胡月飞马静
(黑龙江省医院医院感染管理科黑龙江哈尔滨150036)
【摘要】所谓的残余消毒剂,其是指在消毒剂的使用或消毒试验后,所用的介质中仍然存有一定量未消除的消毒剂。若在这时对标本进行监测或检验,例如检测样本中存活细菌情况,在抽样时会连同残余的消毒剂一同被采集至样品中,并有可能携带消毒液至培养液及检验体系中。这会使未被杀死的残存细菌生长受到影响,检验不出存活的细菌,导致样本在检验时出现假阴性现象。因此,在进行消毒剂杀菌效果检验及监测后,须首先清除样本中残余的消毒剂,使样本中残存的细菌脱离消毒剂的影响,获取适宜的复苏与生长环境,使检验结果真实有效。
【关键词】残余消毒剂;清除方法;效果
【中图分类号】R187【文献标识码】A【文章编号】1007-8231(2016)07-0237-02
所谓的残余消毒剂,其是指在消毒剂的使用或消毒试验后,所用的介质中仍然存有一定量的未消除的消毒剂[1]。消毒剂的残留会导致标本在进行检验时无法检测出活的细菌种,导致检验结果出现假阴性现象。
1.残余消毒剂的存在方式
消毒剂的存在方式主要有游离方式、粘附或吸附方式及两者结合方式。
1.1游离方式
游离方式主要是指在作用后标本中残余的消毒剂溶解于标本溶液中,以这种游离状态存在的消毒剂相对比较容易去清除,可以使用化学中和法或法稀释法对残余消毒剂进行清除[2]。
1.2粘附或吸附方式
粘附或吸附方式主要是指部分消毒剂相对比较容易粘附或吸附在菌体表面上,在进行一般的洗脱及稀释都不易将其清除。在发生这种情况时,可以对消毒剂残余的标本进行化学中和法进行吸附,例如在使用的中和剂内适当加入表面活性剂等[3]。同时也可以在培养液中适当加入血液,例如无免疫性的羊血或兔血,以上方法都可以获得相对较好的消毒剂清除效果。
1.3两者结合方式
部分化学消毒剂会借助若干的化学键(氢键及范得华引力等)同菌体的蛋白进行结合,这给消除残余的消毒剂增加了一定的难度。在遇到这种情况时会常使用部分具有相反极性中和剂来进行清除,例如氨基酸类及血平板。
2.残余消毒剂的清除方法
2.1化学中和法
化学中和法是目前最常用的残余消毒剂清除方法之一。其主要是利用所使用的试剂与消毒剂的化学性质相拈抗,使残余的消毒剂失去原本的性质与活性[4]。从而消除残余的消毒剂对标本中的微生物的影响,其具体的中和方法为残余的酸性的消毒剂使用碱性物质进行中和,残余的氧化性消毒剂使用还原性物质进行中和等。
2.2稀释中和法
稀释中和法主要是指对残留消毒剂的标本使用含有中和剂的稀释液,使其在中和作用的基础上发生适当的稀释,以此来降低标本中残余的消毒剂的浓度,使其不会对存活的菌种发生影响。稀释中和法适用于使用了浓度系数偏高的消毒剂,例如酚类消毒剂等[5]。稀释中和法的缺点是若标本中存活的菌数已经较少,经过再稀释后会使标本中的细菌数大幅度降低,导致在进行检测时检验不出,致使假阴性的结果发生。因此在使用稀释中和法时,标本的稀释度不可以过大。
2.3过滤冲洗法
过滤冲洗法是指将标本液通过微孔滤膜(孔径为0.45μm),使残余的消毒剂伴随液体通过滤膜,而细菌会被阻留与滤膜上,在经过反复的换水冲洗后,可以不断的清除掉标本中的残余的消毒剂,而后将滤膜移贴至营养琼脂培养液中进行培养。过滤冲洗法适用于那些无法筛选出有效中和剂的残余消毒液,但其使用过程相对比较复杂,对操作人员的技术要求相对较高。
2.4高速离心沉淀清洗法
高速离心沉淀清洗法的操作方法是将标本液体置于无菌的离心管中进行离心处理,放弃上清液后添加无菌的蒸馏水进行再次的离心处理,如此反复操作多次,可以逐步的清除标本中的残余的消毒剂[6]。在一般情况下,细菌标本使用10000~20000r/分钟的离心处理1~2分钟;病毒标本所需要离心速度相对更高,其离心处理时间要低于2分钟。高速离心沉淀清洗法适用于中和剂的挑选较为困难的消毒剂的消。
2.5含血培养液培养法
因为血液具有十分丰富的营养与良好的吸附作用,当细菌处于极为不利的生长环境下时,其一旦接触到含有血液的培养液时,多数情况下可以恢复其生长。含血培养液培养法测操作方法为在普通的营养琼脂培养液内加入5%的无免疫性的兔血或羊血。在进行试验时,将标本注入接种至无菌的平皿内,对其倒入血液培养液进行混匀培养即可。
3.清除标准
是否有效的清除残余的消毒剂;对标本中的微生物无伤害,不会影响受损伤的微生物复苏,不会影响载体上的微生物的洗脱,不会减少细菌的有效回收量;对培养液中的营养成分不会产生拮抗反应,不会影响到培养液透明度;病毒的灭活试验所用的中和剂应该对标本培养病毒无伤害性,不会破坏细胞的营养液的成分[7];不会影响到细菌及病毒检测时的检测结果的灵敏度。
4.注意事项
首先在进行残余消毒剂清除时需要设计相对完整的实验步骤(6步实验法),对设计的各组实验要进行细致的观察,不应有所遗漏,其各种的试验条件都应同实际的杀菌试验条件一致。而后在进行预备试验时要做好试验,并选择最低的有效浓度及作用时间,准确的掌握标本的菌悬液浓度,以此来确定标本的稀释度[8]。最后对于那些选择中和剂相对较难的复方性的消毒剂及中草药消毒剂,应该使用血平板培养,在必要时可以使用动物接种法确定进行抑菌或者杀菌。
【参考文献】
[1]李久威.不同预冲方式对清除复用透析器残余消毒剂的观察[J].吉林医学,2011,32(17):3567-3568.
[2]王霞,程悦,朱军,李奕,李霞,付永刚.改变预冲方法对透析器消毒液残留的影响[J].西南国防医药,2013,23(12):1333-1335.
[3]严星环,林和波,任亚东.75%乙醇消毒剂微生物限度检查方法研究[J].引文版:医药卫生,2015,1(4):9.
[4]金燕飞,厉永刚,姜侃,黄建锋,汪新.磁珠捕获法在去除残留消毒剂中的应用[J].中国消毒学杂志,2011,28(1):32-34.
[5]蒲君,李密,潘红,曾佳.血液透析上机流程中废液袋不同连接方式的观察[J].护理实践与研究,2015,12(9):112-113.
[6]陈钢进,肖慧明,尤健明,赵帆.熔喷聚丙烯驻极体过滤材料对医用消毒剂的耐受性研究[J].中国个体防护装备,2012,3(4):5-8.
[7]赵克义,刘雷,李子尧.季铵盐类消毒剂杀菌试验中残药去除方法研究[J].中国消毒学杂志,2011,28(4):404-406.
[8]唐叶英,段艳,荣艳,叶冬英.不同预冲方法对清除复用透析器消毒剂的效果观察[J].护理实践与研究,2011,08(3):29-30.