基于纳米金/硫堇修饰金电极的ABA安培免疫传感器的研制

论文摘要

脱落酸是一种非常重要的植物激素,关于它的传统测定方法有很多种,包括高效液相色谱法、气相色谱法、气质联用法、液质联用法、酶联免疫吸附法、放射免疫测定法等等。而电化学免疫传感器由于它简单的操作步骤、快速的分析速度、廉价、精简、高灵敏的电流测定法而得到了高度重视,并被运用于植物激素的分析。此外,纳米金由于它内在强有力的吸附特性和生物相溶性而被成功的运用于电化学免疫测定和DNA含量测定。本研究工作运用纳米金的这些特性,结合硫堇—H2O2—HRP催化波体系,制备了一种高灵敏、高稳定性的,方便、简单的ABA安培免疫传感器。我们对其优化条件进行了摸索、制备了标准曲线、用此方法对实样进行了测定并与传统高效液相色谱法进行了比较。论文主要内容如下:（1）介绍了本传感器的制备步骤和原理,证实了本传感器的可行性和电化学表征。（2）从混合物中硫堇与酶标抗体的比例、混合物培育时间、底液pH值、底液中H2O2的浓度等几个影响此新型传感器性能的重要方面进行了摸索,获得了此新型传感器的最优化实验条件。研究表明,1h为混合物最佳混合物培育时间,混合物中硫堇的含量为75%最适合混合物的吸附固定,底液最适合pH值为7.0,底液最适H2O2浓度为1.2mol·L-1。（3）在最适条件下获得此基于纳米金/硫堇修饰金电极的安培免疫传感器测定ABA的标准曲线。随着温育液中ABA含量的增加,免疫传感器的安培响应降低。降低百分率与ABA在0.5～1000ng/mL浓度范围内成线性关系。回归方程为y=0.0209x+17.071,相关系数为0.9922,检测限为0.2ng·mL-1。（4）在最适条件下采用此安培免疫传感器对棉花叶片中ABA含量进行了测定,并与高效液相色谱法（HPLC）相比较,结果证明运用此安培免疫传感器测定植物样品中ABA含量的准确性和可行性。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1 植物激素概论
• 1.1 植物激素及其测定方法的重要性
• 1.2 国内外研究现状及分析
• 1.3 传统植物激素测定方法的局限性
• 2 生物传感器
• 2.1 生物传感器基本工作原理
• 2.2 生物传感器的分类
• 3 电化学免疫传感器
• 3.1 免疫分析定量方法
• 3.1.1 标记法
• 3.1.2 非标记法
• 3.2 电位型免疫传感器
• 3.3 电导型免疫传感器
• 3.4 电流型免疫传感器
• 3.4.1 非酶标记电流型免疫传感器
• 3.4.2 酶标记电流型免疫传感器
• 3.4.3 电流型免疫传感器的应用
• 4 纳米材料在生物传感器中的应用
• 4.1 纳米技术
• 4.2 纳米粒子固定技术
• 4.3 用纳米修饰层的催化作用构建化学/生物传感器
• 4.4 构建纳米活性界面用于固定生物材料
• 5 本论文的主要研究内容与意义
• 第二章 ABA安培免疫传感器的可行性和电化学表征研究
• 1 引言
• 2 材料与方法
• 2.1 试剂与仪器
• 2.2 酶标抗体制备
• 2.3 实验方法
• 3 结果与分析
• 3.1 传感器的可行性
• 3.2 传感器的电化学表征
• 4 小结
• 第三章 ABA安培免疫传感器的最适条件研究
• 1 引言
• 2 材料与方法
• 2.1 试剂与仪器
• 2.2 酶标抗体制备
• 2.3 传感器制备
• 3 结果与分析
• 3.1 混合物培育时间对传感器的影响
• 3.2 混合物中硫堇与酶标抗体的比例对传感器的影响
• 3.3 底液pH值对传感器的影响
• 2O₂浓度对传感器的影响'>3.4 底液中H₂O₂浓度对传感器的影响
• 4 小结
• 第四章 标准曲线的制备和植物样品材料分析
• 1 引言
• 2 材料与方法
• 2.1 试剂与仪器
• 2.2 酶标抗体制备
• 2.3 标准曲线制备过程
• 2.4 植物材料样品制备
• 3 结果与分析
• 3.1 标准曲线制备
• 3.2 植物样品材料分析
• 3.3 安培免疫传感器的重现性和稳定性
• 4 小结
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简历