姜黄素对大鼠急性肺损伤中MMP-9表达的影响

论文摘要

目的:观察姜黄素对脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤中MMP-9表达的影响,探讨姜黄素治疗急性肺损伤的分子生物学机制,为姜黄素的临床应用提供理论依据。方法:1.采取随机对照研究,以90只SD雄性大鼠为研究对象,用脂多糖腹腔注射制备急性肺损伤模型。2.实验分为五组,分别为A组:正常对照组（NS组）;B组:溶媒组（DMSO组）;C组:模型组（LPS组）;D组:姜黄素低剂量处理组（LPS+CMN100mg/kg组）;E组:姜黄素高剂量处理组（LPS+CMN200mg/kg组）。每组18只,每组再分为3个时间点亚组:即2h、6h、12h亚组,每个亚组6只（n=6）。3.A组大鼠都给予3ml/kg生理盐水腹腔注射;B组先注射1ml/kgDMSO后再注入2ml/kg生理盐水;C组腹腔注射LPS（5mg/kg）;D组先注射LPS,30min后腹腔注射100mg/kg CMN;E组先注射LPS,30min后腹腔注射200mg/kg CMN。以LPS注射时间点为0h,每组取2h、6h、12h共3个观察时间点,在给药后相应时间点观察各组动物的一般情况,然后处死各组动物,取肺组织进行HE染色,抽取腹主动脉血检测PaO2及PaO2/FiO2,光镜下观察肺组织形态学变化并测定肺湿/干重比评估肺水肿情况,免疫组化和RT-PCR分别测定MMP-9蛋白及mRNA的表达,观察姜黄素对脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤中MMP-9表达的影响。4.统计方法:实验数据使用SPSS 13.0统计软件进行统计学处理,计量资料以均数±标准差（x±S）的形式表示,各组之间比较用单因素方差分析（One way ANOVA）,方差齐时两组之间比较采用S-N-K检验,方差不齐者用Games-Howell检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.急性肺损伤动物模型制备成功。模型组大鼠一般情况差,被毛松散蓬乱,两眼无神,活动迟钝,进食量少,喜扎堆,唇及爪紫绀,并且出现呼吸困难。肺组织大体观察表现为颜色暗红,体积增大,表面散在有大小不一的红色斑点,切面疏松,有淡红色液体溢出,肺水肿。光镜下可见肺泡壁毛细血管扩张、充血,气管及血管周围有不同程度的水肿,肺内可见小灶状炎性细胞浸润,以中性粒细胞浸润为主。2.W/D比较:与A组比较,C组W/D在2h、6h、12h逐渐增高,差异具有统计学意义（P<0.05）。与C组比较,D组和E组在6h和12h均明显下降,差异有统计学意义（P<0.05）。且E组在6h下降更明显,与D组相比差异有统计学意义（P<0.05）。3.PaO2和PaO2/FiO2的变化:与A组比较,C、D、E三组各时间点PaO2、PaO2/FiO2明显下降,差异有统计学意义（P<0.05）。D、E组PaO2、PaO2/FiO2在6h及12h时间点较C组明显上升,且以E组6h上升更明显（P<0.05）。4.免疫组织化学检查:光镜下可见C组大鼠MMP-9主要位于中性粒细胞,单核巨噬细胞,淋巴细胞等炎性细胞胞浆及周围基质。与同时间A组比较,C组各个时间点MMP-9的表达明显升高（P<0.05）。与同时间C组比较D、E两组6h、12h下降明显（P<0.05）。并且E组6hMMP-9下降与D组比较具有统计学意义（P<0.05）。5.RT-PCR结果比较:A组和B组MMP-9mRNA呈现弱表达,两组间比较无统计学意义（P>0.05）。C组MMP-9mRNA表达随时间延长逐渐增高,在各个时间点与A组比较有统计学意义（P<0.05）。D组和E组MMP-9mRNA在6h和12h表达与同时间C组比较有所下降并具有统计学意义（P<0.05）。E组6hMMP-9mRNA下降与D组比较具有统计学意义（P<0.05）。结论:1.MMP-9在内毒素性急性肺损伤时高表达,提示其在急性肺损伤中有重要作用。2.姜黄素能减轻肺组织炎症反应,对脂多糖诱导的急性肺损伤有保护作用,其作用机制可能与下调MMP-9的蛋白及mRNA表达有关。

论文目录

• 主要缩略语英文索引
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 引言
• 材料与方法
• 实验结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 参考文献
• 研究生期间撰写论文
• 致谢