创伤后应激障碍大鼠模型的情景恐惧记忆神经机制的研究

论文摘要

目的：以单次强烈足底电击应激来建立大鼠创伤后应激障碍（Post-traumatic stress disorder，PTSD）模型，并结合经典巴甫洛夫条件恐惧记忆检测程序，来研究PTSD动物模型的情景恐惧记忆。本研究关注：1，形成情景恐惧记忆的PTSD模型动物脑内杏仁核中胃泌素释放肽（gastrin-releasing peptide，GRP）mRNA和蛋白的改变，同时探索这种变化与恐惧记忆程度之间的相关关系，以研究GRP在恐惧记忆形成中的作用。2，地西泮对模型动物恐惧记忆水平和GRP的影响，进一步探索PTSD的发病机制中GRP与GABA（γ-aminobutyric acid，γ-氨基丁酸）系统之间是否存在相互作用及其形式，为寻求PTSD治疗新方法以及地西泮的药理机制的研究提供线索。 研究方法：雄性SD大鼠随机分为5组，每组6只。分对照组、30min组、24h组、30min+地西泮组、24h+地西泮组。首先使动物熟悉电击箱（第一天，30min），第二天进行条件恐惧训练程序，训练前30分钟予两组地西泮组以腹腔注射2mg／kg地西泮，其余三组予以注射同体积的生理盐水。条件恐惧训练总时程30分钟，采用的是一个文献所用的PTSD动物模型的电击程序，电击强度显著大于一般条件恐惧训练程序：随机给予60个不可逃避足底电击，每个持续15秒，1mA。动物总共会受到15分钟电击。对照组同样放于笼中30分钟，但电击电流0mA。电击结束30分钟后测定对照组、30min组和30min+地西泮组僵立行为，然后立即将其深度麻醉，断头处死，取双侧杏仁核样本。电击结束24小时后测定24h组和24h+地西泮组僵立行为，然后同上取双侧杏仁核样本。僵立行为测定方法：测4分钟僵立行为（僵立行为是一种普遍见于啮齿类的防御行为，表现为刻板式的蹲伏姿势，可以有一定程度的摇摆，大鼠外观除呼吸运动以外其余的肌肉运动均消失，是大鼠恐惧表达的行为方式）。每10秒测一次，记录僵立行为次数占总次数的百分比。动物取双侧杏仁核样本后，分别予以提取总RNA和蛋白，进行半定量RT-PCR和半定量Western-blot测定杏仁核中GRP mRNA和GRP蛋白的水平。 结果：1，条件恐惧训练组大鼠对恐惧情景的记忆水平明显高于对照组：与对照组相比，大鼠在经条件恐惧训练后30min或24h后再次面临恐惧情景时，表现出明显的僵立行为百分比的升高，单因素方差分析显示F=112.22，P＜0.001。组间两两比较（LSD法，以下同）显示，与对照组（6.88±4.26）相比，30min组（84.72±11.61，P＜0.001）和24h组（77.08±11.93，P＜0.001）两组僵立行为百分比明显升高。30min组和24h组之间僵立行为无明显差异。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 目录
• 论文正文
• 第一章 前言
• 第二章 材料和方法
• 第三章 结果
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 攻读学位期间主要研究成果