HBV基因型、变异、X蛋白与HCC相关性的研究

论文摘要

目的：了解乙肝病毒基因型、变异位点1762/1764和1896、X蛋白与肝细胞癌的关系,进一步探讨肝癌的发病机理,为肝癌的防治及早期诊断提供理论依据。方法：采用核酸扩增荧光定量及测序法检测正常人、慢性HBV携带者、慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化和乙肝合并肝癌患者共80例血清标本的病毒基因型及变异,在自动基因分析仪上进行测序,用定量法及Chromas程序对结果进行判断;采用荧光定量-聚合酶链反应（FQ-PCR）法检测HBV DNA定量；采用免疫组织化学方法检测上述5组肝组织中X蛋白的表达情况,用半定量积分法进行结果判断；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HBV血清抗原抗体标志物。所有的数据均采用SPSS17.0统计软件包对检测数据进行统计学处理。结果：1、在78例慢性HBV感染者中基因型B型为31例,占39.7%（31/78）,基因型C型为47例,占60.3%（47/78）,本研究未发现A、D、E、F、G、H型。提示云南地区HBV基因型以C型为主。基因C型在ASC、CHB、LC、HCC四组中所占比例分别为42.9%（6/14）,50.0%（15/30）,64.3%（9/14）,85.0%（17/20）,差异有统计学意义（x2=8.29,p=0.04）。在LC组和HCC组,C基因型比例占绝大多数,但两者基因型分布差异无统讣学意义（p=0.161）,将二者合并（26/34）与CHB组、ASC组合并（21/44）相比较,差异有统计学意义（x2=6.62,p=0.01）提示LC、HCC两组中C基因型所占比例高于CHB、ASC两组。2、在78例慢性HBV感染者中,共有50例发生BCP变异,44例发生PC变异。在ASC、CHB、LC、HCC四组中,基因C型HBV感染者发生BCP变异的病例数所占比例分别为21.4%（3/14）,43.3%（13/30）,50.0%（7/14）,80.0%（16/20）,发生PC变异的病例数所占比例分别为14.3%（2/14）,40.0%（12/30）,57.1%（8/14）,75.0%（15/20）,两种变异均多于基因B型感染者,且除ASC组外,差异均有统计学意义（p<0.05）。3、X蛋白的表达,以LC组最高（阳性率71.4%）,其次是HCC组（70.0%）、CHB组（60.0%）、ASC组（50.0%）,组间比较差异有统计学意义（p<0.05）。将LC、HCC组相加（70.6%）与ASC、CHB组相加（56.8%）后比较发现,X蛋白在二者中的表达差异有统计学意义（p<0.05）,且X蛋白在LC组、HCC组病例中强阳性表达多于CHB组和ASC组。4、ASC组、CHB组和HCC组基因C型HBV感染者X蛋白的阳性表达率分别为35.7%（5/14）,40.0%（12/30）,70.0%（14/20）,大于基因B型感染者X蛋白的阳性表达率,即14.3%（2/14）,20.0%（6/30）,0%（0/20）,差异有统计学意义（p<0.05）。ASC、CHB、LC和HCC组中X蛋白阳性表达的HBV感染者BCP变异阳性的比例分别为71.4%,72.2%,70.0%,85.7%,PC变异阳性的比例分别为57.1%,66.7%,80.0%,57.1%,均高于BCP、PC变异阴性感染者所占比例。结论：1、云南地区慢性HBV感染者（包括慢性乙肝病毒携带者、慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化和乙肝合并肝癌）基因型有B型和C型,以C型为主,奉研究未发现其它基因型。慢性HBV感染者基因型与临床疾病谱有关,C基因型与较为严重的疾病（乙肝肝硬化和乙肝合并肝癌）有关。2、各组中基因C型的BCP、PC变异多于基因B型。3、X蛋白的表达,以LC组最高,其次是HCC组、CHB组和ASC组。而且LC、HCC两组X蛋白强阳性表达的病例数明显多于CHB、ASC两组。4、各组中,基因C型的X表达阳性率明显大于基因B型,而且X蛋白表达阳性的慢性HBV感染者发生BCP、PC变异明显。X蛋白的表达,可能与C基因型、BCP以及PC变异有相关性。5、HBV基因C型、BCP和PC变异、X蛋白与HCC的发生发展有关系,但三者在HCC发生发展过程中是否有协同关系,是否与疾病进展有关,及促进HCC的发生的具体机制,尚待扩大病例数和研究范围进一步研究。

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