导读:本文包含了钙相关蛋白类论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:前列腺肿瘤,CAMRs,PP2A,PP2B
钙相关蛋白类论文文献综述
王荣荣[1]（2017）在《钙相关蛋白在前列腺肿瘤中的表达研究》一文中研究指出前列腺作为生殖分泌腺,对男性生理健康发挥着至关重要的作用。由于前列腺肿瘤在老年人群中的高发病率和致死率,在美国及西欧国家已经引起人们广泛关注。在我国,随着社会人口老龄化进程,前列腺肿瘤的发病率及致死率也逐渐升高,由于早期临床症状不明显导致肿瘤被发现时已处于晚期而错过最佳治疗时机。另外,由于前列腺早期病变向肿瘤转化的过程中缺少有效的生物靶标,导致诊断不全面或过度诊断影响该疾病的预防与早期治疗。前列腺肿瘤具有以下特征:(1)病理类型较多,临床表现多样;(2)病程较长,可达十几年甚至几十年;(3)发病隐匿,早期症状不明显;(4)发病率及致死率高,预防和早期诊断存在高难度。探索高质量的早期诊断方法,即寻找生物预警诊断标记物对于前列腺肿瘤预防和治疗十分关键。目前,相关文献显示钙相关蛋白与前列腺肿瘤的发生发展具有一定相关性,因此本课题旨在通过研究钙通道蛋白RyR复合体的调节蛋白CAMRs、PP2A家族、PP2B家族、整合蛋白integrin、细胞外基质蛋白FNs家族蛋白、p53以及PTEN蛋白在前列腺肿瘤中的表达模式,并结合体外癌症细胞培养体系为探寻前列腺肿瘤早期标记物提供一定的数据参考,有助于更全面地对前列腺肿瘤的早期病变和转移进行预测,从而更有针对性地进行个体化治疗。本课题以前列腺肿瘤J-91转基因模型小鼠和人类前列腺肿瘤样品为研究对象,参照 Gleason 分级将其分为 Grade I(Gleason 2-4 分)、Grade Ⅱ(Gleason 5-6 分)和Grade Ⅲ(Gleason 7-10分)叁个等级。本研究主要通过HE、PASM和Trichrome染色等组织化学方法观察小鼠和人类前列腺肿瘤病理变化;使用免疫组化分析比较CAMRs、integrin和p53在前列腺肿瘤组织中的表达定位;通过Western Blot技术检测CAMRs、PP2A、PP2B、p53和PTEN在前列腺肿瘤组织中的蛋白表达水平;采用实时定量qPCR技术检测CAMR1和CAMR2在小鼠叁个等级前列腺肿瘤中的mRNA表达水平;利用高内涵细胞成像系统分析比较小鼠原代肿瘤细胞(Grade Ⅰ-Ⅲ)形态和动态差异。实验结果如下:(1)组织病理学结果显示:与对照组相比,小鼠及人类前列腺肿瘤细胞基膜层逐渐解体,上皮层细胞排列杂乱,腺体结构破损,细胞核数量增加,细胞体积增大;血管、淋巴管等结构及脂肪组织均增多;胶原纤维沉积,肿瘤纤维化程度加深。(2)免疫组化结果显示:CAMR1和CAMR2蛋白在正常小鼠前列腺组织中表达量较低,在前列腺肿瘤小鼠中表达量显着升高,主要定位于基膜和上皮细胞。在人类前列腺肿瘤中,CAMR1和CAMR2多表达定位于上皮细胞和基膜处;整合蛋白integrin αV在人类肿瘤细胞基膜、上皮细胞中均有表达,且CAMR1、CAMR2和integrinαV的表达量均随着肿瘤级别的升高而降低。(3)Western Blot结果表明:CAMR1蛋白在小鼠前列腺肿瘤中表达显着上调(P<0.01),CAMR2蛋白有上升趋势但无显着性差异,该结果与免疫组化结果相一致;PP2A A、PP2A C、PP2B B、FN-3 和 PTEN 的表达量均显着上调(P<0.05);PP2A B、PP2A B55、FN-1、FN-4和FN-5的表达量均有上升趋势但无统计学差异;PP2B A和p53的表达有下降趋势但也未呈现显着差异。