在端脑发育中骨形态发生蛋白-4对同源域转录因子Nkx2.1表达的影响

在端脑发育中骨形态发生蛋白-4对同源域转录因子Nkx2.1表达的影响

论文摘要

目的:研究在端脑发育中骨形态发生蛋白4(BMP-4)对同源域转录因子Nkx2.1表达的影响,探讨Nkx2.1在胆碱能神经元发生过程中的作用以及能否被BMP-4所诱导。方法:将E16大鼠胚胎端脑细胞做体外无血清原代培养,用不同浓度的BMP-4诱导胆碱能神经元的分化,采取免疫细胞化学染色实验观察不同浓度BMP-4对ChAT阳性免疫反应细胞数量的影响。在实验过程中采取对胆碱能神经元分化影响最大的BMP-4浓度,加入到体外培养的E16大鼠胚胎端脑细胞中,进行RT-PCR检测,以研究Nkx2.1在端脑发育中BMP-4对Nkx2.1基因表达的影响。结果:不同浓度BMP-4对胆碱能神经元发生的影响有所不同。低浓度(10ng/ml、20ng/ml)BMP-4可使ChAT阳性细胞数量增多;高浓度(40ng/ml)BMP-4可使ChAT阳性细胞数量减少。RT-PCR结果显示实验组和对照组Nkx2.1基因表达没有明显区别。结论:(1)在体外培养的E16端脑细胞中,低浓度(20ng/ml)BMP-4能促进胆碱能前体细胞的发生和分化;(2)在体外培养的E16端脑细胞中,高浓度(40ng/ml)BMP-4能抑制胆碱能前体细胞的发生和分化;(3)BMP-4细胞外信号分子不能调节E16端脑细胞Nkx2.1 mRNA的表达。

论文目录

  • 内容提要
  • 第一章 引言
  • 一、端脑的发生和胆碱能神经元的分布
  • 二、与胆碱能神经元发生相关的细胞外信息分子
  • (一) 骨形态发生蛋白(BMPs)与胆碱能神经元发生
  • (二) bFGF 对神经祖细胞的作用
  • (三) NGF 与胆碱能神经元发生
  • (四) Shh 与胆碱能神经元的发生
  • (五) Wnt 与端脑发生
  • 三、与胆碱能神经元发生有关的同源域转录因子
  • (一) Isl-1 与胆碱能神经元发生
  • (二) Nkx2.1 与胆碱能神经元发生
  • (三) Lhx8 与胆碱能神经元发生
  • (四) Vax1 与胆碱能神经元发生
  • 第二章 实验材料及方法
  • 一、主要试剂
  • 二、主要仪器
  • 三、实验方法
  • (一) 实验动物取材及标本制备
  • (二) 免疫细胞化学染色
  • (三) 逆转录-聚合酶链式反应
  • 第三章 结果
  • 一、体外培养 E16大鼠端脑细胞形态观察
  • 二、免疫细胞化学染色
  • 三、RT-PCR 检测结果
  • (一) Nkx2.1mRNA 表达阳性对照实验
  • (二) 体外培养端脑细胞 Nkx2.1mRNA 表达
  • 第四章 讨论
  • 一 、BMP- 4 对体外培养端脑细胞的影响
  • 二、BMP4 与端脑细胞 Nkx2.1 mRNA 的表达
  • 第五章 结论
  • 参考文献
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 致谢
  • 相关论文文献

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