预作用,为激素疗法（HT）对血管内皮作用提供理论依据;②探讨雌二醇（E2）抑制Hcy诱导内皮细胞TF表达的作用机制。方法:①采用DMEM低糖完全培养基,培养HUVEC。②使用一期凝固法,检测总细胞促凝活性。③采用逆转录-多聚酶链式反应（RT-PCR）法,检测TF的mRNA。④利用免疫组织化学染色法,观察核因子-κB（NF-κB）的变化。结果:①不同浓度的Hcy(1×10-5mol/L～1×10-4mol/L),能呈剂量依赖性地促进HUVEC的PCA和TF mRNA增加（与对照组相比r=0.969,P<0.01）,在1×10-4mol/L达到峰值。②单独使用E2(1×10-9mol/L～1×10-6mol/L),对HUVEC的PCA没有影响（P>0.05）。③E2(1×10-9mol/L～1×10-6mol/L)抑制Hcy(1×10-4mol/L)诱导HUVEC的PCA和TF mRNA,并存在显著量效关系（r=-0.686,P<0.01）,1×10-7mol/L是抑制的最适浓度。④雌激素完全拮抗剂氟维司群（ICI182,780）(1×10-6mol/L)对E2(1×10-7mol/L)抑制Hcy诱导HUVEC的PCA和TF mRNA表达没有明显拮抗作用（P>0.05）。⑤免疫组织化学染色观测下发现,Hcy可引起HUVEC的NF-κB胞浆移入核内（P<0.01）;E2可抑制Hcy引起的NF-κB核易位（P<0.01）;ICI182,780对E2抑制Hcy引起的NF-κB核易位无明显拮抗作用（P>0.05）。结论:①Hcy诱导HUVEC表达TF,提示Hcy可以引起血管内皮功能受损。②E2单独不能刺激HUVEC表达TF,提示(1×10-9mol/L～1×10-6mol/L)E2没有损伤正常内皮细胞的内皮功能③E2抑制Hcy诱导HUVEC表达TF,1×10-7mol/L是抑制的最适合浓度,提示E2对内皮功能早期损害的血管内皮细胞,有一定的保护作用。④E2降低HUVEC的NF-κB核易位,可能通过抑制NF-κB的活化而下调TF基因的表达。⑤E2抑制Hcy诱导HUVEC表达TF作用未通过经典核受体途径。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩略词
• 第一章 雌二醇对同型半胱氨酸诱导血管内皮细胞组织因子表达的影响
• 1.前言
• 2.材料与方法
• 3.结果
• 4.讨论
• 5.结论
• 第二章 雌二醇抑制同型半胱氨酸诱导血管内皮细胞组织因子表达的机制
• 1.前言
• 2.材料与方法
• 3.结果
• 4.讨论
• 5.结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 攻读学位期间主要的研究成果