青钱柳多糖对高脂血症小鼠FAS基因表达影响的研究

论文摘要

青钱柳是我国特有的珍稀植物资源,具有多种生理活性功能。本研究以青钱柳叶为原料,以实验性高脂血症小鼠为研究对象,通过建立高脂血症小鼠动物模型,采用青钱柳多糖降脂动物实验,观察青钱柳多糖对小鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C、FFA、LPS含量及肝脏组织病理学改变的影响,采用PCR-RFLP技术检测脂肪酸合成酶（FAS）基因多态性,RT-PCR法检测组织中FAS mRNA表达水平,VVestern-blotting法检测FAS蛋白质表达差异。得到如下结论：（1）青钱柳多糖具有显著的降血脂效果,能极显著的降低高脂血症小鼠血清中TC、TG、LDL-C水平和LPS活力（P<0.01）,且能极显著提高血清中HDL-C水平（P<0.01）。青钱柳多糖降脂呈现一定的量效关系,以高剂量（400 mg/kg/d）最佳。（2）青钱柳多糖对高脂血症小鼠肝脏脂肪变性有一定的改善作用,能明显减少肝细胞内脂滴空泡。（3）不同FAS基因型小鼠对其血脂水平和部分器官性状的影响均有一定的差异。FAS基因不同基因型显著影响高脂血症小鼠心重、脂肪重、脂肪重/体重（P<0.05）；不同FAS基因型小鼠心重/体重差异极显著（P<0.01）。（4）青钱柳多糖能显著抑制高脂血症小鼠部分器官组织中FAS mRNA表达水平（P<0.05）。（5）青钱柳多糖能显著抑制高脂血症小鼠肝脏组织中FAS蛋白表达水平（P<0.05）。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1 高脂血症研究进展
• 1.1 高脂血症病因
• 1.2 高脂血症症状
• 1.3 高脂血症治疗
• 2 分子营养学
• 2.1 分子营养学研究进展
• 2.2 营养素与基因表达的相互调控
• 3 脂肪酸合成酶（FAS）基因研究进展
• 3.1 脂肪酸合成酶基因结构
• 3.2 脂肪酸合成酶基因生理功能
• 4 植物多糖研究进展
• 4.1 植物多糖生理活性研究进展
• 4.2 青钱柳多糖研究进展
• 第二章 青钱柳多糖对高脂血症小鼠脂代谢的影响
• 1 实验材料与仪器
• 1.1 实验动物
• 1.2 实验药物
• 1.3 主要试剂
• 1.4 主要仪器
• 2 实验方法
• 2.1 青钱柳多糖组分制备
• 2.2 动物实验
• 2.3 实验标本制备
• 2.4 观察指标及检测方法
• 2.5 统计方法
• 3 结果与分析
• 3.1 青钱柳多糖对高脂血症小鼠生长及体重变化情况影响
• 3.2 青钱柳多糖对高脂血症小鼠血脂的影响
• 4 讨论
• 5 小结
• 第三章 青钱柳多糖对高脂血症小鼠肝脏病理形态学的影响
• 1 实验材料与仪器
• 1.1 实验动物组织
• 1.2 主要试剂
• 1.3 主要仪器
• 2 实验方法
• 2.1 小鼠肝脏取材
• 2.2 固定
• 2.3 洗涤
• 2.4 脱水、透明和浸蜡
• 2.5 包埋
• 2.6 切片
• 2.7 贴片、展片与烤片
• 2.8 染色
• 2.9 封片
• 2.10 Canon数码显微系统进行拍照
• 3 结果与分析
• 3.1 肉眼观察
• 3.2 光镜结果
• 4 讨论
• 5 小结
• 第四章 脂肪酸合成酶（FAS）基因多态性与小鼠诱导性高脂血症敏感性的相关性分析
• 1 实验材料与仪器
• 1.1 实验动物组织
• 1.2 主要试剂
• 1.3 主要仪器
• 2 实验方法
• 2.1 小鼠尾组织DNA提取
• 2.2 DNA浓度和纯度检测
• 2.3 FAS基因PCR-RFLP多态性检测
• 2.4 数据统计分析
• 3 结果与分析
• 3.1 基因组DNA提取
• 3.2 FAS基因的PCR-RFLP检测
• 3.3 FAS基因的多态性分析
• 4 讨论
• 5 小结
• 第五章 青钱柳多糖对高脂血症小鼠脂肪酸合成酶（FAS）基因mRNA表达的影响
• 1 实验材料与仪器
• 1.1 实验动物组织
• 1.2 主要仪器
• 1.3 主要试剂
• 2 实验方法
• 2.1 缓冲液及主要试剂配制
• 2.2 组织总RNA提取
• 2.3 逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）
• 2.4 电泳
• 2.5 统计分析
• 3 结果与分析
• 3.1 小鼠组织总RNA提取
• 3.2 青钱柳多糖对实验性高脂血症小鼠各组织脂肪酸合成酶（FAS）mRNA表达的影响
• 4 讨论
• 5 小结
• 第六章 青钱柳多糖对高脂血症小鼠脂肪酸合成酶（FAS）基因蛋白质表达的影响
• 1 实验材料与仪器
• 1.1 实验动物组织
• 1.2 主要仪器
• 1.3 主要试剂
• 2 实验方法
• 2.1 小鼠肝脏组织,脂肪组织蛋白提取
• 2.2 考马斯亮蓝法测蛋白含量
• 2.3 蛋白样品变性
• 2.4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）
• 2.5 转移印迹
• 2.6 免疫染色
• 2.7 图像分析与统计
• 3 结果与分析
• 3.1 青钱柳多糖对实验性高脂血症小鼠肝脏组织中FAS基因蛋白质表达的影响
• 3.2 青钱柳多糖对实验性高脂血症小鼠脂肪组织中FAS基因蛋白质表达的影响
• 4 讨论
• 5 小结
• 结论
• 1 本研究初步成果
• 2 研究不足之处
• 参考文献
• 在校期间学习成果
• 致谢