(4)实时定量qPCR结果显示:在mRNA水平上,CAMR1和CAMR2在小鼠叁个等级肿瘤中的表达量相比于对照组均有上升的趋势,但无显着性差异。(5)高内涵分析结果显示:ECM培养皿上前列腺肿瘤细胞的速度、面积和细胞核平均荧光强度等与对照组相比都有一定程度上调,统计分析表明,组织块、聚集细胞群和散布细胞,无论是在ECM平面和常规生长皿表面上,分离自GⅠ、GⅡ和GⅢ肿瘤来源的细胞,都在细胞面积及长度、细胞运动距离与速度、细胞核面积及平均荧光强度等高内涵参数上显示出非常明显的统计学差异(P均<0.001)。结论:前列腺肿瘤作为一种男性生殖系统易发恶性肿瘤,早期生物标记物的缺乏是该疾病预防和治疗的主要困难。钙离子作为第二信使,在细胞的分裂、转移和凋亡中起到重要作用,已有研究报道钙与前列腺肿瘤的发生发展密切相关,故本课题通过免疫组化、实时定量qPCR和Western Blot从组织、蛋白和mRNA水平探讨钙相关蛋白(CAMRs、PP2A和PP2B)、细胞外基质蛋白(FNs)、PTEN和p53蛋白在前列腺肿瘤中的表达模式,结果预示钙相关蛋白与前列腺肿瘤的发生紧密相关,且有可能成为潜在的治疗靶标。本课题还结合体外癌症细胞培养体系,进一步为寻找前列腺肿瘤早期诊断物提供相关实验依据和理论基础。(本文来源于《陕西师范大学》期刊2017-05-01）
吕俊才[2]（2016）在《囊性卵巢癌变中钙相关蛋白的表达研究》一文中研究指出卵巢肿瘤(ovarian tumor)作为一种常见的妇科恶性肿瘤,全球5年死亡率已高达60%-70%,成为致死率最高的妇科肿瘤,严重威胁着女性的健康与生命安全。随着中国社会发展和人们生活方式的改变,卵巢肿瘤的发病率和死亡率均呈快速上升的态势,在未来数年内将仍是威胁女性健康的主要疾病之一。卵巢肿瘤具有发病隐匿性,早期无典型症状的特点,确诊时多数已处在肿瘤晚期,这就迫切需要科研工作者在卵巢肿瘤的早期预警诊断方面进行更加深入的研究。有报道,钙的摄入量与卵巢肿瘤的发生成正相关性。细胞内Ca2+主要通过细胞膜上分布的多种钙通道蛋白进出细胞,雷诺丁受体钙通道(ryanodine receptor, RyR)已被证实在维持细胞内钙稳态方面起着重要作用。本文通过探究与细胞第二信使Ca2+密切相关的细胞内外蛋白,即钙通道蛋白复合体的系列调节蛋白、FNs家族蛋白、细胞骨架蛋白和癌基因表达蛋白在卵巢肿瘤中的表达模式,为研发有效的早期预警诊断标志物提供一定的实验依据和理论基础。本硕士论文以小鼠卵巢肿瘤为研究对象,将囊性卵巢肿瘤(ovarian tumor, OvT)分为两个部分,卵巢肿瘤实体组织部分(solid, ovarian tumor, OvT-sol)和肿瘤液体部分(liquid, ovarian tumor, OvT-liq),采用Western Blot方法检测钙通道蛋白RyR的调节蛋白CAMR1、CAMR2、PP2A家族,细胞外基质FNs家族蛋白,以及钙粘蛋白N-cadherin,细胞骨架蛋白(3-tubulin, p53和PTEN表达蛋白,比较这些蛋白在这两个组织部分中的表达变化。通过RT-PCR法检测CAMR1和CAMR2在小鼠正常卵巢和卵巢肿瘤中mRNA水平上的表达。采用常规染色方法HE.PASM和Masson分析卵巢肿瘤的组织学病理变化。以N-cadherin为对照,利用免疫组织化学染色方法检测CAMR1和CAMR2蛋白在正常卵巢中的表达分布,并确定了它们在卵巢肿瘤中的表达变化。