OPN和BMP15基因对小梅山猪产仔数的遗传效应研究

论文摘要

小梅山猪以其高繁殖力而闻名世界,猪的繁殖性状是一个重要的经济性状,繁殖性能的高低直接影响到养猪业的经济效益。有研究表明:OPN基因和BMP15基因是影响猪繁殖性能的候选基因。为此,本研究即以小梅山猪和大白猪作为研究对象,研究这两个基因的遗传变异情况以及对猪繁殖性能的影响,以期丰富这两个基因的研究内容,并探讨这两个基因在小梅山猪育种工作中的应用。1、本研究,根据GenBank上公布的猪OPN基因序列,设计6对引物进行PCR扩增,结果显示在P1位点上存在一个微卫星标记;利用PCR-SSCP技术检测其它5个位点,结果发现P3和P5位点上存在三个突变,分别是430T↓431G→A,473G→A;402T→G。2、利用最小二乘分析法,研究OPN基因不同多态位点对猪产仔性能的影响。结果表明:P1位点上两个品种不同基因型母猪总产仔数和产活仔数存在显著差异（P<0.05）,并呈现一定趋势DF>AD>BD;P3位点上,小梅山猪不同基因型经产母猪的总产仔数和产活仔数之间的差异达到显著水平,大白猪不同基因型二胎和经产母猪的差异也达到显著水平（P<0.05）;P5位点上,两个品种不同基因型母猪总产仔数和产活仔数差异不显著（P>0.05）。3、根据GenBank上公布的猪BMP15基因序列,设计P7和P8两对引物,利用PCR-RFLP技术检测其多态性。结果表明:P7引物扩增片段内没有检测到多态位点,P8引物的扩增片段内检测到1处突变,是猪BMP15基因外显子2第62位T→A突变,该突变能导致限制性内切酶Bcu I酶切位点发生改变,并且检测到猪BMP15基因的三种基因型BMP15AA、BMP15AB和BMP15BB。4、利用PCR-RFLP技术,对小梅山猪和大白猪的BMP15基因进行分子扫描。结果表明BMP15基因在这两个品种间基因频率和基因型频率存在显著差异,与国内外研究结果相一致。5、利用最小二乘分析法,研究了猪BMP15基因对猪产仔性能的影响,结果表明两个品种不同基因型母猪的总产仔数和产活仔数存在显著差异,并有AA>AB>BB的趋势。综合考虑,认为A基因为提高产仔数的有利基因,AA基因型为有利基因型。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一章 文献综述
• 1 梅山猪高产性能分子遗传机制的研究进展
• 1.1 影响猪繁殖力主效基因存在假设的提出
• 1.2 猪繁殖力主效基因
• 1.3 候选基因
• 2 OPN 基因的研究进展
• 2.1 OPN 和猪OPN 基因的特性
• 2.2 OPN 基因的表达及调控
• 2.3 OPN 的生物学功能
• 2.4 OPN 基因对猪繁殖性能的影响
• 3 BMP15基因的研究进展
• 3.1 BMP 的结构
• 3.2 BMP15 基因研究现状
• 第二章 材料与方法
• 1 材料
• 2 仪器与试剂
• 2.1 主要仪器设备
• 2.2 主要药品
• 2.3 PCR 相关试剂、内切酶、Marker
• 3 溶液的配制
• 4 猪耳组织 DNA 的提取
• 5 DNA 样品浓度和纯度的计算
• 6 DNA 样品的稀释
• 7 PCR 扩增反应条件
• 7.1 OPN 基因的PCR 扩增
• 7.2 BMP15 基因的PCR 扩增
• 8 限制性酶切反应体系
• 9 聚丙烯酰胺凝胶的制备
• 10 银染显带
• 11 数据处理及分析方法
• 11.1 基因频率及基因型频率的计算
• 11.2 遗传多态性分析
• 11.3 加性效应和显性效应
• 11.4 统计软件
• 第三章 结果与分析
• 1 OPN 基因
• 1.1 PCR 扩增
• 1.2 微卫星标记分析
• 1.3 PCR-SSCP 分析
• 1.4 不同位点序列及同源性比较结果
• 1.5 不同位点的群体遗传学分析
• 1.6 猪OPN基因不同基因型对猪产仔数的相关性分析
• 2 BMP15基因
• 2.1 PCR 扩增结果
• 2.2 PCR-RFLP 分析
• 2.3 BMP15 位点基因频率和基因型频率
• 2.4 猪 BMP15 基因不同基因型对猪产仔数的相关性分析
• 第四章 讨论
• 1 猪 OPN 基因不同多态位点的群体遗传学特征
• 1.1 不同位点等位基因的分布
• 1.2 群体遗传多样性分析
• 2 猪 OPN 基因不同多态位点对产仔性能的影响
• 2.1 P1 位点对猪产仔性能的影响
• 2.2 P3 位点对猪产仔性能的影响
• 2.3 P5 位点对猪产仔性能的影响
• 3 猪 BMP15 基因的群体遗传学特征
• 4 猪 BMP15 基因多态性对产仔性能的影响
• 第五章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文目录