论文摘要
研究背景与目的：系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）是典型的非器官特异性自身免疫性疾病，而其发病机制仍不明确。目前认为其发病是遗传因素与环境因素共同作用的结果，具体表现为患者机体的免疫平衡紊乱，自身抗原的暴露以及T细胞功能亢进的恶性循环共同促使B细胞的过度活化而分泌大量针对自身组织的自身抗体。自身抗体与自身免疫反应所形成的免疫病理损伤是SLE患者疾病发生与发展的重要因素。而T细胞的共刺激活化作用和抑制效应的平衡紊乱是SLE患者机体免疫功能异常的核心。Caspase-8分子介导的信号效应同时参与淋巴细胞的凋亡与活化，对机体免疫平衡的调节具有双刃剑作用；而Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞是机体外周免疫平衡维持的主要细胞，同时T细胞表面表达的GITR分子信号不仅可以共刺激活化效应淋巴细胞，而且可以拮抗Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞的抑制活性，他们的共同作用对机体外周免疫稳态的调节具有重要意义。而对这些人体外周免疫平衡相关细胞、分子的深入研究有助于阐述SLE的致病机理以及为SLE的治疗提供新的生物治疗靶点。材料与方法：分析40例SLE患者（其中活动期23例，非活动期17例），19例健康志愿者外周血中免疫稳态调节相关分子表达，采用单克隆抗体技术结合流式细胞术检测SLE患者和健康对照组外周血中T淋巴细胞亚群表面分子CD69、GITR的表达水平，以及T细胞亚群胞内活化Caspase-8的活化状态，同时分析了患者及健康对照外周血中Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞的表达。应用SPSS13.0统计软件分析数据，用（?）±s或中位数，四分位数间距描述结果，采用Shapiro-wilk进行数据的正态性检验，符合正态分布的数据采用t检验或方差分析，不符合正态分布的采用Kruskal-Wallis H检验进行多组间比较，Nemenyi法进行组间两两比较。结果：①T淋巴细胞亚群分析显示：与健康对照组相比，SLE患者组外周血中CD3+T淋巴细胞和CD3+CD4+T细胞的表达无统计学差异（P＞0．05），但是SLE患者组CD3+CD8+T淋巴细胞数明显增加（P＜0.05）。不同疾病活动状态的SLE患者其T细胞亚群表达比较无统计学差异（P＞0.05）。②T淋巴细胞亚群胞内Caspase-8分子活化状态分析显示：无论稳定期或活动期SLE患者，其CD3+CD4+T细胞和CD3+CD8+T细胞中活化Caspase-8的表达与健康对照组比较均显著升高（P＜0.05），且稳定期和活动期SLE患者CD3+CD8+T细胞中活化Caspase-8的表达高于其在CD3+CD4+T细胞中的表达（P＜0.05）。③T淋巴细胞表面的活化标志CD69分子表达分析显示：与健康对照组比较，SLE患者CD3+CD8+T细胞上CD69表达显著升高（P＜0.05），但是CD69在CD3+CD4+T细胞上的表达与健康对照相比无显著性差异（P＞0.05）。同时稳定期SLE患者CD3+CD8+T细胞上CD69表达率高于其在活动期SLE患者中的表达，但是差异无统计学意义（P＞0.05）。④外周血中Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞表达分析显示：稳定期及活动期SLE患者外周血中Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞表达比例显著低于健康对照（P＜0.05），且活动期SLE患者Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞比例高于稳定期SLE患者（P＞0.05）。⑤CD4+CD25+T细胞的表达分析显示：SLE患者外周血中的CD4+CD25+T细胞表达略微高于健康对照组，差异无统计学意义（P＞0.05）。⑥T细胞亚群表面共刺激活化分子GITR表达分析显示：SLE患者外周血中CD3+CD4+T和CD3+CD8+T细胞上GITR表达均显著高于健康对照组（P＜0.05）；随着疾病活动性增加，CD3+CD4+T细胞上GITR表达降低（P＞0.05），CD3+CD8+T细胞上GITR表达增加（P＞0.05）。结论：①SLE患者以CD3+CD8+T细胞异常增加的T淋巴细胞亚群紊乱为特征，而且CD3+CD8+T细胞上T细胞活化标志CD69的表达显著增加，提示SLE患者外周血中CD3+CD8+T细胞处于高度的活化状态，而且其可能在SLE的致病中具有重要作用。②SLE患者CD3+CD4+T细胞以及CD3+CD8+T细胞胞内活化caspase-8的表达均显著增高，且活化caspase-8分子在CD3+CD8+T细胞中的表达高于其在CD3+CD4+T细胞中的表达。高度活化的caspase-8分子在CD3+CD4+T细胞中可能主要发挥促凋亡效应；而对CD3+CD8+T细胞，活化caspase-8分子可能主要发挥其免疫活化作用，诱导CD3+CD8+T细胞的活化以及高表达。③SLE患者T细胞亚群上高表达的GITR分子通过其共刺激活化作用促使CD3+CD8+T细胞的活化与存活以及T细胞亚群表达的紊乱。④SLE患者外周血中Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞表达降低，由其介导的免疫抑制效应不足而促使效应淋巴细胞的过度活化以及CD3+CD8+T细胞的表达增加。而SLE患者外周血中Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞表达的降低可能是通过CD3+CD4+T细胞表面高表达的GITR分子所介导。由过度活化的caspase-8分子以及高表达的GITR分子所介导的免疫上调作用的增强，以及由Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞所介导的免疫抑制作用的不足，他们共同作用促使SLE患者外周血T细胞亚群表达紊乱以及外周免疫的失衡。