结果如下：(1)RT-PCR检测显示,在mRNA水平上CAMR1和CAMR2蛋白在卵巢肿瘤和正常卵巢中均有表达。(2)组织形态学常规染色显示,与正常卵巢组织相比卵巢肿瘤组织在结构上已发生明显病理变化,卵泡明显萎缩、破坏甚至消失,细胞核增大,血管、淋巴管和脂肪组织增多,肿瘤细胞弥散分布,基膜结构发生缺损,结构松散,基膜线条和胶原纤维增多,基膜染色加深,表明肿瘤纤维化程度增加。(3)免疫组化分析显示,在正常卵巢组织中CAMR1和CAMR2蛋白表达量较低,主要分布于发育各时期的卵泡和卵巢支持组织中,但在卵巢肿瘤组织中的表达均有上升,多定位于胞质和淋巴管部位；N-cadherin在正常卵巢组织中高表达,主要分布于卵泡细胞各个细胞间的细胞膜上,在卵巢结缔组织中则分布于细胞周边,但在卵巢肿瘤组织中,N-cadherin的表达降低乃至消失。(4)Western Blot对目的蛋白的定量表达水平检测显示,RyR调节蛋白CAMR1在卵巢肿瘤全部组织(OvT)和OvT-sol中表达显着上调,而在液体组织中无明显变化；CAMR2在卵巢肿瘤组织中的表达均显着高于正常卵巢组织,特别在OvT-sol中表达最高,这与免疫组化染色结果相一致；PP2A叁个亚基的表达不尽相同,PP2AA和PP2AB在卵巢肿瘤组织中的表达均显着高于正常卵巢组织；PP2A B55的表达也显着高于正常卵巢组织,但在OvT-liq中该蛋白表达较低,要显着低于OvT和OvT-sol;PP2AC在卵巢肿瘤组织中的表达却均出现显着下调,特别是在OvT-liq中表达最低,显着低于OvT和OvT-sol。细胞外基质蛋白FN-1和FN-2在卵巢肿瘤组织中的表达均显着上调,在OvT-liq中的表达上调程度要显着低于OvT和OvT-sol; FN-3在卵巢肿瘤OvT和OvT-liq中的表达要低于正常卵巢组织,但无显着性差异,在OvT-sol中FN-3的表达要显着低于正常卵巢组织；FN-4在卵巢肿瘤组织中的表达与正常卵巢组织相比无显着性差异；FN-5在卵巢肿瘤OvT中的表达要显着高于正常卵巢组织,但在OvT-sol和OvT-liq中均无显着性变化。细胞骨架蛋白P-tubulin在卵巢肿瘤组织中的表达与正常卵巢组织相比虽有上升趋势,但无显着性差异；钙粘蛋白N-cadherin在卵巢肿瘤组织中的表达均显着低于正常卵巢组织；P53和PTEN在卵巢肿瘤组织中的表达均显着高于正常卵巢组织,但在OvT-liq中的表达上调程度要显着低于OvT。结论：本研究系统地对钙通道蛋白复合体PyR的调节蛋白、细胞外基质FNs家族蛋白、钙粘蛋白N-cadherin、细胞骨架蛋白β-tubulin和癌基因表达蛋白在小鼠卵巢肿瘤中的表达水平进行了研究,对后续在细胞及分子水平上进行的卵巢肿瘤相关研究具有一定实际意义。通过免疫组化、RT-PCR和Western Blot检测到在小鼠卵巢肿瘤中CAMR1和CAMR2在mRNA和蛋白水平上均有表达,可能参与了卵巢肿瘤发展过程中的调控,可能成为卵巢肿瘤早期诊断的生物标志物。PP2AA、 PP2AB、PP2AB55、FN-1、FN-2、FN-5、P53和PTEN在卵巢肿瘤中的表达上调以及PP2AC和N-cadherin的下调预示着钙可能与卵巢肿瘤的发生有关,并有可能成为潜在生物标志物应用于卵巢肿瘤的早期诊断中。因此,本研究可以为卵巢肿瘤的早期诊断与治疗方面的研究提供有价值的信息与新的途径。(本文来源于《陕西师范大学》期刊2016-06-01）
