雷帕霉素抑制兔角膜新生血管的实验研究

论文摘要

目的:研究新型免疫抑制剂雷帕霉素(rapamycin, RAPA)对角膜新生血管的影响,探索其临床应用价值。方法:第一部分,体外实验:观察RAPA对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVMC)的影响。MTT法检测不同浓度(0.1ng/ml,1ng/ml,10ng/ml,20ng/ml)的RAPA对VEGF诱导的HUVMC增殖的抑制作用。第二部分,活体实验:制作30只健康成年家兔中度碱烧伤诱导的角膜新生血管( corneal neovascularization,CNV)模型,随机分为5组:治疗1组:10mg/L RAPA溶液滴眼;治疗2组:20mg/L RAPA溶液滴眼;治疗3组:0.25%地塞米松滴眼液滴眼;实验对照组(RAPA滴眼液溶媒滴眼);空白对照组,不给予任何干予措施。于碱烧伤后第2d给予滴眼,4次/d。应用显微镜,角膜照相观察并测量第3,7,14d各组CNV长度,利用图像分析系统计算各组CNV的面积。取角膜组织行病理检查及免疫组织化学半定量观察血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor ,bFGF)的表达。实验所测结果用均数±标准差(±s)表示,统计学分析采用重复测量的方差分析。结果:RAPA能有效抑制VEGF诱导的HUVMC增殖。不同时间点治疗组CNV的长度与面积均小于实验对照组、空白对照组,而不同浓度的RAPA治疗组间无显著差异。VEGF,bFGF在治疗1组、治疗2组与治疗3组表达均明显减弱,在实验对照组与空白对照组染色明显增强。结论:RAPA能显著抑制VEGF诱导的HUVMC增殖,且呈剂量依赖性。局部滴用RAPA滴眼液10mg/L,20mg/L,0.25%地塞米松滴眼液均可抑制碱烧伤兔角膜新生血管的生长,但RAPA作用强于地塞米松。

论文目录

• 符号说明
• 中文摘要
• 英文摘要
• 论文正文：雷帕霉素抑制兔角膜新生血管的实验研究
• 前言
• 第一部分 MTT 法检测雷帕霉素对血管内皮细胞增殖的影响
• 1 实验材料和方法
• 2 实验结果
• 3 讨论
• 第二部分 雷帕霉素抑制兔角膜新生血管的实验性研究
• 1 实验材料和方法
• 2 实验结果
• 3 讨论
• 全文结论
• 参考文献
• 附插图
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的论文目录