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4种都江堰川芎亲缘关系的RAPD分析及浙贝母鳞茎愈伤组织的诱导及植株再生研究

2020-11-21阅读(761)

4种都江堰川芎亲缘关系的RAPD分析及浙贝母鳞茎愈伤组织的诱导及植株再生研究

论文摘要

RAPD(Random Amplified Polymorphism DNA)标记是由Williams等和Welsh等在PCR技术基础上发展起来的一种DNA多态性检测技术。与其它分子标记一样,RAPD标记是以DNA多态性为基础的遗传标记。 RAPD技术是基于与某一单一引物(RAPD一般采用10聚体引物)同源的一段DNA序列,其引物有可能在DNA模板另一链上的不同位置出现,当这些位置之间的距离处于可通过PCR进行扩增的长度范围内时,单个寡核苷酸引物就可以在PCR反应中介导DNA呈几何级数扩增。每个引物通常可以产生3～10个不连续的DNA产物。由于遗传位点的不同,扩增结果呈现多态性。多态性的产生是由突变或重排造成的,因此RAPD可以用于基因组的特征标记。经典的RAPD技术的原理是利用一系列不同碱基随机排列的寡聚核苷酸单链作为引物对所研究的DNA进行扩增,扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳分离、EB显色来检测扩增DNA片段的多态性,这些DNA片段的多态性反映了基因组相应区域的DNA多态性。其特点是直接以DNA的形式存在,标记数量无限,遍布于整个染色体组,标记位点非常丰富,性状稳定,不受环境条件影响,许多标记是共显性标记,因而从它诞生的一开始就展示了极大的生命力。 应用RAPD技术对都江堰川芎(Ligusticum chuanxiong Hort.)1号、2号、3号、4号的亲缘关系进行分析,从80个引物中筛选出20个重复性好、稳定性高的有效引物。20个有效引物共扩增出308条DNA带,其中多态性条带

论文目录

  • 第一部分 4种都江堰川芎亲缘关系的RAPD分析
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 正文
  • 引言
  • 1 材料
  • 2 实验方法
  • 2.1 试剂
  • 2.2 仪器
  • 2.3 DNA提取和浓度、纯度检测
  • 2.4 PCR反应
  • 2.4.1 PCR反应体系
  • 2.4.2 PCR反应程序
  • 2.5 电泳检测
  • 2.6 数据分析
  • 3 结果与分析
  • 3.1 多态性引物扩增结果
  • 3.2 扩增片段遗传距离指数及数据分析
  • 4 讨论
  • 4.1 川芎的遗传多样性
  • 4.2 4种都江堰产川芎的亲缘关系
  • 4.3 藁本属植物的亲缘关系
  • 5 参考文献
  • 综述
  • RAPD及其在植物生物学研究方面的应用
  • 1 DNA多态性检测技术
  • 2 RAPD原理及操作
  • 2.1 原理
  • 2.2 基本操作方法
  • 2.2.1 DNA模板的制备
  • 2.2.2 PCR扩增
  • 2.2.3 电泳分离及谱带的处理记录
  • 2.3.RAPD的主要影响因素
  • 2.3.1 模板
  • 2.3.2 引物
  • 2.3.3 扩增反应的温度和时间
  • 2+离子浓度'>2.3.4 Mg2+离子浓度
  • 2.3.5 Taq DNA聚合酶的用量及纯度
  • 2.3.6 dNTP浓度
  • 3 RAPD技术的应用
  • 3.1 遗传作图和基因定位
  • 3.2 种属特异性鉴定
  • 3.3 分子标记辅助选择
  • 3.4 物种进化及种质资源的鉴定
  • 3.5 植物抗病性研究
  • 4 RAPD标记的局限性
  • 5 RAPD分子标记方法的改进
  • 6 参考文献
  • 第二部分 浙贝母鳞茎愈伤组织的诱导及植株再生研究
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 正文
  • 引言
  • 1 材料
  • 2 实验方法
  • 2.1 不同培养基的筛选
  • 2.2 不同外植体的筛选
  • 2.3 激素配比对培养的影响
  • 3 结果与分析
  • 3.1 培养基的影响
  • 3.1.1 不同基本培养基对鳞茎愈伤组织及球状体诱导的影响
  • 3.1.2 培养基对不同部位外植体的影响
  • 3.2 最佳消毒方法的确定
  • 3.3 激素的影响
  • 3.3.1 不同激素配比对外植体诱导和分化的影响
  • 3.3.2 培养基中激素的变化对分化的影响
  • 4 讨论
  • 4.1 原球茎
  • 4.2 不同消毒剂和消毒方法对浙贝母鳞茎消毒效果的影响
  • 4.3 培养温度的影响
  • 4.4 植物激素在浙贝母组织培养中的作用
  • 4.5 光照的影响
  • 4.6 移栽
  • 4.7 浙贝母试管苗的药用价值
  • 4.8 其它影响因素
  • 5 参考文献
  • 综述
  • 常用中药浙贝母的研究进展
  • 1 浙贝母的种质资源
  • 2 中药浙贝母的主要成分及药理作用
  • 2.1 浙贝母的化学成分
  • 2.2 药理作用
  • 3 浙贝母的生物学特性及栽培种植
  • 3.1 浙贝母的形态特征
  • 3.2 采收加工
  • 3.3 药材性状
  • 3.4 栽培种植
  • 4 贝母属植物的组织培养现状
  • 4.1 培养方法和条件
  • 4.1.1 外植体
  • 4.1.2 培养基
  • 4.1.3 激素
  • 4.1.4 培养方法
  • 4.1.5 贝母碱的生产
  • 4.1.6 胚状体的发生
  • 4.1.7 器官的发生
  • 4.2 影响贝母组织培养的因素
  • 4.2.1 取材部位及取材时间
  • 4.2.2 培养基与激素
  • 4.2.3 分化培养基的形态
  • 4.3.贝母培养的其它方法
  • 4.3.1 有性繁殖
  • 4.3.2 加速繁殖
  • 4.3.3 杂交育种和新品种选育
  • 4.3.4 多倍体育种
  • 5 参考文献
  • 攻读硕士学位期间论文发表情况
  • 致谢
  • 声明

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