郭羽[3]（2016）在《钙相关蛋白在不同转移表型肝癌中的表达及其与ANXA7调控的关系》一文中研究指出背景:原发性肝癌属于上皮来源的恶性肿瘤,是全球最严重的恶性肿瘤之一,也是我国最常见的肿瘤。淋巴道转移作为其早期转移方式,是影响肝癌预后的一个重要决定因素。因此,探寻淋巴道转移相关蛋白,研究肝癌淋巴道转移的分子机制成为研究的重心。本课题组前期通过遗传背景相同、但淋巴道转移能力不同的肝癌细胞株(Hca-F细胞和Hca-P细胞),利用多种分子生物学技术发现Hca-F细胞和Hca-P细胞的ANXA7在基因和蛋白质水平上均存在显着性差异表达,并且通过在Hca-F细胞中上调表达基因ANXA7和在Hca-P细胞中下调表达基因ANXA7,研究其对细胞转移行为的影响,表明ANXA7在小鼠腹水型肝癌的淋巴道转移中发挥着重要的作用。本次实验在前期研究的基础上,通过观察钙相关蛋白STIM1、CAPN2及PYK2在高、低淋巴道转移潜能小鼠肝癌Hca-F细胞和Hca-P细胞中的表达情况及与ANXA7之间的关系,来进一步阐明肝癌淋巴道转移的分子机制。目的:通过实时定量PCR和蛋白质免疫印迹技术,确定钙相关蛋白STIM1、CAPN2及PYK2在Hca-F细胞和Hca-P细胞中的表达情况;免疫组织化学法检测钙相关蛋白STIM1、CAPN2及PYK2在小鼠腹水型肝癌组织细胞中的表达定位;利用ANXA7上调的Hca-F细胞和ANXA7下调的Hca-P细胞,观察ANXA7的表达变化与钙相关蛋白之间的关系;分析ANXA7的表达变化对钙相关蛋白表达的影响,确定与ANXA7表达密切相关的钙相关蛋白;通过细胞功能试验,检测抑制与ANXA7密切相关的钙相关蛋白的活性后,细胞迁移、侵袭及增殖能力的变化。方法:利用实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹法分别在基因水平和蛋白质水平检测钙相关蛋白STIM1、CAPN2和PYK2在Hca-F细胞,ANXA7上调的Hca-F细胞,Hca-P细胞和ANXA7下调的Hca-P细胞中的差异表达。免疫组化观察上述叁种钙相关蛋白在Hca-F和Hca-P实体瘤组织细胞中的表达定位,应用CCK8法测不同浓度梯度的钙蛋白抑制剂对Hca-P细胞作用12h、24h、36h、48h后,细胞的光密度值的变化,检测ANXA7表达相关钙相关蛋白抑制剂对肿瘤细胞增殖活性的影响。Transwell实验观察肿瘤细胞穿透小室膜的细胞数,验证抑制钙相关蛋白的活性对肿瘤细胞迁移和侵袭能力的影响。结果:实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹结果表明,钙相关蛋白STIM1、CAPN2和PYK2在Hca-F细胞中的表达量均高于Hca-P细胞。在m RNA水平上检测各基因在Hca-F细胞和Hca-P细胞中的表达量,STIM1在Hca-F细胞中的表达量是Hca-P细胞的1.45倍,CAPN2在Hca-F细胞中的表达量是Hca-P细胞的1.67倍,PYK2在Hca-F细胞中的表达量是Hca-P细胞的1.98倍。Western Blot结果显示,STIM1在Hca-F细胞中表达量是Hca-P细胞的1.38倍,CAPN2在Hca-F细胞中表达量是Hca-P细胞3.2倍,PYK2在Hca-F细胞中表达量是Hca-P细胞的2.5倍。免疫组化结果显示钙相关蛋白STIM1、CAPN2和PYK2在Hca-F细胞实体瘤中的表达量均高于Hca-P细胞实体瘤,结果均具有统计学差异。STIM1在ANXA7上调、下调的Hca-F和Hca-P细胞中表达变化没有差异;PYK2在ANXA7上调的Hca-F细胞细胞中表达量减少,在ANXA7下调的Hca-P细胞中表达量增加;但钙蛋白酶CAPN2随着ANXA7的上下调而表现出与其变化一致的结果,说明CAPN2与ANXA7表达变化正相关。