论文摘要
在我国原发性肝癌是常见的恶性肿瘤之一,原发性肝癌临床治疗效果较差,肿瘤的复发和转移是原发性肝癌的主要死亡原因。c-met参与调节多种肿瘤细胞的增殖和凋亡,是恶性肿瘤靶向治疗的靶点之一。研究表明c-met在原发性肝癌的发生发展中具有重要作用,但目前针对c-met基因的肝癌靶向治疗研究尚不多见。 肿瘤发生发展是一个复杂的连续过程。细胞从正常转变为恶性的过程,其关键是基因的变化。细胞的增殖在正常情况下受到许多信息的调控,不正常的增殖由调控失去平衡引起。癌基因的表达产物产物对细胞的增殖起正调节作用,当它们发生结构改变或过度表达时,促生长作用过强,会引起细胞的过度增生或癌变。 c-met基因位于人类第7号染色体长臂（7q31）,其大小约超过110kb,包含21个外显子。c-met编码的蛋白产物就是肝细胞生长因子的受体。成熟的受体蛋白位于细胞膜上,由50kD的α亚基和145kD的β亚基以二硫键相连形成190kD的异二聚体。HGF激活c—Met受体发生自体磷酸化,其酪氨酸激酶活性增强,导致多种底物蛋白的酪氨酸磷酸化。许多研究表明c-met在肝癌组织中表达与正常肝组织相比有明显增加,且与肝癌分化程度、肝内外转移及术后存活时间相关,肝癌患者c—Met受体高表达组较c—Met受体低表达组肝内外转移率显著升高,存活时间缩短。 RNAi是双链RNA介导的遗传干扰现象,它能够特异、有效地降解mRNA,从而引起转录后水平的基因沉默。近来研究表明,21-23nt的小干扰RNA（small interference RNA,siRNA）可介导哺乳动物细胞特异性基因沉默。RNAi具有高效性和高度特异性,可能成为关闭基因的新技术而在基因功能研究和疾病基因治疗中发挥重要作用。大量的研究结果证实,siRNA可以有效的抑制所有内源性基因的mRNA从而达到去除该基因的功能,它的最大抑制浓度往往只有几十个nmol。现在siRNA已经成为knockdown特定基因在哺乳动物细胞系中表达的强大工具。目前常用的抑制特定基因表达的方法主要
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