人乳腺珠蛋白mRNA及Survivin蛋白在乳腺癌患者中的表达及两者相关性的研究

论文摘要

目的乳腺癌是近年女性高发恶性肿瘤,其发病率呈不断上升的趋势。乳腺癌的治疗方法较多,但预后效果却不很理想,主要影响因素是局部复发和远处转移,难以及时诊断。目前乳腺癌已经公认是一种全身性疾病,术后发生局部复发或远处转移的主要原因之一是手术前没有检出的隐匿的微转移癌（occult micro-metastases, OM）或手术中癌细胞由创面等途径进入血液。为了早期发现处于亚临床阶段的微转移癌,我们需寻找一种标志乳腺癌及其早期转移的特异性指标,这对乳腺癌的早期诊断和治疗具有重要的临床意义。人乳腺珠蛋白基因（humanmammaglobin, hMAM）,是一个定位在染色体11q12-13,珠蛋白基因家族的成员,该基因在正常乳腺上皮细胞的表达较低,在乳腺癌细胞的表达较高,并且与乳腺癌组织学、肿瘤分级、分期或激素受体状态有关。Survivin蛋白是一个凋亡抑制蛋白,参与调节细胞分裂,它是控制细胞凋亡周期的检查站,近来有学者研究结果表明它与肿瘤血管形成的联系密切,并且Survivin蛋白的表达似乎是具体的肿瘤,与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、血管受累或整体存活率等潜在相关,有一些最近的数据表明一些早期出现局部复发或远处转移或者预后差的乳腺癌组织中高表达Survivin蛋白。本研究应用巢式-逆转录-聚合酶链反应（N-RT-PCR）方法检测乳腺癌患者外周血中人乳腺珠蛋白mRNA （hMAMmRNA）的表达,应用免疫组织化学S-P（链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶）法检测乳腺癌组织中Survivin蛋白的表达,分析hMAMmRNA Survivin蛋白的表达,及两者与肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移、Her-2表达等乳腺癌临床因素之间的相互关系及之间的关联,并研究手术后全身化疗对控制乳腺癌血道微转移的作用。材料和方法收集70例乳腺癌患者作为实验组：郑州大学第一附属医院乳腺外二科2009年9月至2010年9月1年间手术,且术后经常规病理证实为乳腺癌；收集70例乳腺良性肿瘤作为对照组：郑州大学第一附属医院乳腺外二科2009年9月至2010年9月1年间手术,且术后经常规病理证实为乳腺良性肿瘤。实验组和对照组均应用N-RT-PCR技术检测外周血中hMAMmRNA的表达；实验组70例乳腺癌患者在术前应用N-RT-PCR技术检测外周血中hMAMmRNA的表达,在接受3个周期术后辅全身化疗后,再次应用N-RT-PCR技术检测外周血中hMAMmRNA的表达；所有70例乳腺癌患者术后组织标本应用免疫组织化学S-P法检测其中Survivin蛋白的表达。统计学方法采用SPSS17.0统计分析软件进行分析。结果根据N-RT-PCR技术提取的hMAMmRNA探针分析,70例乳腺癌患者外周血标本中,出现201bp特异性扩增条带有58例,阳性表达率58/70（82.86%）；而70例对照组外周血中只有1例乳腺纤维腺瘤患者出现201bp特异性扩增条带,表达率为1/70（1.41%）。乳腺癌患者hMAMmRNA的阳性表达与临床TNM分期及腋窝淋巴结转移状况有关,并且随淋巴结转移增多,hMAMmRNA的阳性表达率增高（χ2=7.261,P=0.021）, Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期乳腺癌患者外周血hMAM mRNA阳性表达率分别为12.1%、29.3%、57.6%及82.3%,Ⅲ、Ⅳ期比Ⅰ、Ⅱ期hMAM mRNA的阳性表达率高（χ2=5.327,P=0.011）,而与患者年龄、绝经情况、发病年龄、肿瘤大小（分为T≤2cm和T>2cm两组）、病理类型、Ki67、P53及ER、PR、Her-2的表达无关（P>0.05）70例乳腺癌患者中,外周血中hMAMmRNA阳性的58例乳腺癌组织中Survivin蛋白表达阳性的47例,外周血中hMAMmRNA阴性的12例乳腺癌组织中Survivin蛋白表达阳性的3例,乳腺癌组织中Survivin蛋白的表达与乳腺癌患者外周血中hMAMmRNA的表达具有相关性,呈正相关性（χ2=7.113,P=-0.014）,SPearman法相关性分析相关系数R=0.449。70例乳腺癌患者,术后全身化疗前检测58例hMAMmRNA阳性的患者,经全身化疗3周期后hMAMmRNA转为阴性有41例,转阴率70.69%（41/58）,术后全身化疗前12例hMAMmRNA表达阴性的患者化疗后没有1例转为阳性,提示术后全身化疗对降低血液hMAMmRNA的阳性率有显著作用,前后差异有统计学意义（P=0.001）。Survivin蛋白在乳腺癌中的表达水平与患者年龄、绝经情况、发病年龄、肿瘤直径（分为T≤2cm和T>2cm两组）、病理类型、Ki67、P53、及ER、PR、Her-2的表达无关（P>0.05）,而与肿瘤TNM分期、腋窝淋巴结转移状况有关。Survivin在淋巴结转移组阳性率为89.12%（45/51）,明显高于无淋巴结转移组21.53%（4/19）,二者之间有统计学差异（P<0.05）；随无淋巴结转移、1-3枚淋巴结转移、>3枚淋巴结转移,Survivin的阳性表达率增高（χ2=8.227,P=0.017）,对于淋巴结转移的患者, Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期乳腺癌患者Survivin阳性表达率分别为42.3%、69.8%及85.3%,Ⅲ、Ⅳ期比Ⅰ、Ⅱ期Survivin的阳性表达率高（χ2=6.723,P=0.010）,即中晚期乳腺患者与早期乳腺癌患者Survivin的阳性表达率二者之间有统计学差异（P<0.05）。结论hMAMmRNA可作为乳腺癌微小转移尤其是血道微转移的标志物之一；Survivin蛋白可以作为一个判定乳腺癌治疗效果的重要指标；hMAMmRNA的表达与Survivin蛋白的表达具有相关性,共同促进肿瘤新生血管的形成及血道微转移,可一道作为判断乳腺癌预后的参考指标；hMAMmRNA可作为动态判定乳腺癌术后化疗疗效的一个重要指标。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 英文缩写词表
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果