CCK8实验测得CAPN2钙蛋白酶抑制剂ALLN影响了Hca-P细胞在12h、24h、36h、48h的光密度值,提示ALLN减弱了肿瘤细胞的增殖能力。Transwell实验检测到,用ALLN培养的Hca-P细胞组穿过小室的细胞数与不加ALLN的Hca-P细胞组相比,细胞数量明显减少,结果表明ALLN抑制了肿瘤细胞的转移、侵袭能力。结论:钙相关蛋白STIM1、CAPN2和PYK2在小鼠腹水型肝癌Hca-F细胞中的表达量高于Hca-P细胞,与ANXA7在Hca-F细胞和Hca-P细胞中的差异表达结果一致。高淋巴道转移细胞中钙相关蛋白STIM1、CAPN2和PYK2的相对高表达提示钙相关蛋白STIM1、CAPN2和PYK2可能促进肿瘤细胞的淋巴道转移。CAPN2在肝细胞癌中的表达与ANXA7密切相关,随ANXA7上调而表达增加,下调而表达减少,说明CAPN2可能位于ANXA7功能通路的下游,或者ANXA7通过其机制调控CAPN2的表达。CCK8实验及Transwell实验结果表明,肝癌细胞在CAPN2钙蛋白酶抑制剂的作用下,其增殖能力,迁移和侵袭能力明显下降,与ANXA7下调的肝癌细胞的功能实验结果一致,说明CAPN2可能作为一个与ANXA7密切相关的钙相关蛋白共同参与了肝癌细胞的转移过程。(本文来源于《大连医科大学》期刊2016-03-01）
张翰风[4]（2014）在《油菜与拟南芥中钙相关蛋白激酶基因调控非生物逆境响应的机制研究》一文中研究指出干旱、盐害等非生物逆境严重影响作物的产量与品质，钙离子是一种植物细胞内普遍存在的第二信使，其浓度在逆境刺激下会发生波动。植物体内解码钙信号的蛋白分为四大类，其中类钙调磷酸酶B蛋白（Calcineurin B-like proteins,CBLs）是细胞内存在的能够结合Ca2+的一类传感器，可通过与一类称为CIPK(CBL-interacting protein kinases,CIPKs）的丝/苏氨酸蛋白激酶互作来调控逆境应答。钙依赖性蛋白激酶（Calcium-dependent protein kinases, CPKs）也是一类丝/苏氨酸蛋白激酶，并且为植物和一些原生动物所特有。虽然对模式植物拟南芥与水稻的CBL、CIPK、CPK基因家族的研究报道较多，但对其他物种的研究很少。油菜(Brassica napus L.)是与拟南芥同属于芸薹属的、在中国和世界范围内非常重要的油料作物，它们基因组的相似性较高。鉴于油菜籽的产量和品质经常受到环境胁迫，包括干旱、低温和盐害的危害，从分子水平研究油菜响应逆境的钙信号相关基因并阐明其调控的信号网络，并与拟南芥相关结论进行比较，具有理论意义与实践价值。在本研究中，对前期工作中鉴定、克隆的多个油菜CBL、CIPK与CPK基因，采用植物生理学、生物化学、分子生物学以及遗传学等方法，进行了一系列分析，主要有：利用绿色荧光蛋白（Green Fluorescence Protein, GFP）报告基因确定了3个BnaCBL、2个BnaCIPK以及5个BnaCPK的亚细胞定位；利用酵母双杂交检测了6个BnaCBL和17个BnaCIPK的互作，并对其中的一部分互作通过双分子荧光互补(BimolecularFluorescence Complementation, BiFC)进行了验证；选择了6个BnaCBL、12个BnaCIPK基因以及21个BnaCPK基因，对它们在盐害、干旱、冷害、热害、脱落酸（abscisic acid,ABA）、低钾（low potassium, LK）和百草枯（methyl viologen, MV）胁迫下的表达水平分别进行了实时定量PCR分析，发现这些基因可以对多种逆境产生响应，并对BnaCIPK24在拟南芥中进行了功能分析。