大蒜素脂质体的制备及其稳定性研究

论文摘要

脂质体包埋技术是一种新颖的微胶囊技术,由磷脂形成的脂质膜,将生物活性物质包埋后,可起到保护生物活性物质活性、显著提高其稳定性和生物利用度的作用。大蒜素是大蒜的主要有效成分,具有卓越的功效。在食品工业、医药工业、生物研究等领域的应用越来越广泛。但大蒜素容易氧化,稳定性差,生物利用度低。这些因素给它的应用带来了很大限制。本文主要对大蒜素脂质体的制备工艺与稳定性进行了研究。首先以菜籽油脚为原料,采用溶剂分提法、吸附法与柱色谱分离法,制备出了各种纯度的脂质体膜材料:卵磷脂（PC）与脑磷脂（PE）。采用单因素与正交试验相结合的方法,制备出了纯度分别为46.3%与94.5%的PE与纯度为66.7%、72.68%及96.7%的PC。其次研究了大蒜素脂质体的制备工艺,建立了大蒜素的HPLC检测方法与大蒜素脂质体包封率的测定方法;单因素实验与响应面实验相结合,确定了大蒜素脂质体的最佳制备条件为:PC纯度为66.7%最合适,PC与胆固醇的质量比为6.12:1,大蒜素的投药量为49.32mg,吐温-80加入量为215.54mg,在该工艺条件下,大蒜素脂质体包封率预测值为61.103%,实际制备的大蒜素的包封率为59.65%。再次对大蒜素脂质体冻干粉的制备和稳定性进行了研究,结果表明:甘露醇的冻干保护效果最好,磷脂与甘露醇添加配比1:3时,冻干效果达到最佳。180d的稳定性实验发现:脂质体的吸湿增重率先增后减;包封率和药品的保留率也在逐渐的下降,但120d以后趋于平稳;而磷脂的氧化程度却是越来越厉害。稳定性试验说明了脂质体的冻干粉在低温密封的条件下会得到更好的保存。最后,进行了大蒜素包覆脂质体制备的初探,采用聚乙二醇2000、聚乙烯醇和壳聚糖包覆大蒜素脂质体,以包封率为指标,探究出了三种包覆材料的最佳添加浓度,聚乙二醇2000添加浓度为15%时,包封率为71.16% ;聚乙烯醇在0.7%为最佳添加浓度,包封率为79.10%;而纯化壳聚糖的包覆效果明显好于未纯化壳聚糖,它的最佳添加浓度为1.5%,包封率为82.64%。研究发现包覆后的脂质体沉淀明显减少,包封率明显增加。说明这种手段明显抑制了脂质体的融合与聚集也减缓了药物的泄露。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 绪论
• 1.1 脂质体
• 1.1.1 脂质体简介
• 1.1.2 脂质体的特点
• 1.2 脂质体的制备方法综述
• 1.2.1 被动载药法
• 1.2.2 主动载药法
• 1.3 脂质体的检测方法
• 1.3.1 脂质体大小
• 1.3.2 包封率
• 1.4 大蒜素
• 1.4.1 大蒜素简介
• 1.4.2 大蒜素的生理功效
• 1.5 课题选题背景
• 1.6 课题研究的目的和意义
• 1.7 本论文的主要研究内容
• 第2章 脂质体膜材料（磷脂）的提取与纯化
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 原料及主要试剂
• 2.1.2 主要仪器设备
• 2.1.3 检测方法及条件
• 2.1.4 实验方法
• 2.2 结果与讨论
• 2.2.1 PC、PE 定量标准曲线
• 2.2.2 溶剂分提法制备粗PC 与粗PE
• 2.2.3 以粗 PC、PE 为原料吸附制备纯度较高PC、PE 的工艺条件优化
• 2.2.4 以粗PC 与PE 为原料柱色谱制备高纯PC 与PE
• 2.3 小结
• 第3章 大蒜素脂质体的制备工艺研究
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 原料及主要试剂
• 3.1.2 主要仪器与设备
• 3.1.3 分析方法的建立
• 3.1.4 大蒜素脂质体制备单因素试验
• 3.1.5 大蒜素脂质体制备响应面实验
• 3.2 结果与讨论
• 3.2.1 大蒜素定量标准曲线
• 3.2.2 测定包封率分离方法的选择
• 3.2.3 大蒜素脂质体制备单因素试验结果
• 3.2.4 响应面分析实验
• 3.2.5 大蒜素脂质体包封率的响应面优化
• 3.2.6 验证性试验
• 3.3 小结
• 第4章 大蒜素脂质体冻干粉的制备及其贮藏稳定性研究
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 原料及主要试剂
• 4.1.2 主要仪器设备
• 4.1.3 测定方法
• 4.1.4 实验方法
• 4.2 结果与讨论
• 4.2.1 大蒜素脂质体冻干保护剂的筛选
• 4.2.2 冻干保护剂添加配比的筛选
• 4.2.3 脂质体冻干粉的贮藏稳定性试验
• 4.3 小结
• 第5章 大蒜素脂质体的表面修饰初探
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 原料及主要试剂
• 5.1.2 主要仪器设备
• 5.1.3 测定方法
• 5.1.4 实验方法
• 5.2 结果与讨论
• 5.2.1 聚乙二醇2000 包覆大蒜素脂质体的制备与浓度筛选
• 5.2.2 聚乙烯醇包覆大蒜素脂质体的制备与浓度筛选
• 5.2.3 壳聚糖包覆大蒜素脂质体的制备与浓度筛选
• 5.2.4 包覆脂质体外观形态比较
• 5.3 小结
• 第6章 结论与展望
• 6.1 研究总结
• 6.2 创新之处
• 6.3 研究展望
• 参考文献
• 致谢
• 附录
• 攻读学位期间的研究成果