高晓梦:猪VEGFA 3′UTR生物信息学分析及其与miR-361-5p的靶向验证论文

高晓梦:猪VEGFA 3′UTR生物信息学分析及其与miR-361-5p的靶向验证论文

本文主要研究内容

作者高晓梦,张金璧,李齐发(2019)在《猪VEGFA 3′UTR生物信息学分析及其与miR-361-5p的靶向验证》一文中研究指出:为了扩增并分析猪卵泡颗粒细胞中血管内皮生长因子A(VEGFA)基因3编码区(3′UTR)序列、构建VEGFA 3′UTR荧光素酶报告质粒以及利用双荧光素酶报告基因验证miR-361-5p与VEGFA 3′UTR的靶向关系,试验通过RT-PCR扩增VEGFA 3′UTR,并用生物信息学方法分析预测其保守性及潜在的互作miRNA,最后将扩增的VEGFA 3′UTR序列克隆至荧光素酶报告载体中,与miR-361-5p mimics(试验组)或NC mimics(对照组)共同转染293细胞,通过双荧光素酶报告系统检测两组细胞的荧光素酶活性,从而鉴定miR-361-5p与VEGFA 3′UTR的靶向关系。结果表明:在猪卵泡颗粒细胞中成功扩增了VEGFA基因3′UTR序列,其在哺乳动物中保守性较高,有多个潜在miRNA结合位点;成功构建了VEGFA基因3′UTR荧光素酶报告质粒,证明了miR-361-5p可以直接作用于VEGFA基因3′UTR,抑制其荧光素酶活性。

Abstract

wei le kuo zeng bing fen xi zhu luan pao ke li xi bao zhong xie guan nei pi sheng chang yin zi A(VEGFA)ji yin 3bian ma ou (3′UTR)xu lie 、gou jian VEGFA 3′UTRying guang su mei bao gao zhi li yi ji li yong shuang ying guang su mei bao gao ji yin yan zheng miR-361-5pyu VEGFA 3′UTRde ba xiang guan ji ,shi yan tong guo RT-PCRkuo zeng VEGFA 3′UTR,bing yong sheng wu xin xi xue fang fa fen xi yu ce ji bao shou xing ji qian zai de hu zuo miRNA,zui hou jiang kuo zeng de VEGFA 3′UTRxu lie ke long zhi ying guang su mei bao gao zai ti zhong ,yu miR-361-5p mimics(shi yan zu )huo NC mimics(dui zhao zu )gong tong zhuai ran 293xi bao ,tong guo shuang ying guang su mei bao gao ji tong jian ce liang zu xi bao de ying guang su mei huo xing ,cong er jian ding miR-361-5pyu VEGFA 3′UTRde ba xiang guan ji 。jie guo biao ming :zai zhu luan pao ke li xi bao zhong cheng gong kuo zeng le VEGFAji yin 3′UTRxu lie ,ji zai bu ru dong wu zhong bao shou xing jiao gao ,you duo ge qian zai miRNAjie ge wei dian ;cheng gong gou jian le VEGFAji yin 3′UTRying guang su mei bao gao zhi li ,zheng ming le miR-361-5pke yi zhi jie zuo yong yu VEGFAji yin 3′UTR,yi zhi ji ying guang su mei huo xing 。

论文参考文献

  • [1].鸡IFN-β启动子荧光素酶报告载体的构建与活性检测[J]. 陈胜利,唐文雅,郝华芳,王兴龙,刘阳坤,付向晶,张鹏,贺生芳,杜恩岐,杨增岐.  中国兽医学报.2013(06)
  • [2].一种基于Nano Luc荧光素酶报告布鲁菌基因启动子活性质粒的构建及应用[J]. 连拯民,田明星,尹伊,石文弢,包世俊,于圣青.  微生物学通报.
  • [3].猪ITGB1与mi R-181a靶向关系的验证[J]. 邱梅玉,黄涛,胡广东,李涛,孙敬礼.  中国畜牧杂志.2018(12)
  • [4].鸡miRNA let-7b靶向调控GHR基因的双荧光素酶验证[J]. 刘咸,刘燊,岳孝亭,张绮琼,陈裕琪,许嘉慧,邓桃球,林树茂.  中国家禽.2019(05)
  • [5].关岭黄牛MSTN启动子真核报告载体的构建与启动活性研究[J]. 刘敏,许厚强,陈伟,陈祥,李飞.  广东农业科学.2013(17)
  • [6].麒麟鸡Frizzled4基因的miRNA筛选及验证载体构建[J]. 李珊珊,张伟,张权,董晶,李艳青,杜炳旺.  中国家禽.2016(18)
  • [7].猪THRSP基因5′侧翼区序列转录调控活性的鉴定[J]. 陈华,陈宏权,周倩倩,张翼鹏,魏汉卿,李春苗,章孝荣,彭英林.  畜牧兽医学报.2011(03)
  • [8].鹅Toll样受体7基因的克隆及其功能分析[J]. 宋红芹,吴力力,张美花,宦海霞.  中国家禽.2015(23)
  • [9].牛bta-miR-26b靶基因EphA2的鉴定[J]. 于汪洋,李凤霞,孙喆,袁宝,高妍,马腾壑,戴立胜,徐靖博,孙广杰,许橙,张嘉保.  中国兽医学报.2012(04)
  • [10].樱桃谷鸭TYR和VEGFA基因的表达研究[J]. 李华,谭淑雯,叶定泽,谭旭茹,谭旭杰.  中国畜牧杂志.2015(23)
  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自畜牧与兽医的高晓梦,张金璧,李齐发,发表于刊物畜牧与兽医2019年08期论文,是一篇关于非翻译区论文,双荧光素酶报告载体论文,畜牧与兽医2019年08期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自畜牧与兽医2019年08期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

    标签:;  ;  ;  

    高晓梦:猪VEGFA 3′UTR生物信息学分析及其与miR-361-5p的靶向验证论文
    下载Doc文档

    猜你喜欢