结论表明油菜的CBL-CIPK以及CPK网络可能处于几种不同的信号通路的交叉位置。同时，还研究了一个全新的拟南芥丝/苏蛋白激酶基因PKSA5在ABA与干旱应答通路中的基本的作用机制，分析了该基因的启动子活性，鉴定了多个与PKSA5互作的逆境应答相关蛋白，发现该蛋白激酶可通过磷酸化下游ABF转录因子参与调控ABA与干旱胁迫响应，是一个有着很好的应用前景的基因。本研究结果表明，CBL和CIPK家族成员可以形成一个动态的复合物从而应对不同的非生物逆境或激素信号传递。对油菜和拟南芥中CBL-CIPK的比较分析突出了它们在功能上的差异和在油菜中研究CBL-CIPK基因的必要性。同时，对于油菜中的CPK基因家族成员的定位和表达模式的研究也为后续的功能与信号转导机制研究打下了基础。本研究中发现的一个调控ABA与干旱胁迫应答的新的PKSA5基因及其分子调控机制的解析，将为作物的抗逆育种提供候选基因与理论依据。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2014-03-01）
王水红,马应杰[5]（2009）在《钙相关蛋白43的肿瘤相关性》一文中研究指出恶性肿瘤难以根治的一个非常重要的原因在于难以早期发现和早期诊断。肿瘤的免疫学诊断和基因诊断为肿瘤的早期诊断提供了可能。钙相关蛋白43基因是在研究镍化合物致癌机理中发现的新基因,研究发现其在正常组织表达很低或不表达,而在肿瘤组织表达显着上调,且为肿瘤发生、发展的早期事件之一。(本文来源于《医学综述》期刊2009年23期）
吴士文,马维娅,苏慧,范祥云,沈定国[6]（2008）在《钙相关蛋白能否作为中央轴空病的特殊标记物(附1例中央轴空病)》一文中研究指出中央轴空病(central core disease,CCD)是一种常染色体显性遗传的先天性肌病,其临床表现为缓慢进展或非进展性近端肢体无力,肌肉组织酶化学染色出现特征性的中央轴空结构。CCD的临床表现、病理改变可有很大变异,学者一直试图寻找有效的抗体标(本文来源于《中国神经免疫学和神经病学杂志》期刊2008年03期）
杨光[7]（2006）在《钙相关蛋白在乳腺癌中的表达及其与微钙化形成关系的研究》一文中研究指出目的:近年来,乳腺癌的发病率逐年上升。钼靶X线摄影检查作为乳腺疾病诊断的首选方法,在乳腺癌的发现和诊断中发挥着重要作用,而其中微钙化征象在早期癌特别是乳腺导管内癌的筛查中更具有重要价值。资料显示,大约40%的乳腺癌在X线片中表现微钙化,90%的导管原位癌是通过钼靶X线微钙化被发现的。因此,结合钼靶X线片中微钙化征象,深入研究微钙化的形成机理、镜下病理特征表现及相关生物学特性,对加深X线片中微钙化征象的认识,提高乳腺癌的诊治水平以及通过影像学表现早期判断预后具有重要意义。传统认为乳腺癌微钙化的形成是一个被动、退化的过程,主要由癌组织坏死所致。最近研究显示某些异位钙化形成可能是一个主动的过程,很多与骨化相关的蛋白和细胞因子可能参与了钙化形成。骨桥蛋白(osteo- pontin,OPN)和骨连接蛋白(osteonectin,ON)均为骨基质磷酸化糖蛋白,与骨组织的矿化有关。研究表明,OPN和ON可能参与了心血管系统异位钙化及肾结石的形成。骨形态发生蛋白(bone morphogenetic prot- eins, BMPs)具有诱导骨形成的作用,其中BMP-2是最主要的骨生长调控因子。