论文摘要
第一部分Tbx18-Cre基因敲入小鼠Cre重组酶保真性研究目的：揭示Tbx18-Cre基因敲入小鼠中Cre重组酶表达的保真性。方法：利用实时荧光定量PCR法快速检测不同基因型小鼠中Cre基因的相对拷贝数差异及Tbx18下游基因表达情况；运用JunctionPCR及基因测序验证Tbx18-Cre基因敲入小鼠中Tbx18-Cre整合位点的特异性；利用原位杂交，X-gal染色及EYFP荧光揭示Tbx18的谱系示踪及Tbx18+心外膜祖细胞的分化命运。结果：不同基因型小鼠中Cre基因的相对拷贝数表达准确，Tbx18-Cre整合位点特异，Cre重组酶特异阻断Tbx18转录表达导致其下游基因CX40及CX43表达量在Tbx18Cre-Cre基因敲入小鼠模型中明显高于野生型C57BL/6小鼠，Tbx18-Cre/Rosa26R-LacZ双杂合小鼠中LacZ蛋白表达部位在胚胎发育早中期与运用Tbx18cRNA进行原位杂交所显示的杂交信号部位一致，谱系示踪揭示Tbx18+心外膜祖细胞可以迁移并分化形成部分心肌组织。结论：Tbx18-Cre基因敲入小鼠中Cre重组酶的表达具有高度保真性及时空特异性，至今未发现Cre遗漏现象。第二部分小鼠Tbx18+心外膜祖细胞向血管平滑肌细胞分化潜能的研究目的：揭示小鼠Tbx18+心外膜祖细胞向血管平滑肌细胞分化的潜能。方法：在体外培养细胞水平及体内组织学水平利用Tbx18-Cre/Rosa26R-EYFP双杂合示踪小鼠模型对EYFP+细胞及组织进行谱系示踪，并应用血管平滑肌细胞标志物Myh11进行细胞及组织免疫荧光染色，共聚焦显微镜观察；应用Tbx18-Cre/Rosa26R-LacZ双杂合小鼠模型进行心脏组织X-gal染色后观察LacZ蛋白表达细胞及组织形态。结果：在细胞水平及组织水平EYFP+细胞及组织与Myh11共聚焦，X-gal染色阳性组织与心脏血管平滑肌结构一致。结论：Tbx18+心外膜祖细胞具有分化形成血管平滑肌细胞的潜能。
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- [3].转录因子Tbx18对升主动脉平滑肌细胞的重编程作用[J]. 中华老年心脑血管病杂志 2019(12)
- [4].Tbx18在心脏发育中的作用及其研究进展[J]. 心血管病学进展 2013(06)
- [5].TBX18腺病毒载体体外诱导乳鼠心肌细胞向起搏样细胞分化[J]. 中国心脏起搏与心电生理杂志 2016(06)
- [6].基因谱系示踪揭示小鼠Tbx18~+肾脏间质祖细胞分化为输尿管平滑肌[J]. 中国生物化学与分子生物学报 2012(12)
- [7].分别转染TBX18后乳鼠成纤维细胞对心肌细胞搏动频率的影响[J]. 华中科技大学学报(医学版) 2017(01)
- [8].成年小鼠实验性心肌梗死后胚胎基因Tbx18的表达情况[J]. 重庆医科大学学报 2013(12)
- [9].TBX18及其相关转录因子与生物起搏[J]. 中国心脏起搏与心电生理杂志 2017(01)
- [10].在体经皮微创注射TBX18构建生物起搏点[J]. 中国心脏起搏与心电生理杂志 2016(06)
- [11].Tbx18通过下调EMT信号分子参与调控心脏发育[J]. 生物化学与生物物理进展 2016(03)
- [12].Tbx18在生物起搏中的研究进展[J]. 疑难病杂志 2017(01)
- [13].Tbx18~+心外膜祖细胞参与成年小鼠部分心脏组织形成[J]. 中国生物化学与分子生物学报 2016(07)
- [14].TBX18腺病毒使成鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的研究[J]. 疑难病杂志 2019(01)
- [15].转录因子Tbx18导入人诱导多潜能干细胞分化的心肌细胞构建起搏样细胞的实验研究[J]. 心肺血管病杂志 2018(04)
- [16].转录因子TBX18对乳鼠成纤维细胞的重编程作用[J]. 疑难病杂志 2016(10)
- [17].转录因子Tbx18及Wt1在小鼠心脏发育过程中的时空表达[J]. 心脏杂志 2014(02)
- [18].谱系示踪技术揭示Tbx18~+肾祖细胞分化为脂肪细胞的潜能[J]. 中国生物化学与分子生物学报 2018(02)
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- [20].Tbx18对小鼠心脏冠状血管及室壁结构发育的影响[J]. 生物化学与生物物理进展 2015(04)
- [21].转录因子Tbx18在小鼠胚胎发育过程中的时空表达[J]. 第三军医大学学报 2012(12)
- [22].基因谱系示踪技术揭示小鼠Tbx18~+心脏祖细胞向心系细胞分化的潜能[J]. 生物化学与生物物理进展 2011(02)
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- [24].携带TBX18的慢病毒载体转染脂肪干细胞并诱导其向起搏样细胞分化的研究[J]. 中国心脏起搏与心电生理杂志 2018(02)
- [25].转录因子Tbx18、Tbx3、Shox2在生物起搏方面的研究进展[J]. 疑难病杂志 2016(04)
- [26].TBX3及TBX18在人源诱导多能干细胞向窦房结样细胞富集分化中的作用[J]. 中国修复重建外科杂志 2019(04)
- [27].ISL-1和Tbx18联合转染对乳鼠心室肌细胞重编程的作用研究[J]. 国际心血管病杂志 2018(06)