论文摘要
实验目的应用巢式PCR方法检测人类多瘤病毒KIPyV和WUPyV基因,并对扩增产物进行序列分析;用RT-PCR方法检测RSV、IFV(A、B型)、PIV(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型)、hRV、ADV、冠状病毒OC43、229E及hMPV、HBoV、冠状病毒NL63、HKU1,并进行序列测定,以了解兰州地区急性呼吸道感染患儿病毒感染状况。对象及方法1.收集兰州地区2006年12月到2007年11月确诊为急性呼吸道感染患儿的鼻咽抽吸物(Nasopharyngea aspirates,NPA)标本。2.用巢式PCR方法检测人类多瘤病毒KIPyV和WUPyV基因,并对扩增产物进行序列分析:用RT-PCR方法及PCR检测RSV、IFV(A、B型)、PIV(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型)、hRV、ADV、冠状病毒OC43、229E、NL63、HKU1及hMPV、HBoV。3.对各种病毒在儿童急性呼吸道感染的临床特点进行分析。4.结果1.406例鼻咽抽吸物(NPA)标本检测到11例KIPyV和17例WUPyV阳性扩增产物,阳性检出率分别是2.7%和4.2%。将阳性PCR产物进行序列测定及分析发现与Genebank中已知序列同源性在96%-100%之间,KIPyV和WUPyV兰州株的核苷酸变异较小,但也有个别碱基的插入和突变;2.KIPyV和/或WUPyV感染病例主要是3岁以下儿童。17例WUPyV感染患儿中男性6例,女性11例,男女感染率之比1:1.8。11例KIPyV感染患儿中男性7例,女性4例,男女感染率之比1.75:1。两种病毒的检出率在性别上均无差别(X2=0.946,P>0.05;X2=0.781,P>0.05);3.KI多瘤病毒感染儿童年龄最大9岁,最小3天,中位数年龄7月。3岁以内患儿占KIPyV感染患儿的73%(8/11)。WUPyV感染儿童年龄最大8岁,最小1天,中位数年龄2岁2月,3岁以内患儿占WUPyV感染患儿的65%(11/17);4.KIPyV和WUPyV阳性病例主要分布在秋冬季,KIPyV 11月和1月检出数最多,均为3例,WUPyV11月检出数达到高峰,为9例;5.KIPyV和WUPyV感染阳性共28例,混合感染其他病毒总共20例,其中KIPyV混合其他病毒感染8例,WUPyV混合感染11例,混合感染率分别是72.7%(8/11)和64.7%(11/17);6.临床诊断上呼吸道感染、细支气管炎、和支气管肺炎中均KIPyV和WUPyV感染;7.406例患儿总共检出病毒感染阳性病例232例,总检出率达57.1%。其中RSV感染阳性118份,阳性率为29.1%;hRV感染阳性56份;阳性率为13.8%;ADV感染阳性52份;阳性率为12.8%;PIV3感染阳性38份;阳性率为9.4%:HBOV感染阳性29份;阳性率为7.1%;hMPV感染阳性29份;阳性率为7.1%;IFVA感染阳性29份;阳性率为7.1%;Hcov-HKU1感染阳性12份;阳性率为3.0%;IFVB感染阳性6份;阳性率为1.5%;PIV1感染阳性2份;阳性率为0.5%;Hcov-229E感染阳性1份;阳性率为0.2%;未能检测到PIV2及Hcov-OC43;8.242例男性患者中病毒感染141例(58.3%),女性164例感染91例(55.5%),男女感染率的之比为1.05:1,没有明显差异(X2=0.579,P>0.05);9.患儿年龄最大14岁,最小1天。平均年龄2岁5月。1岁以内患儿病毒感染89例,占病毒感染人数的38.4%,1-3岁患儿病毒感染78例,占总感染人数的33.6%,3-5岁患儿病毒感染39例,占16.8%,大于5岁患儿病毒感染阳性26例,占11.2%;随着年龄的增长,病毒的阳性检出率逐渐下降。各年龄组的发病率之间无明显统计学意义(P>0.05)。10.本地区儿童病毒性急性呼吸道感染的季节分布较明显,以冬春季节为主。结论1.病毒病原在兰州地区儿童呼吸道感染中占有重要地位,57.1%的患儿病毒感染阳性。2.兰州地区急性呼吸道感染患儿中检测到KI和WU多瘤病毒基因。多瘤病毒KI和WU的阳性检出率分别是2.7%和4.2%。感染病例主要是3岁以下儿章,性别无明显差异。3.本地区儿童病毒性呼吸道感染以5岁以下患儿为主,2岁以下年龄组更为多见,且具有明显的季节分布特征,以冬春季节最多。4.本发地区小儿病毒性呼吸道感染病原中RSV、hRV、ADV及PIV3占有主要地位,近年新发现病毒Hmpv、HBoV亦占有一定比例。新型冠状病毒NL63和HKU1在本地区儿童呼吸道感染中首次检出。
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