乳腺癌微钙化属于组织异位钙化,因此,乳腺癌细胞也可能具有与成骨细胞相似的生物学特性,通过相同的信号通路调控OPN、ON等骨基质蛋白的表达,进而影响局部钙盐的沉积。目前,有关钙相关蛋白与乳腺癌微钙化的关系及微钙化形成机制的研究国内外文献报道甚少。Bellahcene和Tokes等学者通过免疫组化和RT-PCR等技术初步检测了乳腺癌组织中OPN、ON的表达情况,推测OPN、ON的表达可能与乳腺癌微钙化形成有关。但是由于样本例数较少,且缺乏微钙化形成机理的研究。为了进一步深入探讨乳腺癌组织中微钙化的形成机制及临床意义,本研究依据钼靶X线片中微钙化表现分组,应用免疫组化、流式细胞技术和RT-PCR等方法检测人乳腺癌组织中OPN、ON和BMP-2的表达情况,分析其与微钙化和临床病理特征的关系;同时应用连续切片HE染色、钙盐特染及透射电镜观察分析了乳腺癌微钙化(本文来源于《河北医科大学》期刊2006-04-01）
钙相关蛋白类论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
卵巢肿瘤(ovarian tumor)作为一种常见的妇科恶性肿瘤,全球5年死亡率已高达60%-70%,成为致死率最高的妇科肿瘤,严重威胁着女性的健康与生命安全。随着中国社会发展和人们生活方式的改变,卵巢肿瘤的发病率和死亡率均呈快速上升的态势,在未来数年内将仍是威胁女性健康的主要疾病之一。卵巢肿瘤具有发病隐匿性,早期无典型症状的特点,确诊时多数已处在肿瘤晚期,这就迫切需要科研工作者在卵巢肿瘤的早期预警诊断方面进行更加深入的研究。有报道,钙的摄入量与卵巢肿瘤的发生成正相关性。细胞内Ca2+主要通过细胞膜上分布的多种钙通道蛋白进出细胞,雷诺丁受体钙通道(ryanodine receptor, RyR)已被证实在维持细胞内钙稳态方面起着重要作用。本文通过探究与细胞第二信使Ca2+密切相关的细胞内外蛋白,即钙通道蛋白复合体的系列调节蛋白、FNs家族蛋白、细胞骨架蛋白和癌基因表达蛋白在卵巢肿瘤中的表达模式,为研发有效的早期预警诊断标志物提供一定的实验依据和理论基础。本硕士论文以小鼠卵巢肿瘤为研究对象,将囊性卵巢肿瘤(ovarian tumor, OvT)分为两个部分,卵巢肿瘤实体组织部分(solid, ovarian tumor, OvT-sol)和肿瘤液体部分(liquid, ovarian tumor, OvT-liq),采用Western Blot方法检测钙通道蛋白RyR的调节蛋白CAMR1、CAMR2、PP2A家族,细胞外基质FNs家族蛋白,以及钙粘蛋白N-cadherin,细胞骨架蛋白(3-tubulin, p53和PTEN表达蛋白,比较这些蛋白在这两个组织部分中的表达变化。通过RT-PCR法检测CAMR1和CAMR2在小鼠正常卵巢和卵巢肿瘤中mRNA水平上的表达。采用常规染色方法HE.PASM和Masson分析卵巢肿瘤的组织学病理变化。以N-cadherin为对照,利用免疫组织化学染色方法检测CAMR1和CAMR2蛋白在正常卵巢中的表达分布,并确定了它们在卵巢肿瘤中的表达变化。结果如下：(1)RT-PCR检测显示,在mRNA水平上CAMR1和CAMR2蛋白在卵巢肿瘤和正常卵巢中均有表达。(2)组织形态学常规染色显示,与正常卵巢组织相比卵巢肿瘤组织在结构上已发生明显病理变化,卵泡明显萎缩、破坏甚至消失,细胞核增大,血管、淋巴管和脂肪组织增多,肿瘤细胞弥散分布,基膜结构发生缺损,结构松散,基膜线条和胶原纤维增多,基膜染色加深,表明肿瘤纤维化程度增加。