论文摘要
目的：探讨强化β-磷酸三钙/富血小板血浆凝胶复合材料作为骨组织支架材料的制备方法、力学性能、毒性及其生物相容性。方法：1．制备普通β-磷酸三钙和强化β-磷酸三钙材料。2．两部离心法制备犬富血小板血浆PRP，制备强化β-磷酸三钙/富血小板血浆凝胶复合材料。3．强化β-TCP/PRP凝胶复合材料力学性能的测定。4．分离，纯化与扩增犬骨髓间充质干细胞BMSCs作为种子细胞，复合强化β-TCP/PRP凝胶复合材料。5．测定强化β-TCP/PRP凝胶复合材料细胞毒性与种子细胞粘附率。6．扫描电镜观察种子细胞接种于复合材料上的生长情况及强化β-TCP/PRP凝胶复合材料的孔径。结果：1．比格犬后肢静脉血人工计数血小板结果：全血中血小板为143．3±31．9×109/L，制备PRP后测血小板为1239．3±124．0×109/L。其浓度约为全血的8．6倍。2．强化β-TCP/PRP凝胶复合材料最大载荷为945．64±86．38N，抗压强度为13．06±0．47MPa；普通β-磷酸三钙最大载荷为110．11±14．26N，抗压强度为1．61±0．23MPa；复合材料的抗压强度与普通材料有明显统计学差异P<0．01。3．犬BMSCs接种强化β-TCP/PRP凝胶复合材料，4h细胞黏附率为50±2％，8h细胞黏附率为80±1％，12h细胞黏附率为92±2％，24h细胞黏附率达96±1％。4．强化β-TCP/PRP凝胶复合材料的细胞毒性测定结果：2d，4d，8d时间点的细胞相对增殖度RGR均大于1．0，毒性评级均为0级。5．电镜下强化β-磷酸三钙材料表面为颗粒状外观，疏松多孔，且孔隙间相互沟通，孔隙孔径大小分布为100μm-400μm不等，平均孔径为314．24±156．17μm，微孔大小为1-10μm，深度不一；PRP均匀分布在强化β-磷酸三钙材料表面及孔隙中。在犬BMSCs接种于复合材料2周后，大量细胞附着在材料的孔隙周围，细胞伸出突起，彼此相连，覆盖孔隙，并爬行生长，可见其分泌的细胞外基质。经诱导后犬BMSCs生长更为旺盛。结论：1．强化β-TCP/PRP凝胶复合材料的力学性能达到，并略微超过普通松质骨的强度。2．强化β-TCP/PRP凝胶复合材料具有无毒，生物相容性良好，细胞在材料上生长良好。该材料是一种理想的骨组织工程支架材料。
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