小鼠卵母细胞皮质颗粒行为和减数分裂调控的研究

论文摘要

胚胎工程技术研究和开发需要大量高质量的成熟卵母细胞,但利用卵巢卵母细胞经体外培养而获取的成熟卵母细胞质量远不如体内成熟卵母细胞,其原因一般认为是胞质成熟不充分。具有较好发育潜力的体内成熟卵母细胞的可识别特征仍然不是很清楚。近年来,卵母细胞成熟过程中皮质颗粒(CGs)迁移和分布的变化作为胞质成熟的判定指标为越来越多的研究者接受。另一方面,深入了解卵母细胞成熟机理则是改善体外培养条件,提高体外成熟卵母细胞质量的重要途径。因此,本文以小鼠卵母细胞为实验材料,比较了在不同条件下成熟的卵母细胞核进程和皮质颗粒分布的变化,人工激活或受精后皮质颗粒胞吐能力,以及激活后的胚胎发育能力;研究了亚胺环己酮(CHX)与促性腺激素联合使用对卵母细胞减数分裂恢复调节的作用机制。结果表明: 1.体内和体外成熟卵母细胞之间核成熟的计时不同,在WF培养液中比在MB或MF培养液中培养的卵母细胞在减数分裂进程上更接近体内成熟卵母细胞。 2.卵母细胞成熟期间皮质颗粒分布分为6个阶段。虽然卵母细胞在体内和体外成熟期间CGs分布经历了相同的变化,但是体外成熟卵母细胞变化的发展速度比体内成熟卵母细胞更慢。四个处理中CGs重新分布的发展速度的排列顺序如下:体内>WF>MF>MB。 3.减数分裂进程和皮质颗粒重新分布计时之间关系的分析表明(a)体内和体外成熟期间,GV期持续的时间比CGs分布的阶段工持续的时间长大约1h。(b)体内和体外成熟期间MI期比无皮质颗粒区(CGFD)形成(阶段Ⅲ)开始的时间早1h。(c)体外成熟期间大多数事件持续的时间明显比体内成熟期间长,由此引起体外成熟期间核进程和CGs重新分布普遍缓慢。然而,体外成熟卵母细胞第一次CGFD(阶段Ⅳ)持续的时间显著短于体内成熟卵母细胞。 4.虽然CGs迁移到皮质不依赖GVBD,但是阻止GVBD延迟CGs迁移和阻止CGFD的形成。CHX促进GVBD和CGs迁移,但是它抑制CGFD形成。 5.根据卵母细胞对激活后反应的不同,将CGs胞吐能力分为3种类型:无CGs胞吐(NCE),部分CGs胞吐(PCE)和完全CGs胞吐(FCE)。

论文目录

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• 1. 引言
• 1.1 皮质颗粒行为的研究进展
• 1.2 CHX与促性腺激素对卵母细胞减数分裂的调控
• 2. 材料和方法
• 3. 结果
• 3.1 皮质颗粒行为的研究
• 3.2 CHX与PMSG对卵母细胞减数分裂的调控
• 4. 讨论
• 4.1 皮质颗粒行为的研究
• 4.2 CHX与PMSG对卵母细胞减数分裂的调控
• 5. 结论
• 6. 参考文献
• 附录: 图版及图版说明
• 致谢
• 作者简介与发表文章