(3)免疫组化分析显示,在正常卵巢组织中CAMR1和CAMR2蛋白表达量较低,主要分布于发育各时期的卵泡和卵巢支持组织中,但在卵巢肿瘤组织中的表达均有上升,多定位于胞质和淋巴管部位；N-cadherin在正常卵巢组织中高表达,主要分布于卵泡细胞各个细胞间的细胞膜上,在卵巢结缔组织中则分布于细胞周边,但在卵巢肿瘤组织中,N-cadherin的表达降低乃至消失。(4)Western Blot对目的蛋白的定量表达水平检测显示,RyR调节蛋白CAMR1在卵巢肿瘤全部组织(OvT)和OvT-sol中表达显着上调,而在液体组织中无明显变化；CAMR2在卵巢肿瘤组织中的表达均显着高于正常卵巢组织,特别在OvT-sol中表达最高,这与免疫组化染色结果相一致；PP2A叁个亚基的表达不尽相同,PP2AA和PP2AB在卵巢肿瘤组织中的表达均显着高于正常卵巢组织；PP2A B55的表达也显着高于正常卵巢组织,但在OvT-liq中该蛋白表达较低,要显着低于OvT和OvT-sol;PP2AC在卵巢肿瘤组织中的表达却均出现显着下调,特别是在OvT-liq中表达最低,显着低于OvT和OvT-sol。细胞外基质蛋白FN-1和FN-2在卵巢肿瘤组织中的表达均显着上调,在OvT-liq中的表达上调程度要显着低于OvT和OvT-sol; FN-3在卵巢肿瘤OvT和OvT-liq中的表达要低于正常卵巢组织,但无显着性差异,在OvT-sol中FN-3的表达要显着低于正常卵巢组织；FN-4在卵巢肿瘤组织中的表达与正常卵巢组织相比无显着性差异；FN-5在卵巢肿瘤OvT中的表达要显着高于正常卵巢组织,但在OvT-sol和OvT-liq中均无显着性变化。细胞骨架蛋白P-tubulin在卵巢肿瘤组织中的表达与正常卵巢组织相比虽有上升趋势,但无显着性差异；钙粘蛋白N-cadherin在卵巢肿瘤组织中的表达均显着低于正常卵巢组织；P53和PTEN在卵巢肿瘤组织中的表达均显着高于正常卵巢组织,但在OvT-liq中的表达上调程度要显着低于OvT。结论：本研究系统地对钙通道蛋白复合体PyR的调节蛋白、细胞外基质FNs家族蛋白、钙粘蛋白N-cadherin、细胞骨架蛋白β-tubulin和癌基因表达蛋白在小鼠卵巢肿瘤中的表达水平进行了研究,对后续在细胞及分子水平上进行的卵巢肿瘤相关研究具有一定实际意义。通过免疫组化、RT-PCR和Western Blot检测到在小鼠卵巢肿瘤中CAMR1和CAMR2在mRNA和蛋白水平上均有表达,可能参与了卵巢肿瘤发展过程中的调控,可能成为卵巢肿瘤早期诊断的生物标志物。PP2AA、 PP2AB、PP2AB55、FN-1、FN-2、FN-5、P53和PTEN在卵巢肿瘤中的表达上调以及PP2AC和N-cadherin的下调预示着钙可能与卵巢肿瘤的发生有关,并有可能成为潜在生物标志物应用于卵巢肿瘤的早期诊断中。因此,本研究可以为卵巢肿瘤的早期诊断与治疗方面的研究提供有价值的信息与新的途径。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
钙相关蛋白类论文参考文献
[1].王荣荣.钙相关蛋白在前列腺肿瘤中的表达研究[D].陕西师范大学.2017
[2].吕俊才.囊性卵巢癌变中钙相关蛋白的表达研究[D].陕西师范大学.2016
[3].郭羽.钙相关蛋白在不同转移表型肝癌中的表达及其与ANXA7调控的关系[D].大连医科大学.2016
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