安络小皮伞菌丝体多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及化学结构研究

安络小皮伞菌丝体多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及化学结构研究

论文摘要

目的:本实验以α-葡萄糖苷酶抑制作用为药效学指标,对安络小皮伞糖蛋白进行了筛选、分离、纯化、理化性质和化学结构的研究,试图发现安络小皮伞新的活性和该活性的有效成分。方法:采用水提醇沉的方法从安络小皮伞菌丝体发酵物中提取多糖类成分MAEP,并对提取物采用分子量3000中空纤维超滤器、弱碱性阴离子交换剂DEAE sephadex A-50、琼脂糖凝胶Sepharose CL-6B、葡聚糖凝胶Sephadex G-100等方法进一步分离纯化,对分离出的各个部位群采用紫外分光光度法测定理化性质、高效液相色谱法测定平均分子量、气相色谱法分析单糖组成,同时对分离纯化过程中的各部位进行α-葡萄糖苷酶抑制作用实验,追踪其生物活性部位,并对分离出的一个活性多糖部位群(MAEP-2b-2a)进行结构研究。结果:MAEP-2b-2a是以(1→2,1→6)连接的Man为主链;(1→2)连接的Man在其4位上有分枝点,(1→6)连接的Man在其2位上有分枝点;在这些分枝点上,连接着由半乳糖(Gal)和葡萄糖(Glu)为主组成的侧链;MAEP-2b-2a的非还原末端是由Gal、Man、Glu组成。结论:随着对多糖部分的逐步分离纯化,活性部位逐步集中,总糖和蛋白含量逐步升高,综合推断安络小皮伞菌丝体发酵物的糖蛋白类物质可能是抑制α-葡萄糖苷酶活性的有效组分。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 英文缩略语
  • 前言
  • 文献综述
  • 1 植物多糖的研究进展
  • 2 真菌多糖的研究进展
  • 3 安络小皮伞的研究进展
  • 实验研究
  • 第一章 安络小皮伞菌丝体多糖的提取、分离
  • 材料与方法
  • 1 试剂与仪器
  • 2 实验方法
  • 结果
  • 讨论
  • 第二章 MAEP-2 的分离、纯化及对α-葡萄糖苷酶的抑制作用
  • 第一节 DEAE-Sephadex A-50 离子交换柱分离纯化MAEP-2
  • 材料与方法
  • 1 试剂与仪器
  • 2 实验方法
  • 结果
  • 讨论
  • 第二节 Sepharose CL-6B 分离纯化MAEP-2b
  • 材料与方法
  • 1 试剂与仪器
  • 2 实验方法
  • 结果
  • 讨论
  • 第三节 Sephadex G-100 分离纯化MAEP-2b-2
  • 材料与方法
  • 1 试剂与仪器
  • 2 实验方法
  • 结果
  • 讨论
  • 第三章 MAEP-2b-2a 的理化性质与结构分析
  • 第一节 PMP 柱前衍生化HPLC 法分析MAEP-2b-2a 的单糖组成
  • 材料与方法
  • 1 试剂与仪器
  • 2 实验方法
  • 结果
  • 讨论
  • 第二节 MAEP-2b-2a 的糖苷键连接方式研究-甲基化分析
  • 材料与方法
  • 1 试剂与仪器
  • 2 实验方法
  • 结果
  • 讨论
  • 讨论
  • 结语
  • 致谢
  • 参考文献
  • 附图
  • 相关论文文献

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