论文题目: 局部应用医用生物蛋白胶缓释神经生长因子对损伤视神经和视网膜节细胞保护作用的实验研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 神经外科
作者: 周迎春
导师: 赵洪洋
关键词: 医用生物蛋白胶,神经生长因子,缓释剂,视神经,损伤,动物模型,闪光刺激视觉诱发电位,神经生长因子高亲和受体,视网膜节细胞
文献来源: 华中科技大学
发表年度: 2005
论文摘要: 第一部分医用生物蛋白胶释放神经生长因子(NGF)的过程目的：明确以医用生物蛋白胶为载体的NGF体外释放速度。方法：分别以全量和半量主体胶溶解液配制医用生物蛋白胶，并分别在两种生物蛋白胶中加入NGF，置于培养基中，不同时间检测培养基中NGF的含量。结果：全量和半量主体胶溶解液配制医用生物蛋白胶内NGF在0、2、4、6、8、10小时分别释放20％、40％、50.7％、80％、100％和20％、40％、50.7％、60％、80％、100％。结论：医用生物蛋白胶作为NGF载体，体外有一定的缓释作用，该作用与医用生物蛋白胶稀释浓度无关。第二部分视神经不完全损伤动物模型的建立目的：建立视神经不完全损伤动物模型。方法：实验动物分A、B、C三组，以动脉瘤夹临时阻断夹直接钳夹致伤视神经，三组钳夹时间分别为10秒、30秒和60秒，伤后检测闪光刺激视觉诱发电位(F-VEP)、视神经组织切片和视网膜节细胞计数。结果：F-VEP P1波：A组伤后1天波幅上升，第14天和第28天波幅逐渐下降，潜伏期逐渐延长；B组伤后1天和第14天波幅进行性下降，潜伏期延长，第28天电活动消失；C组伤后第1天波幅下降潜伏期延长，第14天和第28均未检测到电活动。伤后7天视神经组织切片：A、B、C组视神经受损面积分别为约30％、50％和70％。视网膜节细胞计数：A、B、C组伤后14天分别比正常减少37.4％、50.1％、55.9％，伤后28天分别比正常减少46.5％、65.2％、65.4％。结论：动脉瘤夹临时阻断夹直接钳夹视神经30秒，可建立较好的视神经不完全损伤模型。第三部分视神经不完全损伤动物模型视神经NGF高亲和受体TrkA表达及局部缓释NGF对其表达影响目的：了解TrkA在不完全损伤视神经上的表达及医用生物蛋白胶局部缓释NGF对其表达影响。方法：以RT-PCR方法检测正常视神经、损伤后和损伤后局部应用医用生物蛋白胶缓释神经生长因子3、5、7、10天视神经的TrkA mRNA。结果：正常组相对值为0.44±0.06；损伤组和NGF组3天后表达有明显增高，其中损伤组第3、5、7、10天分别增高至正常的7.1、35.0、19.6和9.5倍，NGF组第3、5、7、10天分别增高至正常的8.0、32.4、20.4和8.5倍，两组之间不同时间测定值均差异无显著性(P＞0.1)，两组与正常比较差异有显著性(P＜0.01)。结论：视神经不完全损伤后TrkA表达短期内增高，局部应用医用生物蛋白胶缓释NGF不影响其表达。第四部分局部应用医用生物蛋白胶缓释NGF对损伤视神经和视网膜节细胞保护作用目的：明确局部应用医用生物蛋白胶缓释NGF是否对损伤视神经和视网膜节细胞有保护作用。方法：动物分为假手术组、空白对照组、NGF肌注组和实验组，NGF肌注组术后肌注NGF450U／d×10d，实验组术中损伤视神经局部注入生物蛋白胶0.2ml(含NGF450U)，分别于术后第14天和术后第28天进行F-VEP检测、视神经组织学检查和视网膜节细胞计数。结果：F-VEP：假手术组、空白对照组、NGF肌注组和实验组第14天P1潜伏期(ms)分别为44.56±4.20、89.10±6.80、64.84±4.73和50.62±3.70，P1波幅(μV)分别为16.00±2.40、6.63±1.06、8.87±1.69和12.57±1.57，第28天P1潜伏期(ms)分别为47.26±4.07、200、92.62±6.47和63.77±5.33，P1波幅(μV)分别为13.80±2.11、0、5.40±0.87和8.53±1.13，各组不同时间测定值均差异有显著性(P＜0.05)。视神经组织学：空白对照组、NGF肌注组和实验组伤后第14天神经纤维分别残存30％、40％和50％，伤后第28天分别为0、15％和35％。视网膜节细胞计数：空白对照组术后第14天、28天细胞数比正常减少50.1％和65.2％；NGF肌注组术后14天、28天细胞数比正常减少33.9％和48.3％；实验组术后第14天、28天细胞数比正常减少20.8％和30.6％。各组之间均差异有显著性(P＜0.01)。结论：局部应用医用生物蛋白胶缓释NGF对损伤视神经和视网膜节细胞有保护作用，且优于NGF肌肉注射。
论文目录:
中文摘要
英文摘要
第一部分 医用生物蛋白胶释放神经生长因子(NGF)的过程
材料与方法
结果
讨论
参考文献
第二部分 视神经不完全损伤动物模型的建立
材料与方法
结果
讨论
参考文献
第三部分 视神经不完全损伤动物模型视神经NGF高亲和受体TrkA表达及局部缓释NGF对其表达影响
材料与方法
结果
讨论
参考文献
第四部分 局部应用医用生物蛋白胶缓释NGF对损伤视神经和视网膜节细胞保护作用
材料与方法
结果
讨论
参考文献
综述1 视神经损伤的治疗研究进展
视神经损伤后病理生理过程
手术治疗视神经损伤
药物治疗视神经损伤
生长因子对损伤视神经和视网膜节细胞的保护及修复作用
问题与展望
参考文献
综述2 神经生长因子及其受体在视觉系统的表达及作用
神经生长因子概述
神经生长因子及受体在视觉系统的正常表达和作用
神经生长因子及受体在视觉系统损伤后的表达变化和作用
问题与展望
参考文献
附图
博士期间参加的科研工作和发表论文
致谢
发布时间: 2007-07-13
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