EPO对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及IL-1β和ICAM-1表达的影响

论文摘要

目的:探讨促红细胞生成素（Erythropoietin ,EPO）对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后的保护作用及对脑内白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）和细胞间黏附分子-1（ intercellular adhesion molecule-1 ,ICAM-1）表达的影响。方法:72只健康成年雄性SD大鼠随机分为4组:正常对照组（正常组）、假手术组、模型对照组（模型组）、EPO处理组（EPO组）,各组18只,分设3个时间点的亚组,每个亚组6只。采用Longa线栓法[1]制备大鼠脑缺血-再灌注模型, EPO组在缺血同时予以腹腔注射EPO 3000u/kg,模型组和假手术组在插线后即刻予腹腔注射等量生理盐水,模型组和EPO组在缺血2h后、假手术组在手术后2h拔线实行再灌注,分别再灌注6h、24h、48h后采用Longa评分法行神经功能评分,随之处死取脑,正常组在相应时间点评分后,不手术直接处死取脑。脑组织石蜡包埋切片后,行HE染色、Nissl染色以及IL-1β和ICAM-1免疫组化染色,光镜观察组织学变化以及计算缺血侧大脑皮层IL-1β,ICAM-1阳性反应细胞。实验数据采用SPSS 13.0统计软件进行多个样本均数比较的配伍设计双因素方差分析,以P<0.05为显著性检验水准。结果:1神经功能缺损评分:正常组和假手术组均为0分,在6h、24h、48h三个时间点EPO组评分分别为1.67±0.52分、1.83±0.41分、1.50±0.55分,模型组分别为2.17±0.75分、2.50±0.55分、2.67±0.52分, EPO组神经功能缺损评分明显轻于模型组,二者比较有显著性差异（P<0.001）;但各时间点之间的评分无显著性差异（P>0.05）。2 HE染色:正常组和假手术组皮层神经细胞形态正常,数量多,排列整齐。模型组皮层神经细胞稀疏,细胞间隙增大,并可见大量细胞变性坏死,表现为胞体皱缩,核固缩深染,核仁消失;而EPO组神经细胞存活数量增多,损伤程度减轻。3 Nissl染色:正常组及假手术组皮层神经细胞膜呈蓝紫色,胞核呈饱满的淡蓝色,可见很多紫蓝色的尼氏小体,细胞排列整齐;模型组尼氏小体溶解消失或很少;EPO组与模型组相比尼氏小体增多。4脑组织中IL-1β的表达:各处理组之间的IL-1β阳性细胞表达比较:正常组与假手术组比无统计学差异,模型组、EPO组分别与正常组比P<0.001,模型组、EPO组分别与假手术组比P<0.001,模型组与EPO组比P<0.001,皆有显著性差异;模型组的IL-1β阳性细胞表达最高, EPO组下降,正常组与假手术组仅见少数阳性细胞表达。各时间点之间的IL-1β阳性细胞的表达比较:24h与6h比较及48h与24h比较P<0.001,皆有显著性差异,但48h与6h比较P>0.05,无统计学差异。模型组与EPO组的IL-1β阳性细胞表达在6h升高,24h达到高峰,48h下降。5脑组织中ICAM-1的表达:各处理组之间的ICAM-1阳性细胞表达比较:正常组与假手术组比无统计学差异,模型组、EPO组与正常组比P<0.001,模型组、EPO组分别与假手术组比P<0.001,模型组分别与EPO组比P<0.001,皆有显著性差异;模型组的ICAM-1阳性细胞表达最高, EPO组下降,正常组与假手术组仅见少数阳性细胞表达。各时间点之间的ICAM-1阳性细胞的表达比较:24h与6h比较及48h与24h比较P<0.001,皆有显著性差异,但48h与6h比较P>0.05,无统计学差异。模型组与EPO组的ICAM-1阳性细胞表达在6h升高,24h达到高峰,48h下降。6 IL -1β与ICAM-1的相关性:经直线相关分析表明,模型组大鼠IL-1β阳性细胞数表达与ICAM-1阳性细胞数表达呈显著正相关（r=0.936,P<0.001）,EPO组大鼠IL-1β阳性细胞数表达与ICAM-1阳性细胞数表达呈显著正相关（r=0.945,P<0.001）。结论:1在脑缺血再灌注损伤模型大鼠中,EPO处理可抑制缺血侧皮层的神经细胞变性坏死、减轻脑再灌注损伤所造成的功能障碍。2 EPO处理可抑制脑缺血再灌注损伤模型大鼠不同时期脑内IL-1β和ICAM-1的表达,提示EPO参与了炎症反应。3 EPO神经保护作用的机制可能与脑缺血再灌注后炎症因子IL-1β和ICAM-1表达减少有关。

论文目录

• 主要英文缩略索引（Main English abbreviation index）
• 中文摘要（Chinese abstract）
• 英文摘要（English abstract）
• 论文正文（Text）
• 前言（Introduction）
• 材料和方法（Materials and Methods）
• 结果（Results）
• 讨论（Discussion）
• 结论（Conclusions）
• 附图（Figures）
• 参考文献（References）
• 综述（Review）
• 综述参考文献（References of the Review）
• 攻读硕士学位期间发表的论文（Articles Published in Studying for Master’s Degree）
• 致谢（Acknowledgements）