论文题目: 牛流行性白血病分子病理及其应用研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 预防兽医
作者: 龙塔
导师: 佘锐萍,潘耀谦
关键词: 牛流行性白血病,细胞凋亡,免疫因子,诊断,免疫组化,流式细胞术
文献来源: 中国农业大学
发表年度: 2005
论文摘要: 牛流行性白血病(Enzootic Bovine Leukosis,EBL)是由牛白血病病毒(Bovine LeukemiaVirus,BLV)所引起的一种具有传染性的肿瘤性疾病。目前,本病几乎遍及全世界各养牛国家,我国在某些牛群中血清阳性率已达30%—50%,对我国养牛业发展已构成一定威胁。至今,还没有控制或治疗该病的疫苗和方法。EBL肿瘤发生的研究目前主要集中在BLV,对宿主基因表达在EBL肿瘤形成中的作用及其在诊治方面的应用研究知之甚少。本研究检查并剖检了14例临床与实验室诊断为EBL的病牛,观察分析了肿瘤发生的情况和特征,采用免疫组织化学ABC法、原位末端标记TUNEL技术和免疫荧光流式细胞检测法等技术,从EBL肿瘤细胞凋亡特性入手,围绕4种凋亡因子和几种免疫相关因子与EBL肿瘤发生的关系及其在诊治方面的应用进行了首次有价值的探索,其目的在于为防治EBL提供科学的理论依据,同时,也将为人类T细胞白血病(Ⅰ.Ⅱ)研究和食品安全提供有重要价值的参考资料。结果如下: 14例EBL病牛全身淋巴结(特别是颈浅淋巴结、肠系膜淋巴结和纵隔淋巴结)和多数器官(心脏、胃和肾脏等)均见有肿瘤病变,显微镜下可见肿瘤细胞多通过淋巴管和血管向组织和器官中播散。建议动检部门应加强对EBL病牛的检疫,对于全身淋巴结和内脏器官有肿瘤病变者,不论肥瘦与否,均应化制作工业用,不能食用。 EBL的发生与突变的P53蛋白过表达有重要关系,携带P53突变株的B淋巴细胞可能是形成肿瘤的靶细胞。Bax和Caspase-3在分化程度较高的瘤细胞中高表达,并与肿瘤细胞凋亡程度呈正相关关系(P<0.01),而Bcl—2的阳性细胞表达强度则随肿瘤细胞恶性程度增加而增加,与肿瘤细胞凋亡程度呈负相关关系(P<0.01)。这一发现为研究EBL肿瘤发生发展的分子机制提供了新的思路,并为EBL的临床诊断和基因治疗提供了科学的理论依据。 本研究表明14例EBL具有B系特征,肿瘤细胞主要来源于Bla细胞。CD19、CD20、CD45RA和CD45RB是诊断B系EBL较为可靠的表面标记。EBL病牛T淋巴细胞亚群明显异常,由于CD4~+和CD8~+细胞平衡失调,降低了机体抗肿瘤的能力而诱发EBL的发生。因此加强饲养管理,提高牛群的免疫抵抗力,在预防本病的发生上具有重要意义。 本研究发现EBL时肿瘤细胞本身存在自发性分泌TNF-a、VEGF和CT的能力。其阳性细胞表达强度显著高于相应瘤旁组织,差异极显著(P<0.01)。其中VEGF的阳性表达率(78.6%)高于TNF-a的阳性表达率(42.9%)。由于VEGF的高表达,促进了肿瘤组织中新血管的生成和肿瘤细胞生长、增殖,导致淋巴结外多数脏器受到不同程度地肿瘤细胞的侵袭。这一结果表明肿瘤组织中VEGF和CT水平可作为诊断EBL指标之一。VEGF还可作为监测复发及化疗疗效判定的有价值指标,抗血管生成在临床抗EBL治疗中应具有重要作用。
论文目录:
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1．1 牛流行性白血病的病原及传播途径
1．1．1 流行性牛白血病的发现及病原的确认
1．1．2 流行性牛白血病的病原特性
1．1．3 牛白血病病毒的流行及传播
1．1．4．牛白血病的发生机理
1．2 牛流行性白血病的诊断
1．2．1 临床诊断
1．2．2．病理学诊断
1．2．3．病原学诊断
1．2．4．血清学诊断
1．2．5．鉴别诊断
1．3 本研究的目的与意义
第二章 牛流行性白血病肿瘤组织几种凋亡因子的表达和分布研究
2．1 流行性牛白血病肿瘤组织P53表达和分布研究
2．1．1 材料与方法
2．1．2 结果与分析
2．1．3 讨论与小结
2．2 牛流行性白血病肿瘤组织中BAX表达和分布研究
2．2．1 材料与方法
2．2．2 结果与分析
2．2．3 讨论与小结
2．3 牛流行性白血病肿瘤组织中BCL-2表达与分布研究
2．3．1 材料与方法
2．3．2 结果与分析
2．3．3 讨论与小结
2．4 牛流行性白血病肿瘤组织中CASPASE-3的表达研究
2．4．1 材料与方法
2．4．2 结果与分析
2．4．3 讨论与小结
第三章 牛流行性白血病P53、BCL-2、BAX表达与细胞凋亡的关系
3．1 牛流行性白血病肿瘤组织中P53表达与细胞凋亡的相关性研究
3．1．1材料与方法
3．1．2 结果与分析
3．1．3 讨论与小结
3．2 流行性牛白血病肿瘤组织BCL-2和BAX表达与细胞凋亡的关系
3．2．1 材料与方法
3．2．2 结果与分析
3．2．3 讨论与小结
第四章 牛流行性白血病T、B淋巴细胞亚群的检测
4．1 牛流行性白血病淋巴肿瘤组织T淋巴细胞亚群的分布研究
4．1．1 材料与方法
4．1．2 结果与分析
4．1．3 讨论与小结
4．2 免疫表型检测在牛流行性白血病诊断中的应用
4．2．1 材料与方法
4．2．2 结果与分析
4．2．3 讨论与小结
4．3B 细胞亚群与牛流行性白血病发生的关系
4．3．1 材料与方法
4．3．2 结果与分析
4．3．3 讨论与小结
第五章 牛流行性白血病肿瘤组织TNF-A、VEGF、CT表达和分布研究
5．1 牛流行性白血病肿瘤组织TNF-A的表达研究
5．1．1 材料与方法
5．1．2 结果与分析
5．1．3 讨论与小结
5．2 牛流行性白血病肿瘤组织VEGF表达研究
5．2．1 材料与方法
5．2．2 结果与分析
5．2．3 讨论与小结
5．3 牛流行性白血病肿瘤组织中降钙素的表达研究
5．3．1 材料与方法
5．3．2 结果与分析
5．3．3 讨论与小结
第六章 总结
第七章 结论
参考文献
致谢
个人简介
发布时间: 2005-06-13
参考文献
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