论文摘要
目的:探讨植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum, LP)对阻塞性黄疸大鼠肝脏细胞凋亡,内毒素及紧密连接(TJ)蛋白表达变化的影响。方法:健康雄性wistar大鼠50只,重250-300g,随机分为五组每组各10只:对照假手术组Ⅰ;胆总管结扎组Ⅱ;胆总管结扎加LP组Ⅲ;内引流组Ⅳ;内引流加LP组Ⅴ。实验持续十天,添加LP组大鼠每日灌胃1010CFU(植物乳杆菌)。TUNEL法测肝细胞凋亡阳性率;鲎试验(基质偶氮显色法)检测大鼠血浆内毒素;扫描电镜、Western blot、RT-PCR观察TJ超微结构及相关蛋白(Occludin, Claudin-1, Claudin-4, ZO-1)的表达和分布变化。结果:大鼠胆总管结扎十天后肝功能下降,门静脉血内毒素水平升高,肝细胞凋亡增多;口服LP后状况有所缓解。内引流组内毒素浓度、肝细胞凋亡阳性率(P<0.01,ⅣvsⅠ),但内引流+LP组改善更明显(P<0.01,ⅤvsⅣ)。阻黄动物肝细胞紧密连接破坏非常明显,口服LP后紧密连接状态有所改善,内引流+LP组改善显著。阻黄+LP组TJ蛋白Western blot的表达高于阻黄组,内引流+LP组高于内引流组。阻黄+LP组TJ蛋白mRNA荧光定量PCR表达均高于阻黄组;内引流+LP组Occludin蛋白mRNA表达与内引流组无明显差别(P>0.05),Claudin-1、Claudin-4、ZO-1蛋白mRNA表达高于内引流组(P<0.05)。结论:阻黄大鼠内引流及口服LP后对受损肝脏有明显改善作用。机体内毒素含量、肝细胞凋亡阳性率下降,紧密连接蛋白及mRNA表达明显好转,有效抑制了阻黄大鼠肝屏障的损伤。
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